主要功能和细节
小鼠单克隆[2G10]至βIII Tubulin-神经元标记物 适用于:流式细胞周期(内部)、ICC/IF、IHC-P、IP、WB 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类、普通狨猴 同位素:IgG2a
相关共轭物和制剂
(美国)
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产品名称 -
日本 小鼠单克隆抗体 [2G10]至βIII管蛋白-神经标记物 -
宿主 鼠标 -
试验 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人类、普通狨猴、狗鱼、猫鲨 预测可用于: 兔子、鸡、牛、猫、鹌鹑 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HAP1、HeLa、HEK-293细胞裂解物; 人、小鼠和大鼠脑组织裂解物。 IHC-P:人、绒猴和大鼠小脑、小鼠大脑、人延髓。 ICC/IF:NGF-分化的PC12细胞、小鼠分化的神经干细胞、大鼠原代神经元/胶质细胞、DIV14细胞。 流动周期内:SH-SY5Y细胞。
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常规说明 该抗体克隆[2G10]由Abcam制造。 如果您需要在特定的缓冲液配方或特定的结合物中使用此抗体进行实验,请联系 orders@abcam.com 或者您可以找到更多信息 在这里 . Abcam推荐二级学院-山羊抗鼠HRP( 约205719 )和山羊抗小鼠Alexa Fluor ® 488 ( 约150113 ). 请参阅其他 抗小鼠次级抗体 可以与这种抗体一起使用。 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:PBS,6.97%L-精氨酸 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质G纯化 -
克隆 单克隆 -
协调 2G10型 -
同种型 IgG2a -
研究领域
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
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美国
靶标
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功能 微管蛋白是微管的主要成分。 它结合两摩尔GTP,一个位于β链上的可交换位点,另一个位于α链上的不可改变位点。 TUBB3在正确的轴突引导和维持中起着关键作用。 -
组织特异性 表达主要局限于中枢和外周神经系统。 -
疾病相关 TUB3缺陷是先天性3A型眼外肌纤维化(CFEOM3A)的原因[MIM:60638]。 一种先天性眼球运动障碍,表现为限制性眼肌麻痹,影响由动眼神经和/或滑车神经支配的眼外肌。 它的临床特征是向下凝视时眼睛固定、上睑下垂和头部后倾。 先天性眼外肌3型纤维化是一种非进行性、常染色体显性遗传病,其表现多种多样。 患者可能是双侧或单侧受累,他们的眼球运动缺陷包括完全性眼肌麻痹(眼睛固定在低斜视和外斜视位置),以及轻度无症状的眼球运动受限。 眼睑下垂、屈光不正、弱视和代偿性头部位置与更严重的疾病相关。 在某些情况下,眼部表型伴有其他特征,包括发育迟缓、胼胝体发育不全、基底神经节畸形、面部无力、多发性神经病。 -
序列相似性 属于微管蛋白家族。 -
结构域 高酸性的C末端区域可以结合阳离子,例如钙。 -
翻译后修饰 C末端的一些谷氨酸残基是多谷氨酸化的。 这种修饰只发生在谷氨酸残基上,并导致γ-羧基上的聚谷氨酸链。 由于人体中缺少功能性TTLL10,因此也会发生单甘醇化,但不会发生多甘醇化。 单糖基化主要局限于纳入轴突(纤毛和鞭毛)的微管蛋白,而谷氨酰化则普遍存在于神经元细胞、中心粒、轴突和有丝分裂纺锤体中。 这两种修饰可以共存于相邻残基上的同一蛋白质上,降低糖基化水平会增加聚谷氨酰胺化,并相互促进。 这种修饰的确切功能尚不清楚,但它们调节轴突微管的组装和动力学。 -
细胞定位 细胞质>细胞骨架。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 768070 奶牛 Entrez基因: 10381 人类 Entrez基因: 22152 鼠标 Entrez基因: 246118 老鼠 Omim公司: 602661 人类 瑞士保护银行: 第2季度9 奶牛 瑞士保护银行: 问题13509 人类 瑞士保护银行: 问题9ERD7 鼠标
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别名 β3微管蛋白抗体 β4抗体 β-4抗体
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图片
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所有车道: 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: βIII Tubulin敲除HAP1全细胞裂解物 3号车道: HeLa全细胞裂解物 车道4: HEK-293全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 50千Da 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在50 kDa下观察到ab78078。 红色负载控制, 约181602 ,在37 kDa下观察到。 ab78078在野生型HAP1细胞中与β-III Tubulin特异性反应,因为β-III Tubulin敲除细胞中信号丢失。 野生型和β-III Tubulin敲除样品接受SDS-PAGE。 ab78078和 约181602 (兔抗GAPDH负荷对照)分别在4°C、10μg/ml和1/20000稀释度下培养过夜。 用山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 约216772 和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 ab216777号 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
