主要功能和细节
重组(无动物)生产,批次间一致性高,长期供应安全 β-连环蛋白芯片级兔单克隆[E247] 适用于:IHC-P,WB,ICC/IF,IP,芯片 敲出验证 反应:老鼠,老鼠,人

相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [E247]β-连环蛋白-芯片级 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠,老鼠,人 预测可用于: 绵羊,仓鼠,奶牛,猕猴,非洲绿猴 -
免疫原 合成肽。 这些信息是Abcam和/或其供应商的专有信息。 -
阳性对照 WB:A431,HeLa和野生型HAP1,hct116细胞裂解物。 ICC/IF:A431和野生型HAP1细胞。 SW480和SK-N-SH电池。 IHC-P:人肺腺癌、肾腺癌、结肠癌、宫颈癌、乳腺癌、甲状腺组织乳头状癌、大鼠肝和胰腺; IP:A431全细胞裂解液和小鼠脑裂解液。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。在+4°C下短期储存(1-2周)。 交货时等分。 储存在-20°C。避免冻融循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS,40%甘油(甘油,甘油),0.05%牛血清白蛋白 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 E247型 -
同种型 免疫球蛋白 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同型控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
KO细胞颗粒 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
靶标
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功能 典型Wnt信号通路的关键组成部分。 在不存在Wnt的情况下,与AXIN1、AXIN2、APC、CSNK1A1和GSK3B形成复合物,促进N-端Ser和Thr残基的磷酸化,并通过BTRC泛素化CTNNB1,随后被蛋白酶体降解。 在Wnt配体存在下,CTNNB1不泛素化,聚集在细胞核内,作为TCF/LEF家族转录因子的辅激活因子,激活Wnt应答基因。 参与细胞粘附的调节。 大部分β-连环蛋白定位于细胞膜,是E-cadherin/catenin粘附复合物的一部分,被认为是将钙粘蛋白与肌动蛋白细胞骨架偶联。 -
组织特异性 在几种毛囊细胞中表达:基底细胞和外周基质细胞,外根鞘细胞和内根鞘细胞。 在结肠中表达。 -
疾病相关 CTNNB1缺陷与结直肠癌有关[MIM:114500]。 注:CTNNB1的激活突变具有致癌活性,导致肿瘤的发展。 体细胞突变存在于各种肿瘤类型,包括结肠癌、卵巢癌和前列腺癌、肝母细胞瘤(HB)、肝细胞癌(HCC)。 HBs是一种恶性胚胎性肿瘤,主要发生在儿童出生前三年。 CTNNB1中的缺陷是毛基质瘤(PTR)的原因[MIM:132600]; 一种常见的良性皮肤肿瘤。 CTNNB1的缺陷是髓母细胞瘤(MDB)的原因[MIM:155255]。 MDB是一种恶性的侵袭性小脑胚胎性肿瘤,在儿童中有优先表现。 CTNNB1的缺陷是卵巢癌易感性的一个原因[MIM:167000]。 卵巢癌起源于卵巢组织的常见恶性肿瘤。 虽然许多组织学类型的卵巢肿瘤已被描述,上皮性卵巢癌是最常见的形式。 卵巢癌通常是无症状的,即使是晚期疾病,其症状和体征也很模糊。 因此,大多数病人被诊断为晚期疾病。 注:在涎腺多形性腺瘤(涎腺最常见的良性上皮性肿瘤)中发现涉及CTNNB1的染色体畸变。 带PLAG1的t(3;8)(p21;q12)易位。 -
序列相似性 属于β连环蛋白家族。 包含12个手臂重复。 -
翻译后修饰 GSK3B的磷酸化需要另一个激酶预先磷酸化Ser-45。 然后磷酸化从Thr-41进行到Ser-37和Ser-33。 表皮生长因子刺激酪氨酸磷酸化。 Tyr-654上的磷酸化降低CDH1结合,增强TBP结合。 当GSK3B磷酸化时,SCF(BTRC)E3连接酶复合物泛素化,导致其降解。 被含有UBE2D1、SIAH1、CACYBP/SIP、SKP1、APC和TBL1X的E3泛素连接酶复合物泛素化,导致其随后的蛋白酶体降解。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 细胞质>细胞骨架。 细胞连接>粘附连接。 细胞连接。 细胞膜。 不稳定(高水平磷酸化)或与CDH1结合的细胞质。 当核稳定时(低水平的磷酸化)转移到细胞核。 与GLIS2和MUC1的相互作用促进了核移位。 与EMD的相互作用抑制了核定位。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 539003 奶牛 Entrez基因: 1499 人类 Entrez基因: 12387 老鼠 Entrez基因: 84353 老鼠 Entrez基因: 绵羊 奥米姆: 116806 人类 瑞士保护: Q0VCX4型 奶牛 瑞士保护: 35222页 人类
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别名 b-连环蛋白抗体 β连环素抗体 β连环素抗体
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图片
