主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆抗体[EP322Y]到CD45 适用人群:WB、ICC/IF、IHC-P、Flow Cyt(Intra) 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EP322Y]至CD45 -
宿主 兔子 -
特异性 这种抗体识别CD45的细胞质结构域。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 -
完 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:THP-1、MCF7、Jurkat细胞裂解物
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
解离常数 (K) D类 ) -
中国 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油、0.05%BSA、PBS -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 (伊拉克) -
克隆编号 EP322Y型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同种型对照 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
靶标
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功能 通过抗原受体激活T细胞所需的蛋白酪氨酸蛋白磷酸酶。 在与DPP4结合时,作为T细胞协同激活的积极调节器。 第一个PTPase结构域具有酶活性,而第二个结构域似乎影响第一个结构域的底物特异性。 T细胞激活后,招募SKAP1和FYN并去磷酸化。 -
疾病相关 PTPRC缺陷是严重联合免疫缺陷的原因,常染色体隐性T细胞阴性/B-细胞阳性/NK-细胞阳性(T(-)B(+)NK(+)SCID)[MIM:608971]。 一种严重联合免疫缺陷(SCID),是一种罕见的先天性疾病,具有遗传和临床异质性,其特征是体液和细胞介导的免疫功能受损、白细胞减少、抗体水平低或缺失。 婴儿期反复、持续感染机会性微生物的患者。 所有类型SCID的共同特征是由于T细胞发育缺陷而缺乏T细胞介导的细胞免疫。 PTPRC的遗传变异与多发性硬化易感性(MS)有关[MIM:126200]。 MS是一种神经退行性疾病,其特征是脱髓鞘的局灶性斑块逐渐积聚,尤其是在脑室周围区域。 周围神经不受影响。 通常在第三或第四个十年发病,在较长时间内呈间歇性进展。 原因尚不明确。 -
序列相似性 属于蛋白酪氨酸磷酸酶家族。 受体类1/6亚家族。 包含2个纤维连接蛋白III型结构域。 包含2个酪氨酸蛋白磷酸酶结构域。 -
结构域 第一个PTPase域与SKAP1相互作用。 -
翻译后修饰 N-和O-糖基化严重。 -
细胞定位 膜。 薄膜筏。 在膜筏中用DPP4染色。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 B220抗体 CD45抗体 CD45抗体
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图片
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所有车道: 1/5000稀释度的抗CD45抗体[EP322Y](ab40763) 车道1: 野生型Jurkat细胞裂解物 车道2: PTPRC CRISPR-Cas9编辑的Jurkat细胞裂解物 3号车道: THP-1细胞裂解物 车道4: MCF7细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 147千Da 观察到的频带大小: 160-220千道尔顿 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:1/5000稀释的抗CD45抗体[EP322Y]染色,以绿色显示; 小鼠抗α-管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab40763显示与CD45特异结合。 在野生型Jurkat细胞裂解液中观察到160-220kDa的条带,在PTPRC CRISPR-Cas9编辑的细胞系中未观察到该大小的信号 约274932 (CRISPR-Cas9编辑的细胞裂解物 约274990 ). 在CRISPR-Cas9编辑的低于160-220kDa的裂解物通道中观察到的条带可能代表CD45的截断形式。 这还没有进一步研究,基因产物的功能特性也没有确定。 为了生成该图像,分析了野生型和PTPRC CRISPR-Cas9编辑的Jurkat细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中5%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( 邮编:216773 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