ab78078染色大鼠原代神经元/胶质细胞中的βIII Tubulin,DIV14(从E18大鼠海马脑区制备,由BrainBits,LLC从Transnetyx组织获得,分类号SDHEP)细胞。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Tween渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS Tween中封闭1小时。 然后在4°C下用ab78078以1µg/ml和 约6046 ,兔多克隆到β-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 第150117页 小鼠IgG H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 488)以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 约150080 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 594),稀释度为1/1000(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
在徕卡邦德上进行的人类小脑福尔马林固定石蜡包埋组织切片中ab78078染色βIII Tubulin的IHC图像。 用柠檬酸钠缓冲液(pH 6.0表位检索溶液1)进行热介导抗原检索,对切片进行20分钟的预处理。 然后在室温下用0.5μg/ml的ab78078培养切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 二级对照组中未使用一级抗体(如插图所示)。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
ab78078染色NGF-分化PC12细胞中的β-III Tubulin。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用ab78078以1µg/ml和 约6046 ,兔多克隆到β-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 第150117页 小鼠IgG H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 488)以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 约150080 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 594),稀释度为1/1000(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems TCS SP8)采集图像,显示单个共焦切片。 -
软腭神经支配主要位于口内侧,与分化的肌肉模式互补 在TVP和PLG(A,D,G,J)、LVP(B,E,H,K)、PLP和SPC(C,F,I,L)水平,沿着小鼠软腭前后轴在E13.5(A-C)、E14.5(D-F)、E16.5(G-I)和P0(J-L)处进行(A-L)MHC(绿色)和β3-微管蛋白(红色)联合免疫染色。 虚线表示腭架和舌上皮的轮廓。 箭头表示支配腭架的神经纤维与分化的肌肉互补,主要位于口腔内侧区域。 示意图显示了每个部分的方向和位置。 比例尺:200μm。 用ab78078检测βIII管蛋白。 (来自Grimaldi等人的图4) -
在Leica Bond上进行的小鼠脑福尔马林固定石蜡包埋组织切片ab78078染色的IHC图像 TM(TM) 系统使用标准方案F。使用柠檬酸钠缓冲液(pH6,表位检索溶液1)热介导抗原检索对切片进行预处理20分钟。 然后在室温下用1µg/ml的ab78078培养该切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
所有车道: 1µg/ml时的抗β-Ⅲ型管蛋白抗体[2G10]-神经标记物(ab78078) 车道1: 人脑组织裂解物-总蛋白( 约29466 ) 车道2: 脑(小鼠)组织裂解物 3号车道: 脑(大鼠)组织裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗鼠IgG H&L(HRP)预吸附( 约97040 )稀释1/50000 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 50千Da 观察到的频带大小: 50千Da 暴露时间: 90秒 该印迹是在MOPS缓冲系统下使用4-12%双三凝胶生成的。 凝胶在200V下运行50分钟,然后在30V下转移到硝基纤维素膜上70分钟。 然后使用2%牛血清白蛋白将膜封闭一小时,然后与ab78078在4°C下孵育过夜。 使用与HRP结合的抗鼠抗体检测抗体结合,并使用ECL显影液进行可视化 约133406 -
ab78078用ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)染色小鼠分化神经干细胞中的β-III Tubulin(红色)。 细胞用多聚甲醛固定,用0.2%Triton X-100渗透。 样品与一级抗体(PBS中5µg/ml+3%BSA)在4°C下孵育16小时。 Alexa Fluor公司 ® 使用568缀合的驴抗小鼠IgG多克隆(1/1000)作为第二抗体。 蓝色-DAPI核复染。 -
