主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆抗体[E113]到CREB(磷酸化S133) 适用于:WB、IHC-P、IP、ICC/IF、Flow Cyt(Intra) 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关偶联物和制剂
(美国)
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [E113]至CREB(磷酸化S133) -
宿主 兔子 -
特异性 该抗体对丝氨酸133磷酸化的CREB具有特异性。 抗体的免疫原与CREB(S136)具有94%的同源性,与ATF1(pS63)具有86%的同源性。 尚未进行任何实验来验证可能的交叉反应性。 这种抗体不能检测到小鼠和大鼠脑相关组织中的信号。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 预测: 鸡肉、奶牛、斑马鱼 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:A431细胞裂解液; 用茴香霉素处理HeLa 30分钟 ICC/IF:A431和HeLa IHC-P:人甲状腺癌、人星形细胞瘤、大鼠大脑和小鼠大脑组织。 IP:HeLa用25 ug/mL茴香霉素处理30分钟。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 在-20°C下稳定12个月。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 图113 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
产品
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替代版本 -
检测试剂盒 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
靶标
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功能 该蛋白结合cAMP反应元件(CRE),该序列存在于许多病毒和细胞启动子中。 CREB刺激与CRE结合的转录。 转录激活由TORC辅激活子增强,该辅激活子独立于Ser-133磷酸化作用。 与昼夜节律同步有关。 -
疾病相关 CREB1缺陷可能是血管瘤样纤维组织细胞瘤(AFH)的原因[MIM:612160]。 恶性纤维组织细胞瘤的一种独特变体,通常发生于儿童和青少年,表现为皮下结节状生长。 典型的显微特征包括与出血区域和囊性假血管间隙密切相关的组织细胞样细胞的分叶状片状物,以及炎性细胞引人注目的袖口,模拟淋巴结转移。 注=在血管瘤样纤维组织细胞瘤患者中发现涉及CREB1的染色体畸变。 带有CREB1的t(2;22)(q33;q12)易位产生EWSR1/CREB1融合基因,这是该肿瘤类型中最常见的遗传异常。 -
序列相似性 属于bZIP家族。 包含1个bZIP域。 包含1个KID(激酶诱导)域。 -
翻译后修饰 受磷酸化刺激。 SCN中Ser-133和Ser-142的磷酸化调节CREB的活性并参与昼夜节律的产生。 Ser-133的磷酸化允许CREBBP结合(根据相似性)。 DNA损伤后发生磷酸化,可能是ATM或ATR引起的。 SUMO1进行酰化。 该蛋白的核定位需要赖氨酸-304上的氨酰化,而不是赖氨酸-285上的氨甲酰化。 缺氧时,氨酰化增强,促进核定位和稳定。 -
细胞定位 核心。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 281713 奶牛 Entrez基因: 1385 人类 Entrez基因: 12912 鼠标 Entrez基因: 81646 老鼠 Omim公司: 123810 人类 瑞士保护银行: 第27925页 奶牛 瑞士保护银行: 第16220页 人类 瑞士保护银行: Q01147号 鼠标
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别名 活性转录因子CREB抗体 cAMP反应元件结合蛋白1抗体 cAMP反应元件结合蛋白抗体
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图片
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所有车道: 1/500稀释度的抗-CREB(磷酸化S133)抗体[E113](ab32096) 车道1: 未经处理的HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: 用茴香霉素以25ug/ml处理HeLa全细胞裂解物30分钟 车道3: HeLa全细胞裂解物用茴香霉素以25ug/ml处理30分钟,然后用磷酸酶孵育细胞膜 每车道15µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 37千帕 观察到的频带大小: 40千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 15秒 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST -
LP处理和未处理HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)的免疫细胞化学/免疫荧光分析用纯化的ab32096标记CREB(1/200)。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%Triton X-100渗透。 约150077 ,Alexa Fluor ® 用488-结合羊抗兔IgG(1/1000)作为二级抗体。 DAPI(蓝色)被用作稀释1/200的核复染 共聚焦图像显示HeLa细胞上的核染色。 经Lambda蛋白磷酸酶处理(31℃,2h)后,信号减弱。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析人甲状腺癌组织标记CREB,纯化ab32096为1/100。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 ab97051型 以羊抗兔IgG H&L(HRP)作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精复染。 -
用纯化ab32096在1/70稀释度(10µg/ml)(红色)下标记CREB的A431(人类表皮样癌)细胞的细胞内流式细胞术分析。 细胞用4%多聚甲醛固定,用90%甲醇渗透。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)(1/2000稀释)作为次级抗体。 使用兔单克隆IgG(黑色)作为同型对照,使用未与一级抗体和二级抗体(蓝色)孵育的细胞作为未标记对照。 -
