主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR22610-19]至ATF3-ChIP级 适用于:ChIC/CUT&RUN-seq、Flow Cyt(Intra)、WB、IHC-P、ICC/IF、IP、ChIP 敲除已验证 反应对象:老鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
-
产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR22610-19]至ATF3-ChIP等级 -
宿主 兔子 -
特异性 不建议对鼠标使用IHC。 由于某些样本中内源性表达水平较低,可能需要刺激才能检测到目标蛋白。 有关推荐的治疗条件和阳性对照,请参见下图。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠,人类 -
免疫原 重组片段。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:THP-1用80nM TPA处理过夜,然后用1µg/ml脂多糖(LPS)处理8小时,全细胞裂解液; RAW 264.7(+/-用1µg/ml脂多糖(LPS)处理2小时)全细胞裂解物; HepG2、HAP1、A549和HCT116全细胞裂解物。 IHC-P:人胎盘和霍奇金淋巴瘤组织。 ICC/IF:THP-1细胞经PMA和LPS处理。 流式细胞术:用PMA和LPS处理THP-1细胞。 IP:RAW 264.7(LPS处理)全细胞裂解物 ChIP:由HeLa细胞制备的染色质。
-
常规说明
性能
-
形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS、40%甘油、0.05%牛血清白蛋白 -
正在加载浓度信息。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR22610-19型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
-
替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
相关产品
应用
|
||
|
||
|
||
|
||
|
||
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
靶标
-
功能 该蛋白结合cAMP反应元件(CRE)(共识:5'-GTGACGT[AC][AG]-3'),该序列存在于许多病毒和细胞启动子中。 用ATF位点抑制启动子的转录。 它可以通过稳定启动子上抑制性辅因子的结合来抑制转录。 异构体2可能通过将抑制性辅因子从启动子隔离开来来激活转录。 -
序列相似性 属于bZIP家族。 ATF子系列。 包含1个bZIP域。 -
细胞定位 核心。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 激活转录因子3抗体 ATF3抗体 ATF3_HUMAN抗体
查看所有内容
图片
-
所有车道: 抗-ATF3抗体[EPR22610-19]-ChIP等级(ab254268),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HCT116细胞裂解物 车道2: ATF3敲除HCT116细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在21 kDa时观察到ab254268。 红色-加载控制 约8245 在37kDa下观察到。 ab254268重组抗-ATF3抗体[EPR22610-19]在野生型HCT116细胞中与ATF3特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约266872 (敲除细胞裂解物 ab257074号 )已使用。 野生型和ATF3基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab254268和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别以1000分之一和20000分之一的稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
ab254268染色野生型Hap1细胞中的ATF3(顶部面板)和ATF3敲除Hap1的细胞(底部面板)。 细胞用4%多聚甲醛固定(10分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与稀释度为1/100的ab254268一起孵育 约7291 (Tubulin)以1/1000稀释度在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor®594)( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以伪红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
所有车道: 抗-ATF3抗体[EPR22610-19]-ChIP等级(ab254268),稀释度为1/1000 车道1: 野生型A549细胞裂解物 车道2: ATF3敲除A549细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在21 kDa时观察到ab254268。 红色-加载控制 约8245 在37kDa下观察到。 ab254268重组抗-ATF3抗体[EPR22610-19]在野生型A549细胞中与ATF3特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约266955 (敲除细胞裂解物 ab257075号 )已使用。 野生型和ATF3基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab254268和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别以1000分之一和20000分之一的稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗-ATF3抗体[EPR22610-19]-ChIP等级(ab254268),稀释度为1/1000 车道1: 293T(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: 人肝组织裂解物 3号车道: Raw264.7(小鼠abelson小鼠白血病病毒诱导的肿瘤巨噬细胞)全细胞裂解物 车道4: 小鼠肝组织裂解物 车道5: MEF(小鼠胚胎成纤维细胞(永生化))全细胞裂解物 车道6: 小鼠心脏组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 暴露时间: 180秒 阻塞/稀释缓冲液和浓度: 5%NFDM/TBST。 GAPDH的兔单克隆抗体[EPR16891]( 约181602 )用作加载控制。 ATF3在一些细胞系和组织中的表达水平较低,但在治疗过程中增加(PMID:8622660,PMID:22053207,PMID:20018623,PMID:29940414)。 -