在Leica Bond上进行的大鼠小脑福尔马林固定石蜡包埋组织切片中ab78078染色βIII Tubulin的IHC图像。 使用EDTA/Tris(表位检索溶液2)热介导抗原检索对切片进行20分钟的预处理。 然后在室温下用0.5μg/ml的ab78078培养切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 二级对照组中未使用一级抗体(如插图所示)。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
使用0.5mg鼠脑全组织裂解液、5µg鼠单克隆抗体[2G10]到神经元特异性βIII管蛋白-神经标记物和50µl蛋白g磁珠(+)免疫沉淀神经元特异性的βIII管蛋白质-神经标记。 对照组(-)未添加抗体。 抗体与蛋白G珠在搅拌下孵育10分钟,将在RIPA缓冲液中稀释的小鼠脑全组织裂解物裂解物添加到每个样品中,并在搅拌下再孵育10min。 通过添加40µl SDS负载缓冲液洗脱蛋白质,并在70℃下培养10分钟 o(o) C类; 在SDS-PAGE凝胶上分离10µl每个样品,转移到硝化纤维素膜上,用5%BSA封闭,并用ab78078进行探测。 次要:山羊多克隆至小鼠IgG轻链特异性(HRP),稀释度为1/5000。 频带:50kDa:神经元特异性βIII管蛋白-神经元标记物。 -
用抗体(ab78078)在甲醛固定石蜡包埋的人延髓切片上对神经元特异性β-III管蛋白进行免疫组织化学检测。 抗原提取步骤:在柠檬酸HIER缓冲液中热介导。 渗透:否。堵塞步骤:1%BSA,在rt°C下保持10分钟。 将1/250的一级抗体稀释液在TBS/BSA/叠氮中培养2小时。 二级抗体:与生物素结合的抗鼠IgG(1/200)。 这一部分是从一个20岁以上的匿名尸检石蜡块上切下的,因此与最近采样的组织相比,我预计会有不同的阳性结果(给出更高的稀释因子,例如我用新鲜小鼠/大鼠CNS块获得的稀释因子) 横切轴突对纵向神经突起的染色非常强烈,细胞体染色不太深,但仍然很容易看到。 -
使用ab78078在甲醛固定的角鲨/鲶鱼PNS组织切片上对神经元特异性β-III Tubulin进行免疫组织化学检测。 抗原提取步骤:柠檬酸中热介导。 封闭:1%BSA在室温下10分钟。 一级抗体ab78078在1/1250培养2小时。 二级抗体:抗鼠IgG结合生物素@1/200这是神经元细胞体和纤维的合成图像; 上图使用彩色箭头表示阳性PNS成分:细胞体(黑色)、L/S(绿色)和T/S(红色)神经纤维,这些神经纤维似乎是三个神经节。 请注意,L/S纤维的染色效果不如T/S纤维。 下图显示了鳃核内单个神经细胞及其过程的线性序列。 -
在甲醛固定石蜡包埋的绒猴小脑切片上使用ab78078进行神经元特异性β-III管蛋白抗体的免疫组织化学检测。 抗原提取步骤:柠檬酸pH6缓冲液中的热介导。 渗透:否。堵塞步骤:1%BSA,在rt°C下保持10分钟。 以1/1000使用的初级抗体在TBS/BSA/叠氮中孵育2小时。 次级抗体:抗鼠IgG结合生物素(1/200)。 -
ab78078染色鸡e6中的β-III Tubulin:用免疫组织化学法(IHC-P-甲醛固定石蜡包埋切片)制作眼组织切片。 组织用甲醛固定,并在室温下用1%牛血清白蛋白封闭10分钟; 抗原回收是通过柠檬酸盐缓冲液中的热介导进行的。 样品与一级抗体(1/1250)孵育2小时。 采用生物素结合山羊抗鼠IgG多克隆(1/200)作为二级抗体。 -
在甲醛固定石蜡包埋鹌鹑胚胎眼切片中使用ab78078进行神经元特异性β-III Tubulin抗体[2G10]的免疫组织化学检测。 抗原提取步骤:在柠檬酸pH6缓冲液中进行热介导。 阻断步骤:1%BSA在rt°C下10分钟。一级抗体在TBS/BSA/叠氮中以1/1250孵育2小时。 二级抗体:与生物素结合的抗鼠IgG抗体,用于1/200。 在这张图像中,玻璃样动脉的衬里细胞呈阳性。 卓越的神经成分特异性:甚至眼眶软骨模型外的小纤维也能清晰显示。 -
叠加直方图显示SH-SY5Y用ab78078染色(红线)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后用抗体(ab78078,1µg/1x10 6 电池)在22°C下保持30分钟。 使用的二级抗体是DyLight®488山羊抗鼠IgG(H+L)( 约96879 )在22°C下,1/500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为小鼠IgG1[ICIGG1]( ab91353型 ,2微克/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 采集了超过5000个事件。 该抗体在用80%甲醇固定/在相同条件下使用的0.1%PBS吐温中透化的SH-SY5Y细胞中给出阳性信号。
实验方案
数据表及文件
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文 (259)
石希杰 等。 TGFβR-1/ALK5抑制剂RepSox诱导成年小鼠肠神经胶质细胞向神经元的转化并影响胃肠运动。 中国药理学报 44:92-104 (2023). 公共医学:35794374 王X 等。 通过单细胞转录组分析,在成人皱襞部发现SOX2阳性视网膜干细胞。 MedComm(2020年) 4:e198(2023)。 公共医学:36582303 Bonnamour G公司 等。 NR2F1调节Waardenburg综合征IV型小鼠模型中的Schwann细胞前体-vs-黑素细胞命运开关。 色素细胞黑色素瘤研究 35:506-516 (2022). 公共医学:35816394 王毅 等。 白藜芦醇对受损的类胚体和大脑器官的神经保护作用。 BMC药物毒理学 23:47 (2022). 公共医学:35820950 阿瓦扎德S 等。 在二维培养模型中建立靶向细胞特异性心脏消融的电穿孔阈值。 心血管电生理杂志 33:2050-2061 (2022). 公共医学:35924470