主要功能和细节
抗AMF的小鼠单克隆抗体[1B7D7] 适用于:ICC/IF、IHC-P、WB、Flow Cyt 敲除已验证 反应对象:人类 同位素:IgG1
选择批间可重复性更高的重组抗体
研究可靠 —— 各批次间结果一致且可重复 长期批量供应 —— 采用重组技术,可实现快速生产 首次实验即可成功 —— 经过大量验证确认了特异性 符合伦理标准 —— 产品不含动物成分
(美国)
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产品名称 -
日本 小鼠单克隆抗体 [1B7D7]至AMF -
宿主 鼠标 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 -
免疫原 与人AMF相对应的重组片段。 -
阳性对照 WB:HEK293T、HepG2和SMMC-7721细胞裂解物。 流式细胞术:HepG2细胞。 ICC:L-02细胞。 IHC-P:人类大脑皮层组织。
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常规说明 该产品从腹水变为上清液。 高于GR185888-22的批号来自组织培养上清液。 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 交付后,将等分试样储存在-20°C或-80°C下。 避免重复冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 防腐剂:0.05%叠氮化钠 成分:PBS -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质G纯化 -
纯化说明 从TCS中提纯。 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 1B7D7号机组 -
同种型 IgG1 -
研究领域
相关产品
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兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白
应用
靶标
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功能 除了作为糖酵解酶的作用外,哺乳动物GPI还可以作为肿瘤分泌的细胞因子和血管生成因子(AMF),刺激内皮细胞运动。 GPI也是一种用于脊髓和感觉神经元的神经营养因子(Neuroleukin)。 -
通路 碳水化合物降解; 糖酵解; D-甘油醛3-磷酸和D-葡萄糖中的甘油磷酸:步骤2/4。 -
疾病相关 GPI缺陷是葡萄糖磷酸异构酶缺乏症(HA-GPID)导致非外周血溶血性贫血的原因[MIM:613470]。 这是一种没有异常血红蛋白或球细胞增多的贫血。 它是由葡萄糖磷酸异构酶缺乏引起的。 严重的GPI缺乏可能与胎儿水肿、新生儿立即死亡和神经损伤有关。 -
序列相似性 属于GPI家族。 -
翻译后修饰 CK2在Ser-185处的磷酸化已被证明降低酶活性,并可能通过非经典分泌途径促进分泌。 ISGylated公司。 -
细胞定位 细胞质。 秘密的。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 AMF抗体 Aurocrine运动因子抗体 自分泌运动因子抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗-AMF抗体[1B7D7](ab66340) 车道1: 野生型HEK-293T细胞裂解物 车道2: GPI敲除HEK-293T细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 63千帕 观察到的频带大小: 63千帕 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在63 kDa下观察到ab66340。 红色-加载控制 约181602 (兔抗GAPDH抗体[EPR16891])。 Western blot显示ab66340与野生型HEK-293T细胞中的AMF反应,在GPI敲除细胞系中观察到信号丢失 约266834 (GPI敲除细胞裂解物 ab257458号 ). 对野生型HEK-293T和GPI敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE。 TBS-T(0.1%吐温)中3%牛奶中的膜被堵塞 ® )在用ab66340和 约181602 (兔抗GAPDH抗体[EPR16891])在4°C下过夜,分别以1/1000和1/20000稀释。 印迹与山羊抗鼠IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( 约216772 )和山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216777型 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
重叠直方图显示HepG2细胞用ab66340染色(红线)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS吐温透化20分钟。然后将细胞在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育,以阻断非特异性蛋白质-蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(ab66340,1/100稀释)孵育30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor®488山羊抗鼠IgG(H+L)( 约150113 )1/2000稀释,在22°C下保持30分钟。 同型对照抗体(黑线)为小鼠IgG1[ICIGG1]( ab91353型 ,1μg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器采集了超过5000个事件。 该抗体在用80%甲醇(5分钟)固定/用0.1%PBS-Tween渗透20分钟的HepG2细胞中发出阳性信号。 -
用免疫细胞化学/免疫荧光法对L-02细胞中的AMF进行1000稀释ab66340染色。 Alexa Fluor公司 ® 使用488缀合的山羊与小鼠IgG1的多克隆作为第二抗体。 图中绿色染色为ab66340阳性染色,肌动蛋白丝用DY-554拟阴茎肽染成红色,细胞核用DRAQ5荧光DNA染料染成蓝色。 -
使用自动化系统(DAKO Autostainer Plus)对人类大脑皮层中的AMF进行ab66340(1µg/ml)染色。 使用该方案,神经元和神经膜的细胞质染色很强。 插图面板显示阴性对照(无一级抗体)。 在Dako-PT连接中,用Dako 3在pH 9.0的1 AR缓冲液EDTA中重新水化切片,并回收抗原。 将载玻片在甲醇中的3%H2O2中进行过氧化物酶阻断10分钟。 然后用Dako蛋白块将其封闭10分钟(PBS中含有0.25%酪蛋白),然后与一级抗体孵育20分钟,并用Dako-ension flex扩增试剂盒检测30分钟。 用二氨基联苯胺进行5分钟的比色检测。 用血红素对载玻片进行复染,盖玻片置于DePeX下。 请注意,对于手动染色,建议优化一级抗体浓度和培养时间。 可能需要信号放大。 -
所有车道: 1/2000稀释度的抗-AMF抗体[1B7D7](ab66340) 车道1: 由HepG2细胞制备的细胞裂解物。 车道2: 从SMMC-7721细胞制备的细胞裂解物。 每车道100微克的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP结合山羊多克隆到小鼠IgG1 预测的带宽大小: 63千帕
数据表及文件
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数据表下载
文 (17)
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