4%副甲醛固定、0.1%TritonX-100渗透Jurkat细胞的免疫荧光分析,在1/100(6.1 ug/ml)稀释度下用ab40763标记CD45,然后 约150077 羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)抗体,稀释度为1/1000 2 ug/ml(绿色)。 共聚焦图像显示Jurkat细胞膜染色,293T细胞无染色。 约195889年 使用抗α-Tubulin小鼠单克隆抗体-微管标记(Alexa-Fluro®594)在1/200 2.5ug/ml稀释液(红色)下对微管蛋白进行反染色。 核染色为DAPI(蓝色)。 仅二级抗体对照:二级抗体为 约150077 1000 2ug/ml稀释的山羊抗兔IgG H&L(Alexa Fluor®488)。 -
重叠直方图显示Jurkat(来自外周血的人类T细胞白血病细胞系)细胞固定在4%PFA中,并用纯化的ab40763以1/20的稀释度染色(红线)。 使用的二级抗体是FITC山羊抗兔抗体,稀释率为1/500。 兔单克隆IgG用作同型对照(黑线),在没有一级和二级抗体的情况下培养的细胞用作阴性对照(蓝线)。 -
用纯化的ab40763在1/250工作稀释度下对石蜡包埋的人扁桃体进行免疫组织化学染色。 使用的二级抗体是HRP山羊抗兔IgG H&L( ab97051型 )1/500。 样品用苏木精复染。 使用pH 9.0的Tris-EDTA缓冲液进行抗原回收。 使用PBS代替一级抗体作为阴性对照(如插图所示)。 -
用纯化的ab40763在1/100工作稀释度下对Jurkat细胞(外周血T细胞白血病细胞系)进行免疫荧光染色,并用DAPI进行复染。 次要抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗兔( 约150077 ),稀释度为1/1000。 约7291 是一种小鼠抗微管蛋白抗体(1/1000),用于染色微管蛋白和 约150120 (Alexa Fluor公司 ® 594山羊抗鼠软件,1/1000),如右上角面板所示。 细胞固定在4%PFA中,并使用0.1%Triton X 100进行渗透。 阴性对照显示在底部中间和右侧面板中-对于阴性对照1,使用纯化的ab40763,稀释度为1/500,然后使用Alexa Fluor ® 594羊抗鼠抗体( 约150120 )稀释度为1/500。 对于阴性对照2, 约7291 (小鼠抗微管蛋白)以1/500的稀释度使用,然后使用Alexa Fluor ® 488羊抗兔抗体( 约150077 )稀释度为1/400。 -
1/5000稀释(纯化)的抗CD45抗体[EP322Y](ab40763)+20µg的HuT-78细胞裂解液 次要 HRP山羊抗兔IgG(H+L)1/50000稀释 预测的带宽大小: 147千Da 观察到的频带大小: 200千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
未纯化的ab40763在正常结肠淋巴组织中呈阳性染色。 -
1/5000稀释(纯化)的抗CD45抗体[EP322Y](ab40763)+20µg的Raji(人类Burkitt淋巴瘤细胞系)细胞裂解液 次要 HRP山羊抗兔IgG(H+L)1/50000稀释 预测的带宽大小: 147千Da 观察到的频带大小: 200千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
未纯化的ab40763在正常脾组织中呈阳性染色。 -
未净化ab40763显示 阴性染色 在骨骼肌组织中。 -
未纯化的ab40763在正常肾组织中呈阴性染色。 -
1/5000稀释度的抗CD45抗体[EP322Y](ab40763)(未净化,用3%牛奶封闭)+10µg的Jurkat(人类T细胞淋巴母细胞样细胞系)全细胞裂解液 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/50000 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 147千Da 观察到的频带大小: 200千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 8分钟 该印迹是在TA缓冲系统下使用3-8%醋酸三钠凝胶产生的。 凝胶在150V下运行60分钟,然后在30V下转移到硝化纤维膜上70分钟。 然后用3%的牛奶封闭膜一小时,然后用ab40763在4°C下孵育过夜。 使用与HRP缀合的抗兔抗体检测抗体结合,并使用ECL显影溶液进行可视化 约133406 . -
平衡解离常数(KD) 了解有关KD的更多信息 点击此处了解有关KD的更多信息: https://www.abcam.com/index.html?pageconfig=resource&rid=15749
实验方案
数据表及文件
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文献 (41)
歌曲G 等。 单细胞转录组分析提示肝内胆管癌有两种分子亚型。 国家公社 13:1642 (2022). 公共医学:35347134 王X 等。 肿瘤微环境中细胞衰老的综合评估。 生物信息简介 23:无(2022)。 公共医学:35419596 奥斯瓦尔德E 等。 非小细胞肺癌PDX模型中的免疫细胞浸润模式是模型的内在特征,与独特的分子和表型构成相关。 免疫疗法癌症杂志 10:不适用(2022年)。 公共医学:35483746 袁杰 等。 肝癌免疫相关基因介导的友好型分子亚型的构建和实验验证。 前Oncol 12:924059 (2022). 公共医学:35992798 Zeidler JD公司 等。 内皮细胞和免疫细胞内生代谢产生大部分组织维生素B3(烟酰胺)。 iScience公司 25:105431 (2022). 公共医学:36388973