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所有车道: 抗β连环蛋白抗体[E247]-芯片级(ab32572),稀释1/5000 车道1: 野生型HepG2细胞裂解物 车道2: CTNNB1基因敲除HepG2细胞裂解物 车道3: HeLa细胞裂解物 车道4: A431细胞裂解物 每道20微克的裂解物/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测带大小: 86千伏安 观察到的频带大小: 85千伏安 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗β连环蛋白抗体[E247]-1/5000稀释度切片级染色,绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( ab8245 )在1/20000稀释度下加载控制染色,以红色显示。 在Western blot中,ab32572与β连环蛋白特异结合。 在野生型HepG2细胞裂解物中,在85 kDa处观察到一条带,而在CTNNB1基因敲除细胞株中,在这个大小没有观察到信号( 阿布277911 ). 为了得到这张图像,我们分析了野生型和CTNNB1基因敲除的HepG2细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝酸纤维素膜上。 在3%的牛奶中,在TBS-0.1%吐温中,膜被阻塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。在TBS-T中洗涤印迹四次,在室温下与二级抗体一起培养1小时,再次洗涤四次,然后成像。 使用的次级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收( ab216773号 )山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收( ab216776号 )稀释1/20000。 -
ab32572在CTNNB1(β-连环蛋白)野生型HAP1细胞(上图)和CTNNB1(β-连环蛋白)基因敲除的HAP1细胞中的ab32572染色。 细胞用100%甲醇固定(5min),用0.1%Triton X-100渗透5min,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1h。 然后用1/250稀释度的ab32572培养细胞 ab195889号 在1/250稀释度下(以伪红色显示)在+4°C下过夜,然后在室温下进一步培养1h 山羊抗兔IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附(ab150081)二级抗体 浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA。 这张照片是用共焦显微镜(徕卡微系统公司,TCSP8)拍摄的。 -
车道4: 山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附( ab216773号 )稀释1/5000 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: CTNNB1(ß-catenin)敲除HAP1全细胞裂解物 车道3: HeLa全细胞裂解物 车道4: A431全细胞裂解物 每道20微克的裂解物/蛋白质。 预测带大小: 86千伏安 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在90 kDa下观察到ab32572。 红色-装载控制, ab8245 ,在37 kDa下观察到。 ab32572在野生型HAP1细胞中与CTNNB1(β-catenin)特异性反应。 用β-catenin基因敲除样品未观察到条带。 野生型和CTNNB1(β-catenin)基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab32572和 ab8245 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别在4℃和1/5000稀释度和1/10000稀释度下培养过夜。 用 山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附(ab216773) 以及 山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®680RD)预吸附(ab216776) 二级抗体在1/20000稀释度下在室温下进行1小时成像。 -
人宫颈癌组织β-连环蛋白在1/500稀释度下的免疫组化分析。 用柠檬酸缓冲液(pH6)进行热介导抗原回收 -
根据Abcam双X-芯片协议*从HCT 116细胞制备染色质。 细胞用1.5mmEGS固定30min,然后用甲醛固定10min。 芯片使用25µg染色质、5µg ab32572(红色)或5µg兔正常IgG进行 ab172730 (灰色)和20µl蛋白质A/G琼脂糖珠。 免疫沉淀的DNA用实时PCR定量(活性和非活性位点采用Taqman方法,异色位点采用Sybr green方法) 底漆和探针来自纸张PMID:28625518 * http://www.abcam.com/resources?keywords=X%20ChIP%20protocol -