用25ug/mL茴香霉素处理HeLa(人宫颈腺癌)中的ab32096(1/100稀释度)免疫沉淀CREB(磷酸化S133)30分钟,在40kDa下观察到全细胞裂解物(1区和2区)。 通道1(输入):HeLa用25ug/mL茴香霉素处理30分钟。 全细胞裂解物,10μg。 通道2(+):ab32096+HeLa用25ug/mL茴香霉素处理30分钟。 全细胞裂解物。 通道3(-):兔单克隆IgG( 约172730 )用25ug/mL茴香霉素代替ab32096处理30min。 全细胞裂解物 对于western blotting,ab32096在1/200稀释后 阿布131366 用于IP检测试剂(HRP)的VeriBlot为1/1000,用于检测。 阻塞/稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 1/200稀释度的抗-CREB(磷酸化S133)抗体[E113](ab32096) 车道1: 用250ng/ml樟柳霉素处理HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)30分钟全细胞裂解物 车道2: 小鼠脑裂解物 车道3: 大鼠脑裂解物 车道4: 大鼠小脑裂解物 车道5: 小鼠海马裂解物 车道6: 大鼠海马裂解物 7号车道: 大鼠大脑皮层裂解物 每车道15µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 37千帕 暴露时间: 3秒 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST 这种抗体在小鼠和大鼠脑相关组织中无法检测到信号。 -
A431(人表皮样癌)细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析+/-AP 37℃1h,用纯化的ab32096标记CREB(1/100)。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%Triton X-100渗透。 约150077 ,Alexa Fluor ® 用488-结合羊抗兔IgG(1/500)作为二级抗体。 DAPI(蓝色)用作核染色。 约7291 、小鼠抗微管蛋白(1/1000)和 ab150120型 ,Alexa Fluor ® 还使用了594-共轭山羊抗鼠IgG(1/1000)。 对照1:一级抗体(1/100)和二级抗体, ab150120型 ,Alexa Fluor ® 594-共轭山羊抗鼠IgG(1/500)。 控制2: 约7291 (1/1000)和二级抗体, 约150077 ,Alexa Fluor ® 488-共轭山羊抗兔IgG(1/500)。 -
大鼠海马组织标记CREB的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,用未纯化的ab32096稀释1/100。 切片在37°C下用8%牛奶封闭30分钟之前,通过高压釜进行抗原回收。 用DAKO抗体稀释液将一级抗体稀释1/100,并在4°C下与样品孵育18小时。 使用未稀释的LSAB标记的链亲和素-生物素结合山羊多克隆抗体作为次级抗体。 -
SK-N-SH细胞在37℃和30分钟的温度下与溶媒对照(0和microM)和不同浓度的(S)-3,5-DHPG孵育( 约120007 ). 如文献所述,SK-N-SH细胞中CREB(磷酸化S133)表达增加与(S)-3,5-DHPG浓度增加相关。 用RIPA缓冲液(含蛋白酶抑制剂和原钒酸钠)制备全细胞裂解物,将每个裂解物20微克装入凝胶中,并在还原条件下运行WB。 转移后,用3%的牛奶将膜封闭一小时,然后用未净化的ab32096以1/500稀释度和 约32515 1微克/毫升,在4°C下过夜。 使用与HRP结合的抗兔抗体检测抗体结合( ab97051型 )稀释1/10000,并使用ECL开发解决方案进行可视化。 -
车道1: 1/5000稀释(纯化)的抗-CREB(磷酸化S133)抗体[E113](ab32096) 车道2: 以1/5000稀释度净化 车道1: 未处理的C6细胞裂解物 车道2: 用Calyculin A细胞裂解物处理C6 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )1/1000稀释(山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合) 预测的带宽大小: 37千帕 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 1/5000稀释(纯化)的抗-CREB(磷酸化S133)抗体[E113](ab32096) 车道1: 未经处理的NIH/3T3细胞裂解物 车道2: Calyculin A处理的NIH/3T3 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )1/1000稀释(山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合) 预测的带宽大小: 37千帕 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 1/5000稀释(纯化)的抗-CREB(磷酸化S133)抗体[E113](ab32096) 车道1: 未经处理的HeLa细胞裂解物 车道2: Calyculin A细胞裂解物处理HeLa 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )1/1000稀释(山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合) 预测的带宽大小: 37千帕 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
人甲状腺腺癌组织标记CREB的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,用未纯化的ab32096进行1/250稀释。 A组:细胞未经处理。 B组:用磷酸酶处理细胞。 -
用1/250的未纯化ab32096标记CREB的A431细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析。 A组:细胞未经处理。 B组:用磷酸酶处理细胞。
实验方案
数据表及文件
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文献 (198)
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