主要功能和细节
小鼠单克隆[8F6AE9]至CPT1A 适用于:流式细胞仪、IHC-P、WB、ICC/IF、细胞内ELISA 敲除已验证 反应:小鼠、大鼠、人类 同位素:IgG2b
相关偶联物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 小鼠单克隆抗体 [8F6AE9]至CPT1A -
宿主 鼠标 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 重组片段,对应于人CPT1A的489-773氨基酸。 -
阳性对照 部分人重组CPT1A蛋白; HepG2、H9C2、H4IIE全细胞裂解液; 大鼠心脏线粒体、人肝、大鼠肝和小鼠肝匀浆; H9C2细胞; HeLa细胞 IHC-P:人正常肾脏FFPE组织切片
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常规说明 这种针对CPT1A的单克隆抗体已通过Western blot敲除验证。 在野生型细胞中观察到预期的CPT1A带,而在CPT1A基因敲除细胞中未观察到该带。 该抗体克隆由Abcam制造。 如果您需要为您的实验定制缓冲配方或共轭物,请联系 订单@abcam.com . 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 储存于+4°C。 请勿冻结。 -
存储溶液 pH值:7.4 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:HEPES缓冲盐水 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 硫酸铵沉淀 -
纯化说明 根据SDS-PAGE判断,纯度接近均匀性。 用无血清培养基中生长的杂交瘤体外产生抗体,然后用硫酸铵沉淀浓缩。 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 8F6AE9型 -
同种型 IgG2b -
轻链类型 卡帕 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
阳性对照 -
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应用
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靶标
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组织特异性 在肾脏和心脏中表达强烈,在肝脏和骨骼肌中表达较低。 -
通路 脂质代谢; 脂肪酸β-氧化。 -
疾病相关 CPT1A缺陷是肉碱棕榈酰转移酶1A缺陷(CPT1AD)的原因[MIM:255120]; 也称为CPT-I缺陷或CPT1A缺陷。 CPT1AD是一种罕见的长链脂肪酸氧化的常染色体隐性代谢紊乱,其特征是常在禁食或患病后出现严重的低酮症低血糖发作。 发病于婴儿期或儿童早期。 -
序列相似性 属于肉碱/胆碱乙酰转移酶家族。 -
细胞定位 线粒体外膜。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 1374 人类 Entrez基因: 12894 鼠标 Entrez基因: 25757 老鼠 Omim公司: 600528 人类 瑞士保护: 第50416页 人类 瑞士保护: 第97742页 鼠标 瑞士保护: 第31298页 老鼠 尤尼金: 503043 人类
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别名 肉碱O棕榈酰转移酶1肝亚型抗体 肉碱O棕榈酰转移酶I抗体 肉碱O棕榈酰转移酶I肝亚型抗体
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图片
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车道1: 野生型HAP1细胞裂解物(20µg) 车道2: CPT1A敲除HAP1细胞裂解物(20µg) 3号车道: HeLa细胞裂解物(20µg) 车道4: MCF-7细胞裂解物(20µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在88 kDa时观察到ab128568。 红色-装载控制, 约181602 ,在37 kDa下观察到。 ab128568特别检测到野生型HAP1细胞中CPT1A的预期带。 在CPT1A敲除细胞中未观察到条带。 对野生型和CPT1A敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab128568和 约181602 (GAPDH的负荷控制)分别以1μg/mL和1/10000稀释,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( 约216772 )和山羊抗狂犬病IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
使用ab128568对H9C2细胞(大鼠)中的CPT1A进行免疫荧光染色。
固定: 4%多聚甲醛PBS固定20分钟 渗透: 0.1%Triton X-100 PBS,在室温下摇晃30分钟
