主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 ATF3-ChIP级兔单克隆抗体[EPR19488] 适用于:ChIC/CUT&RUN-seq、ChIP、WB、IP、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:老鼠、人类
相关共轭物和制剂
(美国)
-
产品名称 -
日本 兔单克隆抗体 [EPR19488]至ATF3-ChIP等级 -
宿主 兔子 -
特异性 由于某些样本中内源性表达水平较低,可能需要刺激才能检测到目标蛋白。 有关推荐的治疗条件和阳性对照,请参见下图。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠,人类 -
免疫原 重组全长蛋白。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HCT116、HEK-293、HeLa、A431、HepG2、LnCap、Jurkat、THP-1、RAW 264.7细胞裂解物。 ICC/IF:THP-1、RAW 264.7、HAP1细胞。 ChIC/CUT&RUN-seq:HeLa细胞
-
常规说明
性能
-
形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR19488型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
-
替代版本 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
相关产品
美国
|
||
|
||
|
||
|
||
|
|
|
|
|
|
靶标
-
功能 该蛋白结合cAMP反应元件(CRE)(共识:5'-GTGACGT[AC][AG]-3'),该序列存在于许多病毒和细胞启动子中。 用ATF位点抑制启动子的转录。 它可以通过稳定启动子上抑制性辅因子的结合来抑制转录。 异构体2可能通过将抑制性辅因子从启动子隔离开来来激活转录。 -
序列相似性 属于bZIP家族。 ATF子系列。 包含1个bZIP域。 -
细胞定位 核心。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 激活转录因子3抗体 ATF3抗体 ATF3_HUMAN抗体
查看所有内容
图片
-
所有车道: 抗-ATF3抗体[EPR19488]-ChIP等级(ab207434),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: ATF3敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在21 kDa下观察到ab207434。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 western blot显示ab207434与野生型HeLa细胞中的ATF3反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约264908 (敲除细胞裂解物 ab257073号 )已使用。 对野生型HeLa和ATF3敲除HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab207434和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
ab207434染色野生型Hap1细胞中的ATF3(顶部面板)和ATF3敲除Hap1的细胞(底部面板)。 细胞用4%多聚甲醛固定(10分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与稀释度为1/100的ab207434一起孵育 约7291 (Tubulin)以1/1000稀释度在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以伪红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
所有车道: 1/1000稀释的抗-ATF3抗体[EP19488]-ChIP等级(ab207434) 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: ATF3敲除HAP1全细胞裂解物 3号车道: HepG2全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 21千帕 1-3车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在21 kDa下观察到ab207434。 红色负载控制, 约9484 ,在37 kDa下观察到。 ab207434在野生型HAP1细胞中与ATF3特异性反应,因为ATF3敲除细胞中信号丢失。 野生型和ATF3基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab207434和 约9484 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度孵育过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
4%多聚甲醛固定的0.1%Triton X-100透化RAW 264.7(用Abelson鼠白血病病毒转化的小鼠巨噬细胞系)细胞的免疫荧光分析,用1/100稀释的ab207434标记ATF3,然后用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 用LPS(1µg/ml)处理2小时后,共聚焦图像显示RAW 264.7细胞系的核染色增强。 核反染为DAPI(蓝色)。 使用抗阿尔法Tubulin小鼠MAb检测Tubulin( 约7291 )稀释1/1000,然后使用山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )稀释度为1/1000的二级抗体(红色)。 阴性对照如下: -ve对照1:ab207434(1/100稀释),然后是山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )二级抗体的稀释度为1/1000。 -ve对照2:使用抗阿尔法Tubulin小鼠MAb( 约7291 )稀释1/1000,然后是山羊抗狂犬病IgG(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )二级抗体的稀释度为1/1000。 -
所有车道: 抗-ATF3抗体[EPR19488]-ChIP等级(ab207434),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HCT116细胞裂解物 车道2: ATF3敲除HCT116细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在21 kDa下观察到ab207434。 红色-加载控制 约8245 在37 kDa时观察到。 ab207434抗-ATF3抗体[EPR19488]-ChIP等级在野生型HCT116细胞中与ATF3特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab266872型 (敲除细胞裂解物 ab257074号 )已使用。 野生型和ATF3基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab207434和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别以1000分之一和20000分之一的稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗-ATF3抗体[EPR19488]-ChIP等级(ab207434),稀释度为1/1000 车道1: 野生型A549细胞裂解物 车道2: ATF3敲除A549细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在21 kDa下观察到ab207434。 红色-加载控制 约8245 在37 kDa时观察到。 ab207434抗-ATF3抗体[EPR19488]-ChIP等级在野生型A549细胞中与ATF3特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约266955 (敲除细胞裂解物 ab257075号 )已使用。 对野生型和ATF3敲除的样品进行SDS-PAGE。 ab207434和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别以1000分之一和20000分之一的稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
