主要功能和细节
抗CNPase的小鼠单克隆抗体[11-5B] 适用人群:IHC-P、WB、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类 同位素:IgG1
相关共轭物和制剂
概述
-
产品名称 -
描述 小鼠单克隆抗体 [11-5B]到CNPase -
宿主 鼠标 -
经测试应用 -
种属反应性 以下内容: 小鼠、大鼠、人类 预测可用于: 绵羊、兔子、奶牛、狗、猪、恒河猴 不与反应: 鸡肉、豚鼠 -
免疫原 与人CNPase相对应的全长天然蛋白(纯化)。 -
阳性对照 WB:HeLa和Hap1细胞裂解物; 人和小鼠脊髓和脑组织裂解物; 大鼠脑组织裂解物。 IHC-P:FFPE人大脑皮层组织切片。 ICC:初级海马大鼠神经元/胶质细胞,DIV14。 细胞
-
常规说明 该抗体克隆由Abcam公司生产。 如果您需要为您的实验定制缓冲配方或共轭物,请联系 orders@abcam.com . 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
-
形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS,6.97%L-精氨酸 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质G纯化 -
克隆 单克隆 -
协调 11至5B -
同种型 IgG1 -
新冠肺炎疫苗
相关产品
-
替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同种型对照 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物
应用
靶标
-
序列相似性 属于环核苷酸磷酸二酯酶家族。 -
细胞定位 膜。 褪黑激素组。 与脑白质的膜结构紧密结合。 通过质谱鉴定第一阶段至第四阶段的黑素体组分。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 280752 奶牛 Entrez基因: 607694 狗 Entrez基因: 1267 人类 Entrez基因: 12799 鼠标 Entrez基因: 493772 清管器 Entrez基因: 25275 老鼠 Entrez基因: 641337 恒河猴 Omim公司: 123830 人类
查看所有内容 -
别名 2''抗体 2'3'环核苷酸3'磷酸二酯酶抗体 3’’-环核苷酸3’’–磷酸二酯酶抗体
查看所有内容
图片
-
ab6319染色大鼠初级海马神经元/胶质细胞中的CNPase,(取自Neuromics,目录号PC35101),DIV14。 细胞。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Tween渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS Tween中封闭1小时。 然后将细胞在4°C下与ab6319以1µg/ml孵育过夜 ab6046年 ,兔多克隆到β-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 ab150117号 小鼠IgG H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 488)以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 约150080 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 594),稀释度为1/1000(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems TCS SP8)采集图像,显示单个共焦切片。 -
所有车道: 5µg/ml时的抗CNP酶抗体[11-5B](ab6319) 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解液(40µg) 车道2: 40µg的CNPase敲除HAP1全细胞裂解液 3号车道: 20µg的人脑全细胞裂解液 预测的带宽大小: 48千Da 1-3车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在48 kDa下观察到ab6319。 红色负载控制, 约181602 ,在37kDa下观察到。 ab6319在野生型HAP1细胞中识别CNPase,因为在CNPase敲除细胞的预期MW时信号丢失。 在野生型和敲除型细胞中观察到额外的交叉反应带。 对野生型和CNPase敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab6319和 约181602 (兔抗GAPDH负荷对照)分别在4℃、5μg/ml和1/20000稀释度下培养过夜。 用山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 约216772 和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 ab216777号 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
使用ab6319对大鼠脑切片进行CNPase染色的IHC-P图像(1/1600)。 用柠檬酸对石蜡包埋切片进行热介导抗原回收。 然后在21°C下用1%BSA封闭切片10分钟。 初级抗体在21°C下孵育16小时。 然后在1:200的山羊抗鼠(生物素)中培养切片。 -
