主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆抗体[E51]到裂解的PARP1 适用人群:WB、IHC-P 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [E51]至分离的PARP1 -
宿主 兔子 -
特异性 该抗体对人PARP1的p25裂解形式具有特异性。 -
试验 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 预测可用于: 中国仓鼠 -
免疫原 人裂解PARP1内的合成肽aa 150-250。 确切的顺序是专有的。 数据库链接: P09874号 -
阳性对照 WB:Jurkat全细胞裂解物( ab7899型 ). HeLa和RAW 264.7全细胞裂解物。 用1uM Staurosporine处理HAP1、HeLa、NIH/3T3和PC-12。 喜树碱处理的Jukat细胞。 用15-乙酰氧基scirpenol处理Jukat细胞。 IHC-P:大鼠结肠组织。 人类卵巢癌和乳腺癌组织。
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常规说明
性能
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中国 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
协调 E51型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
阳性对照 -
相关产品
应用
靶标
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功能 参与碱基切除修复(BER)途径,通过催化参与染色质结构和DNA代谢的有限数量受体蛋白的聚(ADP-核糖基)化。 这种修饰是在DNA损伤后发生的,是导致DNA链断裂修复的检测/信号通路中的一个必要步骤。 介导APLF和CHFR的聚(ADP-核糖基)化。 积极调节MTUS1的转录,消极调节MTUS2/TIP150的转录。 与EEF1A1和TXK形成复合物,作为T辅助因子1(Th1)细胞特异性转录因子,结合IFN-γ启动子直接调节其转录,因此在Th1细胞因子的产生中起重要作用。 需要PARP9和DTX3L招募到DNA损伤位点。 PARP1依赖性PARP9-DTX3L介导的泛素化促进53BP1/TP53BP1、UIMC1/RAP80和BRCA1快速而特异地向DNA损伤位点募集。 -
序列相似性 包含1个BRCT域。 包含1个PARP字母数字域。 包含1个PARP催化域。 包含2个PARP型锌指。 -
翻译后修饰 通过PRKDC和TXK进行磷酸化。 PARP2使Poly-ADP-核糖化。 多聚ADP-核糖基化介导CHD1L向DNA损伤位点的募集。 S-亚硝基化,导致抑制转录调节活性。 -
细胞定位 核心。 细胞核,核仁。 定位于DNA损伤部位。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 100689463 中国仓鼠 Entrez基因: 142 人类 Entrez基因: 11545 鼠标 Entrez基因: 25591 老鼠 Omim公司: 173870 人类 瑞士保护银行: 问题9R152 中国仓鼠 瑞士保护银行: P09874号 人类 瑞士保护银行: 第11103页 鼠标
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别名 ADP核糖基转移酶白喉毒素样1抗体 ADP核糖基转移酶NAD(+)抗体 ADP-核糖基转移酶白喉毒素样1抗体
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图片
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所有车道: 抗分离PARP1抗体[E51](ab32064),稀释度为1/10000 车道1: 野生型A549对照staurosporine(0 uM,72 h)细胞裂解物 车道2: 野生型A549处理的staurosporine(3 uM,24 h)细胞裂解物 3号车道: 野生型A549对照staurosporine(3 uM,72 h)细胞裂解物 车道4: PARP1敲除A549处理的staurosporine(3 uM,24 h)细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 25千Da 观察到的频带大小: 27千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot:抗PARP1抗体[E51](ab32064)以1/10000稀释度染色,以绿色显示; 小鼠抗α-管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度加载控制染色,以洋红色显示。 在Western blot中,ab32064被证明与PARP1特异结合。 在野生型A549细胞裂解液中观察到27kDa的条带,在PARP1敲除细胞系中未观察到该大小的信号。 为了生成该图像,分析野生型和PARP1敲除的A549细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在4°C下与一级抗体孵育过夜之前,在TBS-0.1%吐温®20(TBS-T)中的3%牛奶中封闭膜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
所有车道: 抗分离PARP1抗体[E51](ab32064),稀释度为1/10000 车道1: 野生型(1uM Staurosporine 3小时)HAP1细胞裂解物 车道2: 野生型(Staurosporine对照)HAP1细胞裂解物 3号车道: PARP1敲除(1uM Staurosporine 3小时)HAP1细胞裂解物 车道4: PARP1敲除(Staurosporine对照)HAP1细胞裂解物 车道5: HeLa(1 uM Staurosporine 3小时)细胞裂解物 车道6: HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 25千Da 观察到的频带大小: 27千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-6车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在27 kDa下观察到ab32064。 红色-加载控制 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])。 Western blot显示ab32064与野生型HAP1细胞中的裂解PARP1反应,在PARP1敲除样品中观察到信号丢失。 对野生型HAP1和PARP1敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )在用ab32064和 约8245 (小鼠抗GAPDH抗体[6C5])在4°C下过夜,分别以1/10000和1/20000稀释。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