根据Abcam Dual X-ChIP协议*从Hela细胞制备染色质。 细胞用EGS固定30分钟,然后用甲醛固定10分钟。 使用25µg染色质、5µg ab207434(红色)和20µl蛋白A/g sepharose珠进行ChIP。 将5µg兔正常IgG添加到珠子对照(灰色)中。 免疫沉淀DNA通过实时PCR(Sybr green方法)定量。 引物和探针位于转录区的第一kb。 * http://www.abcam.com/resources?keywords=X%20ChIP%20协议 -
所有车道: 抗-ATF3抗体[EPR19488]-ChIP等级(ab207434),1/500稀释 车道1: 293T(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: 人肝组织裂解物 3号车道: Raw264.7(小鼠abelson小鼠白血病病毒诱导的肿瘤巨噬细胞)全细胞裂解物 车道4: 小鼠肝组织裂解物 车道5: MEF(小鼠胚胎成纤维细胞(永生化))全细胞裂解物 车道6: 小鼠心脏组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 暴露时间: 180秒 阻塞/稀释缓冲液和浓度: 5%NFDM/TBST。 ATF3在一些细胞系和组织中的表达水平较低,但在治疗过程中增加(PMID:8622660,PMID:22053207,PMID:20018623,PMID:29940414)。 兔GAPDH单克隆抗体[EPR16891]( 约181602 )用作加载控制。 -
所有车道: 抗-ATF3抗体[EPR19488]-ChIP等级(ab207434),稀释度为1/1000 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: HEK-293(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 3号车道: Jurkat(人类T细胞白血病T淋巴细胞)全细胞裂解物 车道4: A431(人表皮样癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道5: HepG2(人肝癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道6: LnCap(人前列腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21.23千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 180秒 封闭/稀释缓冲液和浓度5%NFDM/TBST 由于ATG的替代使用,ATF3迁移为21和23 kDa双频带(PMID:12225289,PMID:8649793) 在大多数细胞中,ATF3的mRNA和蛋白表达较低或检测不到,但它的表达是由多种细胞应激快速诱导的,包括DNA损伤、创伤和细胞损伤(PMID:191364622065198220592017)。 -
所有车道: 抗-ATF3抗体[EPR19488]-ChIP等级(ab207434),稀释度为1/1000 车道1: 未经处理的THP-1(人单核细胞白血病细胞系)全细胞裂解物 车道2: 用80nM TPA隔夜处理THP-1(人单核细胞白血病细胞系),然后用1µg/ml LPS处理8小时全细胞裂解液 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 暴露时间: 3分钟 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 观察到的表达谱与文献中描述的一致(PMID:24973221)。 -
所有车道: 抗-ATF3抗体[EPR19488]-ChIP等级(ab207434),稀释度为1/1000 车道1: 未经处理的RAW 264.7(用Abelson小鼠白血病病毒转化的小鼠巨噬细胞系)全细胞裂解物 车道2: RAW 264.7(经Abelson小鼠白血病病毒转化的小鼠巨噬细胞系)用1µg/ml LPS处理2小时的全细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 暴露时间: 1分钟 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 观察到的表达谱与文献中描述的一致(PMID:24973221,PMID:19136462)。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100透性THP-1(人单核细胞白血病细胞系)细胞的免疫荧光分析,在1/100稀释度下用ab207434标记ATF3,然后用山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共聚焦图像显示,用TPA(80nM)处理过夜,然后用LPS(1µg/ml)处理8小时后,THP-1细胞系的核染色增强。 核反染为DAPI(蓝色)。 用抗阿尔法Tubulin小鼠单克隆抗体检测Tubulin( 约7291 )稀释1/1000,然后使用山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )稀释度为1/1000的二级抗体(红色)。 阴性对照如下: -ve对照1:ab207434(1/100稀释),然后是山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )二级抗体的稀释度为1/1000。 -ve对照2:抗阿尔法Tubulin小鼠MAb( 约7291 )稀释1/1000,然后用山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )1/1000稀释的第二抗体。
数据表及文件
-
SDS下载 -
数据表下载
合格证书
文 (30)
王毅 等。 通过多组学分析揭示E2F4、TEAD1和AP-1作为复制衰老程序的调节转录因子。 蛋白质细胞 13:742-759 (2022). 公共医学:35023014 程Y 等。 转录因子网络分析确定REST/NRSF是小鼠中枢神经系统再生的内在调节因子。 国家公社 13:4418 (2022). 公共医学:35906210 Kiryu-Seo S公司 等。 轴突起始段的受损分解限制线粒体进入受损轴突。 欧洲工商管理硕士J 41:e110486(2022)。 公共医学:36004759 蒂尔尼JA 等。 在没有损伤或糖尿病病理的情况下,高脂肪饮食会导致机械性超敏反应。 科学代表 12:14840 (2022). 公共医学:36050326 霍兰NL 等。 使用同基因口腔癌小鼠模型研究肿瘤免疫原性对癌痛表型的影响。 Front Pain Res(洛桑) 3:991725 (2022). 公共医学:36172037