舞台调度: 2x Sigma Block 0.1%Triton X-100 H2O,在室温下摇晃2小时 初级抗体: 抗-CPT1A抗体(ab128568)0.5 ug/mL 1x Sigma Block与0.1%Triton X-100在4°C孵育过夜。
清洗: 3x1%NGS 10分钟/洗。 次级抗体: Alexa 488 GAM 1:1000在1%NGS和0.1%Triton X-100 PBS中稀释,在室温下摇晃培养2小时。
清洗: 3x1%NGS 10分钟/洗。 DAPI公司: 在1%NGS、0.1%Triton X-100 PBS中加入20 ng/mL。
清洗: 1x 1%NGS 10分钟/清洗。 -
所有车道: 1µg/ml时的抗-CPT1A抗体[8F6AE9](ab128568) 车道1: 标记 车道2: 部分人重组CPT1A蛋白( 约128569 )0.1微克 3号车道: 0.1µg全长人重组OTC蛋白 车道4: HepG2(人肝癌细胞系)全细胞裂解液(20µg) 车道5: H9C2(大鼠成心肌细胞系)全细胞裂解液,20µg 车道6: H4IIE(大鼠肝癌细胞系)全细胞裂解液,20µg 7号车道: 20µg的RHM(大鼠心脏线粒体匀浆) 第8车道: 20µg时的HLH(人肝匀浆) 9号车道: 20µg时的RLH(大鼠肝匀浆) 10号车道: 20µg时的MLH(小鼠肝匀浆) 次要 所有车道: 山羊多克隆至小鼠IgG–H&L–预吸附(HRP),稀释度为1/10000 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 88千帕 观察到的频带大小: 88千Da 暴露时间: 1分钟 预测的部分重组蛋白带大小: 32千帕 观察到的频带大小: 32千帕 -
在Leica Bond上进行的人类正常肾脏福尔马林固定石蜡包埋组织切片CPT1A染色的IHC图像 TM(TM) 系统使用标准方案F。使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)热介导抗原检索对切片进行预处理20分钟。 然后在室温下用ab128568(0.5µg/ml)孵育该切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
重叠直方图显示HeLa细胞染色ab128568(红线)或无一级抗体(黑线)。 用4%多聚甲醛固定细胞(15分钟),然后用0.1%Triton X-100在PBS、3%BSA中渗透10分钟。然后将细胞在PBS中的3%BSA培养10分钟,以阻止非特异性蛋白质相互作用,随后在22℃下抗体(ab128568,1µg/mL)培养60分钟。 使用的二级抗体是DyLight®488山羊抗鼠IgG(H+L)( 约96871 )以1/1000稀释30分钟。 -
所有车道: 1µg/ml时的抗-CPT1A抗体[8F6AE9](ab128568) 车道1: 标记 车道2: HHH(人心脏匀浆)RIPA提取物无一级抗体免疫沉淀 3号车道: 抗CPT1A抗体8F6AE9免疫沉淀的HHH(人心脏匀浆)RIPA提取物(ab128568) 车道4: HHH(人心脏匀浆)RIPA提取物20µg 次要 所有车道: 山羊多克隆至小鼠IgG–H&L–预吸附(HRP)1:10000 使用ECL技术开发。 在非还原条件下进行。 预测的带宽大小: 88千帕 暴露时间: 1分钟 -
抗-CPT1A抗体(ab128568)染色HeLa细胞(人)的细胞内ELISA
播种: 以1:2稀释系列接种的HeLa细胞在a行以60000个细胞/孔开始,在B行以30000个细胞/孔开始,等等。H行不包含细胞。 表: 所示板中的细胞内ELISA平均数据示例。
固定: 4%多聚甲醛PBS固定15分钟 渗透性: 0.3%Triton X-100 PBS在室温下摇晃30分钟
舞台调度: 2x Sigma Block 0.3%Triton X-100 H2O,在室温下摇晃2小时 初级抗体: 用0.3%Triton X-100在4°C下孵育过夜,将所有原药稀释在1x Sigma Block中。 •第1-3列:抗-CPT1A抗体(ab128568)10 ug/mL •第4-6列:抗-CPT1A抗体(ab128568)1 ug/mL •第7-9列:抗-CPT1A抗体(ab128568)0.1 ug/mL •第10-12列:无主要
清洗: 使用0.3%TWEEN-20 PBS简单4倍
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (148)
Gerdtsson公司 等。 关键代谢蛋白CPT1A的过度表达定义了套细胞淋巴瘤患者对独立于MIPI和补充已确定的高危因素的标准大剂量化疗反应不良。 血液学 108:1092-1104 (2023). 公共医学:36519324 朱S 等。 制备共载荷叶碱和表没食子儿茶素-3-没食子酸盐的微凝胶,用于调节脂质代谢。 前螺母 9:1069797 (2022). 公共医学:36579075 Chinetti G公司 等。 糖尿病引起的巨噬细胞生物学变化可能会降低腹主动脉瘤发生的风险。 代谢物 12:不适用(2022年)。 公共医学:35208203 朱M 等。 AMPK激活剂O304通过促进能量代谢和自噬来防止肾脏衰老。 Front Pharmacol公司 13:836496 (2022). 公共医学:35308246 王M 等。 外显体CD44通过YAP-CPT1A介导的FAO重编程在胃癌细胞间传递淋巴结转移能力。 前Oncol 12:860175 (2022). 公共医学:35359362