以1/100工作稀释度纯化的ab32064对石蜡包埋大鼠结肠进行免疫组织化学染色。 使用的二级抗体是兔IgG的HRP聚合物。 样品用苏木精复染。 使用pH 9.0的Tris-EDTA缓冲液进行抗原检索。 使用PBS代替一级抗体作为阴性对照(插图)。 -
车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物(20µg) 车道2: PARP1敲除HAP1全细胞裂解物(20µg) 3号车道: HeLa全细胞裂解物(20µg) 车道4: MCF7全细胞裂解物(20µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在30 kDa下观察到ab32064。 红色负载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 当使用PARP1敲除样品时,ab32064显示与PARP1特异性反应。 对野生型和PARP1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab32064和 约8245 (小鼠抗GAPDH负荷控制)在4°C下以1/10000稀释液孵育过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800 CW) ab216773号 和680CW羊抗鼠二级抗体,在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗分离PARP1抗体[E51](ab32064) 车道1: 1uM Staurosporine处理HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞裂解物3小时 车道2: 未经处理的HeLa全细胞裂解物 3号车道: 1uM Staurosporine处理NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)全细胞裂解物3小时 车道4: 未经处理的NIH/3T3全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 25千Da 观察到的频带大小: 25千Da 封闭/稀释缓冲液5%NFDM/TBST 暴露时间: 1、2车道:1秒 泳道3,4:8秒 -
用未纯化的ab32064在1/100稀释度下对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学染色。 -
用纯化的ab32064以1/100的工作稀释度对石蜡包埋的人卵巢癌进行免疫组织化学染色。 使用的二级抗体是兔IgG的HRP聚合物。 苏木精复染。 使用pH 9.0的Tris-EDTA缓冲液进行抗原检索。 使用PBS代替一级抗体作为阴性对照(插图)。 -
所有车道: 抗分离PARP1抗体[E51](ab32064),稀释度为1/10000 车道1: 未经处理的Jurkat(外周血T细胞白血病细胞系)细胞裂解物 车道2: 喜树碱处理Jurkat细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 25千Da 观察到的频带大小: 25千Da 阻塞缓冲区:5%NFDM/TBST 稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
所有车道: 稀释1/1000的抗分离PARP1抗体[E51](ab32064) 车道1: RAW 264.7(用Abelson小鼠白血病病毒转化的小鼠巨噬细胞系)细胞裂解物 车道2: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP山羊抗兔(H+L),稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 25千Da 观察到的频带大小: 25千Da 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗分离PARP1抗体[E51](ab32064) 车道1: 1μM Staurosporine处理PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系)全细胞裂解物3小时 车道2: 未经处理的PC-12全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 25千Da 观察到的频带大小: 25千Da 暴露时间: 30秒 封闭/稀释缓冲液5%NFDM/TBST -
Jurkat(来自外周血的人类T细胞白血病细胞系)细胞在37°C下与溶媒对照(0μM)和不同浓度的15-乙酰氧基scipenol孵育24小时( 约142381 ). 如文献所述,Jurkat细胞中裂解PARP1(ab32064)的表达增加与15-乙酰氧基scirpenol浓度增加相关。 用RIPA缓冲液(含蛋白酶抑制剂和原钒酸钠)制备全细胞裂解物,将每个裂解物20μg加载到凝胶上,并在还原条件下运行WB。 转移后,用5%牛血清白蛋白封闭膜一小时,然后用ab32064以1/10000稀释度和 约8227 1μg/ml,4°C过夜。 使用与HRP缀合的抗兔抗体检测抗体结合( ab97051型 )并使用ECL开发解决方案进行可视化。
实验方案
数据表及文件
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文献 (344)
李杰 等。 METTL3通过以m6A-YTHDF2依赖性方式调节PTEN表达促进前列腺增生。 细胞死亡病 13:723 (2022). 工作分解结构 ; 人类 . 公共医学:35985997 吴庚(Wu G) 等。 在多囊卵巢综合征中,CircASPH通过miR-375/MAP2K6轴促进KGN细胞增殖。 细胞与分子医学杂志 26:1817-1825 (2022). 公共医学:33372369 费利普·E 等。 含有SAM和HD结构域的脱氧核苷三磷酸三磷酸水解酶(SAMHD1)对DNA损伤反应的调节决定了不同实体瘤类型的预后和治疗效果。 癌症(巴塞尔) 14:不适用(2022年)。 公共医学:35158911 克诺尔J 等。 PACS2-TRPV1轴是内质网应激和肺纤维化期间内质网-线粒体栓系所必需的。 细胞分子生命科学 79:151 (2022). 公共医学:35212819 Shi L公司 等。 miR-146b-5p通过靶向TRAF6促进结直肠癌进展。 实验治疗学 23:231 (2022). 公共医学:35222708