所有车道: 抗-ATF3抗体[EPR22610-19]-ChIP等级(ab254268),稀释度为1/1000 车道1: HepG2(人肝癌上皮细胞),全细胞裂解物 车道2: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞),全细胞裂解物 3号车道: HEK-293T(人胚胎肾上皮细胞),全细胞裂解物 车道4: Daudi(人Burkitts淋巴瘤淋巴母细胞),全细胞裂解物 车道5: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道6: ATF3敲除HAP1全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 暴露时间: 26秒 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 阴性对照:Daudi(PMID:19136462)。 观察到的分子量与文献中描述的一致(PMID:18692824)。 -
所有车道: 抗-ATF3抗体[EPR22610-19]-ChIP等级(ab254268),稀释度为1/1000 车道1: 未经处理的THP-1(人单核细胞白血病单核细胞),全细胞裂解物 车道2: THP-1用80nM TPA处理过夜,然后用1ug/ml脂多糖(LPS)处理8小时,全细胞裂解物 3号车道: 未经处理的RAW264.7(小鼠Abelson小鼠白血病病毒诱导的肿瘤巨噬细胞),全细胞裂解物 车道4: RAW264.7用1ug/ml脂多糖(LPS)处理2小时,全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 暴露时间: 70秒 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 观察到的表达谱与文献中描述的一致(PMID:24973221;24062788)。 -
根据Abcam Dual X-ChIP协议从HeLa细胞制备染色质。 细胞用EGS固定30min,然后用甲醛固定10min。 使用25μg染色质、5μg ab254268(红色)和20μl蛋白A/g sepharose珠进行ChIP。 将5μg兔正常IgG添加到珠子对照(灰色)中。 免疫沉淀DNA通过实时PCR(sybr green方法)定量。 引物和探针位于转录区的第一kb。 -
用1ug/ml脂多糖(LPS)处理0.35 mg RAW264.7(小鼠Abelson小鼠白血病病毒诱导的肿瘤巨噬细胞),用ab254268以1/30的稀释度(0.35 mg裂解液中的2ug)对10ug的全细胞裂解液进行2h处理,从中免疫沉淀ATF3。 使用稀释度为1/1000的ab254268对免疫沉淀物进行蛋白质印迹。 IP检测试剂VeriBlot(HRP)( 阿布131366 )以1/1000稀释度使用。 通道1:RAW264.7(小鼠Abelson小鼠白血病病毒诱导的肿瘤巨噬细胞)用1ug/ml脂多糖(LPS)处理2h全细胞裂解物10ug。 通道2:RAW264.7中的ab254268 IP用1ug/ml脂多糖(LPS)处理2h全细胞裂解物。 泳道3:兔单克隆IgG( 约172730 )用1ug/ml脂多糖(LPS)处理2小时的全细胞裂解液代替RAW264.7中的ab254268。 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:6秒。 -
以1/100(5.7微克/毫升)稀释度用ab254268标记ATF3的4%对甲醛固定的0.1%TritonX-100透化THP-1(人单核细胞白血病单核细胞)细胞的免疫荧光分析,随后 约150077 AlexaFluor公司 ® 488羊抗兔二级抗体,稀释度为1/1000(5.7 ug/ml)(绿色)。 共焦图像显示THP-1细胞经福尔波12-肉豆蔻酸13-醋酸盐(80 nM)处理16 h,然后与脂多糖(1 ug/ml)处理8 h后出现核染色。 约195889年 抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor ® 594)用于在1/200稀释度下对微管蛋白进行复染(红色)。 核染色为DAPI(蓝色)。 仅二级抗体控制:使用PBS代替一级抗体,二级抗体为 约150077 AlexaFluor公司 ® 488羊抗兔次级,稀释度为1/1000(2 ug/ml)。 -
在1/500稀释度(1.14 ug/ml)下用ab254268对石蜡包埋的人类组织标记ATF3进行免疫组织化学分析,然后使用现成的山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)。 观察了人类Reed-Sternberg(HRS)细胞(PMID:16263788)的核染色。 苏木精复染。 热介导抗原检索 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 仅二级抗体对照:使用PBS代替一级抗体,二级抗体是一种现成的山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)。 -
用ab254268对石蜡包埋的人胎盘组织进行免疫组织化学分析,以1/500稀释度(1.14 ug/ml)标记ATF3,然后使用现成的山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)。 人胎盘细胞核染色(PMID/28947613)。 苏木精复染。 热介导抗原检索 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 仅二级抗体对照:使用PBS代替一级抗体,二级抗体是一种现成的山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)。
实验方案
数据表及文件
-
SDS下载 -
数据表下载
合格证书
文献 (13)
程Z 等。 激活转录因子3激活长非编码RNA叉头盒P4-反义RNA 1,通过调节microRNA-423-5p/伏隔核相关1轴,加重结直肠癌进展。 生物工程 13:2114-2129 (2022). 公共医学:35034547 钐AA 等。 CRISPR-Cas9与人类转录组之间的串扰。 国家公社 13:1125 (2022). 公共医学:35236841 吴玉林 等。 丹参提取物和个体合成成分衍生物通过抑制C/EBPα诱导高脂肪诱导肥胖小鼠的活化转录因子3介导的抗肥胖效应和减轻肥胖诱导的代谢紊乱。 单元格 11:不适用(2022年)。 公共医学:35326476 Wei R公司 等。 基于加权基因共表达网络分析筛选和鉴定早期糖尿病肾病发展中的Hub基因。 前内分泌(洛桑) 13:883658 (2022). 公共医学:35721731 郭伟 等。 miR-21-3p纳米粒子通过促进铁下垂使黑色素瘤对抗PD-1免疫治疗敏感。 免疫疗法癌症杂志 10:不适用(2022年)。 公共医学:35738798