组织固定可保存抗原,防止收获的组织自溶和坏死。包埋组织可在切片过程中提供支持,使切片更耐用。
室温下储存多年。 | |||
对甲醛固定的组织切片进行抗原修复,以暴露抗原位点,从而使抗体结合。
用血清或蛋白封闭,防止非特异性抗体结合,并减少背景和潜在的假阳性结果。
使用酶检测方法,需阻断内源性酶,以免混淆您的结果。使用一抗孵育后,需考虑阻断内源性酶,因为像 过氧化氢 这样的处理会破坏抗原表位,影响结合。如果您的抗体是 人力资源计划 一抗偶联物,那么在加入一抗之前,需要先完成阻断处理。
使用辣根过氧化物酶
设计 国际控股公司 实验的关键在于一抗的选择,因为免疫染色的成功需要借助与靶抗原特异性结合的一抗。
需要考虑的要点:一抗在什么种属中培养?一抗是否能与目的蛋白结合?是否曾证实一抗在您的应用中有效?
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对于间接检测,二抗是成功显示一抗分布的关键。
对特定形态或结构进行复染,有助于一抗的定位。
您可通过运行适当的对照品来确认染色模式的有效性,并排除实验伪影。