所有车道: 抗β连环蛋白抗体[E247]-芯片级(ab32572),稀释1/500 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: CTNNB1基因敲除HeLa细胞裂解物 每道20微克的裂解物/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测带大小: 86千伏安 观察到的频带大小: 86千伏安 车道1-2: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在86 kDa时观察到ab32572。 红色-抗GAPDH抗体[6C5]-负载控制( ab8245 )在37 kDa下观察。 westernblot显示ab32572与野生型HeLa细胞中的β连环蛋白反应。 敲除细胞系时出现信号丢失 阿布255352 (敲除细胞裂解物 ab263756 )被利用了。 对野生型HeLa和CTNNB1基因敲除的HeLa细胞裂解液进行SDS-PAGE分析。 在0.1%TBST和3%脱脂奶粉中室温下封膜1h。 ab32572和抗GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( ab8245 )分别在1:500稀释度和1:20000稀释度下在4°C下过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye)制备印迹 ® 800CW)预吸收( ab216773号 )山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收( ab216776号 )二级抗体在成像前在室温下稀释1小时。 -
所有车道: 抗β连环蛋白抗体[E247]-芯片级(ab32572),稀释1/5000 车道1: 野生型hct116细胞裂解物 车道2: CTNNB1 CRISPR-Cas9编辑HCT 116细胞裂解物 每道20微克的裂解物/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测带大小: 86千伏安 观察到的频带大小: 95千伏安 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗β连环蛋白抗体[E247]-1/5000稀释度切片级染色,绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( ab8245 )在1/20000稀释度下加载控制染色,以红色显示。 在Western blot中,ab32572与β连环蛋白特异结合。 在野生型HCT 116细胞裂解物中,在95 kDa处观察到一条带,而在CTNNB1 CRISPR-Cas9编辑的细胞株中没有观察到这种大小的信号 阿布273712 (CRISPR-Cas9编辑细胞裂解液 ab275247型 ). 在CRISPR-Cas9编辑的裂解产物通道中观察到的低于95kda的条带可能代表β连环蛋白的截短形式。 这还没有进一步的研究,基因产物的功能特性也没有确定。 为了生成这张图像,我们分析了野生型和CTNNB1 CRISPR-Cas9编辑的HCT 116细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝酸纤维素膜上。 在5%的牛奶中,在TBS-0.1%吐温中,膜被阻塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。在TBS-T中洗涤印迹四次,在室温下与二级抗体一起培养1小时,再次洗涤四次,然后成像。 使用的次级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收( ab216773号 )山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收( ab216776号 )稀释1/20000。 -
不同批次的ab32572在A431(人表皮样癌上皮细胞)裂解液上以2.0µg/ml进行测试。每个通道中装载15µg裂解液。 92 kDa时观察到的条带。 -
抗β-连环蛋白抗体[E247]-芯片级(ab32572),1/10000稀释+A431(人表皮样癌上皮细胞)15µg全细胞裂解 次要 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051 )稀释1/20000 预测带大小: 86千伏安 观察到的频带大小: 92千伏安 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭/稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:180秒 -
人乳头状癌组织β-连环蛋白在1/500稀释度下的免疫组化分析。 用柠檬酸缓冲液(ph6)进行热介导抗原回收。 -
β-连环蛋白从0.35mg A431(人表皮样癌上皮细胞)全细胞裂解液中以1/50稀释度ab32572(0.35mg裂解液中2μg)免疫沉淀。 免疫沉淀用ab325721/500稀释液(2μg/ml)进行Western印迹。 IP检测试剂(HRP)的VeriBlot( ab131366号 )以1/1000稀释度作为二级抗体。 Lane 1:A431(人表皮样癌上皮细胞)全细胞裂解液10μg 通道2:A431全细胞裂解液中的ab32572 IP 通道3:兔单克隆抗体( ab172730 )而不是A431全细胞裂解液中的ab32572。 封闭稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:3秒 车道1: 抗β连环蛋白抗体[E247]-芯片级(ab32572),稀释1/500(2µg/ml) 车道1: A431(人表皮样癌上皮细胞)10微克全细胞裂解 车道2: A431全细胞裂解液中的ab32572 IP 车道3: 兔单克隆抗体( ab172730 )而不是A431全细胞裂解液中的ab32572 次要 车道1: IP检测试剂(HRP)的VeriBlot( ab131366号 )稀释1/1000 观察到的频带大小: 90千伏安 为什么实际的频带大小与预测的不同? -