所有车道: 5µg/ml时的抗CNP酶抗体[11-5B](ab6319) 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: CNP敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 48千Da 观察到的频带大小: 48千Da 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在48 kDa下观察到ab6319。 红色-抗-GAPDH抗体[EPR16891]-负载控制( 约181602 )在37 kDa时观察到。 western blot显示ab6319与野生型HeLa细胞中的CNPase反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约264949 (敲除细胞裂解物 邮编:256877 )已使用。 对野生型HeLa和CNP敲除HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab6319和抗-GAPDH抗体[EPR16891]-负载控制( 约181602 )分别以5µg/ml和1:20000的稀释度在4°C下过夜。 用山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( 约216772 )和山羊抗狂犬病IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 1/100稀释度的抗-CNPase抗体[11-5B](ab6319) 车道1: 人脊髓组织裂解物-总蛋白( 约29188 ) 车道2: 人脑组织裂解物-总蛋白( ab29466年 ) 3号车道: 脊髓(小鼠)组织裂解物 车道4: 脑(小鼠)组织裂解物 车道5: 脊髓(大鼠)组织裂解物 车道6: 脑(大鼠)组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 1/3000稀释的山羊多克隆抗小鼠IgG-H&L预吸附(HRP) 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 48千Da 暴露时间: 1分钟 这种抗体是针对全长天然CNPase产生的,预计可以识别这两种亚型。 亚型CNPI和CNPII的预测分子量分别为45和48kDa。 -
ab6319通过免疫细胞化学/免疫荧光染色大鼠少突胶质细胞中的CNPase。 细胞固定在多聚甲醛中,在25°C下用5%的血清封闭10分钟,然后在25°C下用ab6319在1/200稀释液中培养2小时。 次要使用的是山羊抗鼠Cy3结合多克隆,稀释度为1/100。 -
人类大脑皮层福尔马林固定石蜡包埋组织切片中CNPase染色的IHC图像,使用标准方案F在Leica Bond™系统上进行。该切片使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)进行热介导抗原检索预处理20分钟。 然后在室温下用ab6319(5µg/ml)培养该切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
ab6319通过ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)染色大鼠少突胶质细胞中的CNPase。 细胞用多聚甲醛固定,用甲醇渗透,并用5%牛血清白蛋白在37℃下封闭1小时。 样品与一级抗体(PBS中的1/100)在4°C下孵育18小时。 Alexa Fluor公司 ® 使用594缀合的山羊抗小鼠IgG多克隆(1:200)作为第二抗体。 -
所有车道: 1/750稀释度下的抗CNP酶抗体[11-5B](ab6319) 所有车道: 脊髓匀浆(全组织裂解物) 每车道2µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP结合羊抗鼠IgG 预测的带宽大小: 48千Da 观察到的频带大小: 45.47千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同?
-
用免疫组织化学方法(IHC-P-副甲醛固定石蜡包埋切片)对狗小脑组织切片中的CNPase进行ab6319染色。 用甲醛固定组织,并在21°C下用1%BSA封闭10分钟; 抗原回收是通过柠檬酸盐缓冲液中的热介导进行的。 样品在21°C下与一级抗体(1/1500在封闭缓冲液中)孵育2小时。 采用生物素结合山羊抗鼠IgG多克隆(1/200)作为二级抗体。
实验方案
数据表及文件
-
数据表下载
文献 (135)
歌曲W 等。 Sigma-1受体激活改善糖尿病小鼠卒中后少突胶质细胞生成并促进白质完整性。 分子 28:不适用(2023年)。 公共医学:36615583 杨H 等。 抗LINGO-1抗体治疗可缓解APP/PS1小鼠的认知缺陷并促进海马少突胶质细胞的成熟。 《计算机神经学杂志》 530:1606-1621 (2022). 公共医学:35014704 克鲁格曼M 等。 低形态Dars1M256L小鼠的发育延迟和迟发性HBSL病理学。 神经化学研究 47:1972-1984 (2022). 公共医学:35357600 特卡韦克K 等。 犬神经鞘肿瘤的组织病理学和免疫组织化学评价及更新分类的建议。 兽医科学 9:不适用(2022年)。 公共医学:35622732 麦金太尔WB 等。 细胞-细胞接触介导人类神经干/祖细胞的基因表达和命运选择。 细胞 11:不适用(2022年)。 公共医学:35681435