抗α平滑肌肌动蛋白抗体[1A4]（ab7817）

凝胶类型：拖把

阻隔缓冲液：3%牛奶

负荷控制：α-微管蛋白(阿布52866)，二级山羊抗兔IgG H&L（IRDye®680CW）预吸收（1:10000稀释）

凝胶类型：拖把

阻隔缓冲液：3%牛奶

负荷控制：α-微管蛋白(阿布52866)，二级山羊抗兔IgG H&L（IRDye®680CW）预吸收（1:10000稀释）

这项数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆建立的，该缓冲液不含PBS和叠氮钠(ab240654号)

ab240654号SV40LT-SMC细胞α-平滑肌肌动蛋白染色。细胞用4%多聚甲醛（10min）固定，0.1%PBS-tritonx-100渗透5min，1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1h。然后在4°C下用ab240654号浓度为1µg/ml和ab6046号，兔多克隆β-微管蛋白负荷对照组。然后用ab150117山羊抗小鼠IgG H&L多克隆二级抗体（Alexa Fluor^®488）在1/1000稀释度下预吸收（绿色显示），以及ab150080号山羊抗兔IgG-H&L多克隆次级抗体（Alexa Fluor^®594），稀释1/1000（以伪红色显示）。细胞核DNA用DAPI标记（蓝色）。

用高含量分析仪（Operetta CLS，Perkin Elmer）获得图像，并显示共焦截面的最大强度投影。

人乳腺导管癌α-平滑肌肌动蛋白染色的IHC图像福尔马林固定石蜡包埋组织切片，在徕卡邦德上进行™ 系统采用标准方案F。用柠檬酸钠缓冲液（pH6，表位检索液1）对切片进行热介导抗原回收预处理20分钟。然后在室温下用0.034µg/ml的ab7817培养15分钟，并使用HRP共轭紧密聚合物系统进行检测。用DAB作显色剂。然后用苏木精复染切片并用DPX固定。

对于其他IHC染色系统（自动和非自动），客户应优化可变参数，如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体培养时间。

*从人类研究组织库获得的组织，由NIHR剑桥生物医学研究中心支持

重叠直方图显示用ab7817染色的SV40LT-SMC细胞（红线）。细胞用4%甲醛固定（10分钟），然后用0.1%PBS Triton X-100渗透15分钟。然后将细胞培养在1x PBS/10%正常山羊血清中，以阻断非特异性蛋白质相互作用，然后在22°C下用抗体（ab7817，1.137µg/ml）30分钟。使用的次级抗体是山羊抗鼠IgGH&L（Alexa Fluor®488）(ab150113)在1/2000稀释条件下，在22°C下稀释30分钟

同型对照抗体（黑线）为小鼠IgG2a[18C8BC7AD10](ab170191号)在与原抗体相同的浓度和条件下使用。未标记的样本（蓝线）也被用作对照。

使用50mw蓝光激光器（488nm）和530/30带通滤波器采集了超过5000个事件。

在相同条件下，用80%甲醇固定/0.1%PBS-tritonx-100渗透15min的HeLa细胞中，该抗体呈阳性信号。

Ab7817免疫组织化学免疫荧光法染色小鼠肠组织α-平滑肌肌动蛋白。组织用甲醛固定，室温下用100%Cas封闭30min；抗原回收采用热介导柠檬酸缓冲液，pH6。在4°C下用0.034µg/ml的一级抗体培养16小时^®以488只山羊抗鼠IgG为二级抗体，稀释1/400。抗原回收后，室温下用0.1%苏丹黑在70%乙醇中阻断自身荧光10min，抗原回收后用PBS-T洗涤3X。图像采用共焦显微镜拍摄。

见Abreview

福尔马林固定的石蜡包埋猪肾组织，用0.034µg/ml的ab7817染色，然后用1/300稀释度的驴抗鼠IgG（H+L）Alexa Fluor®647二级抗体对α-平滑肌肌动蛋白（绿色）进行染色。 

抗原回收：热介导-缓冲液/使用的酶：pH值为6.0的柠檬酸盐缓冲液

α-平滑肌肌动蛋白抗体信号呈假绿色。用Hoechst染色，细胞核呈蓝色。背景组织被染成红色

见Abreview

ab7817免疫组化法（IHC-P-多聚甲醛固定石蜡包埋切片）对人肝组织切片α-平滑肌肌动蛋白的染色。组织用多聚甲醛固定，用吐温洗涤液渗透；在ph9.0的Tris-EDTA缓冲液中通过热介导进行抗原回收。将样品与一级抗体（0.034µg/ml封闭缓冲液中）在20°C下培养30分钟。将HRP结合的山羊抗小鼠IgG多克隆（未稀释）用作次要抗体。

见Abreview

小鼠主动脉（A）或皮肤（B）组织的免疫组化分析，用ab7817染色α-平滑肌肌动蛋白。

组织用10%中性缓冲福尔马林固定，1%血清封闭，21℃45分钟；抗原回收采用0.0001%胰蛋白酶CaCl酶法。将样本与一级抗体（0.034µg/ml，0.3%Triton X-100，PBS）在21℃下培养1小时。以生物素结合的马抗鼠多克隆IgG（1/50）作为次级抗体。

见Abreview

ab7817免疫细胞化学/免疫荧光法（ICC/IF）对小鼠原代结肠肌成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白（绿色）的染色。用丙酮固定细胞，在25℃下用5%牛血清白蛋白封闭30小时。样品在25℃下与一级抗体（PBS中的1/100+5%BSA）培养2小时驴抗鼠IgG H&L（DyLight®488）（ab96875）（1/1000）作为次级抗体。与阿布92547，兔抗波形蛋白（红色）。

见Abreview

Davis-FM等人研究了成人乳腺干细胞的分化潜能。Ab7817染色R26细胞的平滑肌肌动蛋白^{[CA]30EYFP公司}小鼠0.034µg/ml

ab7817免疫细胞化学/免疫荧光法（ICC/IF）染色人IMR-90细胞α-平滑肌肌动蛋白。用多聚甲醛固定细胞，用0.1%TritonX-100渗透，100%Cad块在室温下封闭30分钟。在4°C条件下，用3.41µg/ml的初级抗体在抗体稀释液缓冲液中培养16小时^®以488株羊抗小鼠IgG抗体（稀释度为1/400）作为次级抗体。

见Abreview

ab7817免疫细胞化学/免疫荧光法（ICC/IF）染色小鼠心肌细胞α-平滑肌肌动蛋白。细胞用多聚甲醛固定，TritonX-100渗透，5%BSA封闭30分钟。将样本与一级抗体6.82µg/ml在封闭缓冲液中孵育2小时。Alexa Fluor公司^®以488株驴单克隆抗体与小鼠IgG结合，稀释1/200，作为二级抗体。

见Abreview