人肺腺癌组织β-连环蛋白在1/500稀释液中的免疫组化分析。 用柠檬酸缓冲液(ph6)进行热介导抗原回收。 -
ab32572对BIO处理的SW480细胞的β-连环蛋白染色( ab120891号 )国际商会/国际单项体育联合会。 如文献所述,β连环蛋白表达增加与生物浓度增加相关。 细胞在37°C下在含有不同浓度 ab120891号 (BIO)在DMSO中,室温下用4%甲醛固定10min,室温下用含10%山羊血清、0.3m甘氨酸、1%牛血清白蛋白和0.1%吐温的PBS封闭2h。 在含有1%BSA和0.1%吐温的PBS中,在4℃下用ab32572(1/200)稀释液对处理过的细胞进行染色。 A 山羊抗兔IgG H&L(DyLight®488)预吸附(ab96899)二级抗体 以1/250稀释度作为次级抗体。 细胞核用DAPI复染,呈蓝色。 -
免疫印迹-抗β连环蛋白抗体[E247](ab32572) 奥尔森等人。 2014年12月23日; 9(12):e115496。 doi:10.1371/期刊。 波恩。 0115496。2014年电子集锦。 图3。 根据Creative Commons许可证复制 http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ 用ab32572在1/5000稀释度下结合抗肌动蛋白抗体对WT和基因破坏细胞的总细胞提取物进行WB分析。 给出了β-连环蛋白、截短β-连环蛋白和肌动蛋白带的位置和全长。 对于野生型细胞,每个车道使用5µg TP和基因中断克隆30µg TP。 细胞在含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂片的RIPA缓冲液中裂解。 通过离心法清除细胞裂解物,并将蛋白质浓度为5–30µg的总蛋白装入SDS样品缓冲液中,并将其分离。 次级抗体为驴抗兔IgG-HRP,稀释1:5000。 -
ab32572在人肾癌组织中呈阳性染色。 人肾癌组织β-连环蛋白在1/500稀释度下的免疫组化分析。 用柠檬酸缓冲液(ph6)进行热介导抗原回收。 -
ab32572在奥氮平处理的人神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH中的β-连环蛋白染色( ab120736号 )国际商会/国际单项体育联合会。 如文献所述,β连环素表达增加与奥氮平浓度增加相关。 细胞在37°C下在含有不同浓度的培养基中培养24小时 ab120736号 (奥氮平)在二甲基亚砜中,室温下用4%甲醛固定10分钟,室温下用含10%山羊血清、0.3 M甘氨酸、1%牛血清白蛋白和0.1%吐温的PBS封闭2小时。 在含有1%BSA和0.1%吐温的PBS中,在4°C下用ab32572(1/200稀释度)对处理过的细胞进行染色。 A 山羊抗兔IgG H&L(DyLight®488)预吸附(ab96899)二级抗体 以1/250稀释度作为次级抗体。 细胞核用DAPI复染,呈蓝色。 -
抗β连环蛋白抗体[E247]-芯片级(ab32572),1/5000稀释+U-2 OS(人骨肉瘤上皮细胞系)全细胞裂解液 在还原条件下进行。 预测带大小: 86千伏安 观察到的频带大小: 90千伏安 为什么实际的频带大小与预测的不同? ab32572免疫印迹法检测U-2os细胞全细胞裂解物。 在21℃下用5%的牛奶封闭凝胶1小时。将一级抗体稀释1/5000,在4℃下孵育12小时。将HRP结合的猪抗兔抗体用作次要抗体。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA固定石蜡切片)-抗β-连环蛋白抗体[E247](ab32572) Jin等人。 2015年8月7日; 10(8):e0133770。 doi:10.1371/期刊。 波恩。 0133770。2015年电子收款。 图2。 根据Creative Commons许可证复制 http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ β-连环蛋白在肝细胞癌组织和癌旁肝组织中的不同表达水平。 将hct、plt石蜡包埋,切取5μm厚切片进行苏木精-伊红染色和免疫组化(IHC)分析。 ab32572以1:400的稀释度使用。 第二种抗体是生物素化的IgG,在37℃下孵育40分钟。最后,用3,3-二氨基联苯胺溶液观察组织切片并用苏木精复染。 用磷酸盐缓冲液代替原抗体作为IHC的对照。 hct(E-H)和PLTs(M-P)分别检测到β-连环蛋白呈阴性、弱、中、强染色活性。 上图E部分,完整图像请参阅原稿。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (766人)
贝拉斯科K 等等。 16种SCHAD错义变异的功能评价:只有氨基酸替代导致婴儿先天性高胰岛素症,才能导致体外功能表型的丧失。 J继承元数据库 44:240-252(2021年)。 公共医疗:32876354 王Z 等等。 短程RON(sf-RON)通过激活ßcatenin/SIX1信号通路促进胃癌细胞糖代谢促进细胞增殖。 细胞生物毒物 37:35-49(2021年)。 公共医疗:32399910 王伟丽 MiR-216a-5p通过靶向KDM3A和失活Wnt/ß-catenin信号通路减轻大鼠慢性缩窄性神经痛。 神经症研究 170:255-264(2021年)。 公共医疗:32889066 乔C 等等。 SNHG17/miR-384/ELF1轴通过转录调控CTNNB1激活Wnt/ß-catenin通路促进口腔鳞癌细胞生长。 癌症基因疗法 不适用:不适用(2021年)。 公共医疗:33531646 风扇W 等等。 Circ_0031242沉默通过miR-924/POU3F2轴减轻DDP耐药肝癌细胞的进展和耐药性。 癌症管理研究 13: 743-755年(2021年)。 公共医疗:33531841