主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 抗AIF-线粒体标记的兔单克隆抗体[E20] 适用于:流式细胞周期(内部)、ICC/IF、IHC-Fr、WB、IHC-P、IP 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [E20]至AIF-线粒体标记 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
完 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HEK-293T和K562细胞裂解物。 IHC-P:人宫颈癌组织。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
中国 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:49%PBS、50%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
克隆 (伊拉克) -
克隆编号 E20系列 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同种型对照 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
重组蛋白
应用
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靶标
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功能 可能的氧化还原酶,在控制细胞生命和死亡中具有双重作用; 在凋亡过程中,它从线粒体转移到细胞核,在caspase非依赖性途径中作为促凋亡因子发挥作用,而在正常线粒体中,它通过其氧化还原酶活性发挥抗凋亡因子的作用。 细胞核中的可溶性形式(AIFsol)诱导“部分死亡”,即染色体DNA的半胱天冬酶非依赖性断裂。 与EIF3G相互作用,从而抑制EIF3机制和蛋白质合成,并激活casapse-7以放大凋亡。 在过氧化氢暴露细胞中的半胱天冬酶非依赖性、固缩性细胞死亡中起关键作用。 以序列相关的方式与DNA结合。 -
疾病相关 AIFM1缺陷是6型复合氧化磷酸化缺陷症(COXPD6)[MIM:300816]的原因。 这是一种线粒体疾病,导致神经退行性疾病,其特征是精神运动迟缓、张力减退、屈曲乏力、肌肉无力和消瘦。 -
序列相似性 属于FAD依赖性氧化还原酶家族。 -
翻译后修饰 在正常条件下,线粒体加工肽酶(MPP)在线粒体膜间间隙(IMS)易位期间或易位后,首先通过蛋白质水解去除54位N-末端片段,形成膜内锚定成熟型(AIFmit)。 在凋亡过程中,它在氨基酸位置101处进一步进行蛋白质水解处理,导致成熟形式的产生,该成熟形式仅限于线粒体IMS中的可溶性形式(AIFsol)。 AIFsol被释放到细胞质中以响应特定的死亡信号,并转移到细胞核,在那里以半胱天冬酶非依赖性的方式诱导核凋亡。 -
细胞定位 线粒体膜间间隙。 线粒体内膜。 细胞质。 核心。 细胞质>核周区。 在转位到线粒体膜间隙(IMS)期间或刚转位到IMS之后,蛋白质裂解导致形成膜内锚定成熟型(AIFmit)。 在细胞凋亡过程中,进一步的蛋白水解过程会导致成熟形式,以可溶性形式(AIFsol)局限于线粒体IMS。 AIFsol被释放到细胞质以响应特定的死亡信号,并转移到细胞核,在那里诱导核凋亡。 用EIF3G在细胞核和核周区进行配体化。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 51060 人类 Entrez基因: 9131 人类 Entrez基因: 26926 鼠标 Entrez基因: 83533 老鼠 奥密姆: 300169 人类 瑞士保护银行: O95831号 人类 瑞士保护银行: Q9Z0X1型 鼠标 瑞士保护银行: 第9季度第53季度 老鼠
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别名 AIFM1抗体 AIFM1_人类抗体 凋亡诱导因子1,线粒体抗体
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图片
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所有车道: 抗AIF抗体[E20]-线粒体标记物(ab32516),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HEK-293T细胞裂解物 车道2: AIFM1敲除HEK-293T细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 67千帕 观察到的频带大小: 67千帕 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在67 kDa下观察到ab32516。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 western blot显示ab32516与野生型HEK-293T细胞中的AIF反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约266347 (敲除细胞裂解物 约256834 )被使用。 对野生型HEK-293T和AIFM1敲除型HEK-29.3T细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab32516和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附( 邮编:216773 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
Ab32516,1/500稀释,免疫组织化学染色石蜡包埋人宫颈癌组织中的AIF。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
抗-AIF抗体[E20]-线粒体标记物(ab32516),1/1000稀释+K562细胞裂解液 预测的带宽大小: 67千帕 观察到的频带大小: 67千帕 -
使用0.5mg K562全细胞提取物、5µg兔抗AIF单克隆抗体和50µl蛋白g磁珠(+)免疫沉淀AIF。 对照组(-)未添加抗体。 将抗体与G蛋白珠在搅拌下孵育10分钟,将在RIPA缓冲液中稀释的K562全细胞提取物裂解物加入每个样品中,并在搅拌下再孵育10分钟。 通过添加40µl SDS负载缓冲液洗脱蛋白质,并在70℃下培养10分钟 o个 C类; 在SDS-PAGE凝胶上分离10µl每个样品,转移到硝化纤维素膜上,用5%BSA封闭,并用ab32516进行探测。 次要:鼠单克隆[SB62a]兔IgG轻链二级抗体( ab99697年 ). 频带:67kDa:AIF -
ab32516染色HeLa细胞的ICC/IF图像。 将细胞固定在4%PFA中(10分钟),然后在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween中孵育1小时,以使细胞渗透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。 然后将细胞与抗体(ab32516,1µg/ml)在+4°C下孵育过夜。 二级抗体(绿色)为Alexa Fluor®488山羊抗兔IgG(H+L),以1/1000稀释度使用1h。 Alexa Fluor®594 WGA用于以1/200的稀释度标记质膜(红色)1h。 采用DAPI对浓度为1.43µM的细胞核(蓝色)进行染色。 -
重叠直方图显示用ab32516染色的K562细胞(红线)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻止非特异性蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(ab32516,1/50稀释)培养30分钟。 使用的二级抗体是DyLight®488山羊抗兔IgG(H+L)( 约96899 )在22°C下,1/500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔单克隆IgG(1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 采集了超过5000个事件。 该抗体在相同条件下使用0.1%PBS-Tween渗透甲醇(5分钟)固定的K562细胞中发出阳性信号。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (64)
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