概述
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产品名称 -
产品概述 CRISPR/Cas9实现的敲除细胞裂解物。 -
亲代细胞系 希拉牌手表 -
有机体 人类 -
突变描述 通过使用CRISPR/Cas9,外显子1中4 bp缺失实现敲除。 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 Sanger测序,Western Blot(WB) -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
说明 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute和ERS Genomics limited的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关有限使用许可证和相关专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
经测试应用
性能
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存放说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab261990-人KDM1A敲除HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 ab255929-人类野生型HeLa细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 腺癌 -
性别 女性 -
STR分析 釉原蛋白X D5S818:11、12 D13S317:12、13.3 D7S820:8、12 D16S539:9、10 vWA:16、18 TH01:7型 TPOX:8、12 CSF1PO:9、10
靶标
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功能 组蛋白去甲基酶,将组蛋白H3的“Lys-4”(H3K4me)和“Lys-9”(H3G9me)去甲基化,从而根据上下文充当辅活化剂或辅抑制剂。 通过FAD氧化底物,生成相应的亚胺,随后被水解。 通过介导表观遗传转录激活的特异标记H3K4me的去甲基化,发挥共抑制因子的作用。 去甲基化单(H3K4me1)和二甲基化(H3K4me2)H3K4me。 可能在抑制神经元基因中起作用。 仅此一种,它不能使核小体上的H3K4me去甲基化,并且需要RCOR1/CoREST的存在才能实现这种活性。 还作为雄激素受体(ANDR)依赖性转录的辅激活子,通过招募到ANDR靶基因并介导表观遗传转录抑制的特异标记H3K9me的去甲基化。 PRKCB存在于含ANDR的复合物中,该复合物介导组蛋白H3(H3T6ph)的“Thr-6”磷酸化,这是一种阻止H3K4me去甲基化的特异标记,可阻止KDM1A的H3K4me去甲基酶活性。 去甲基化p53/TP53的二甲基化“Lys-370”,阻止p53/TP33与TP53BP1的相互作用,并抑制p53/TP43介导的转录激活。 脱甲基并稳定DNA甲基化酶DNMT1。 胚胎发生期间原肠胚形成所必需的。 -
组织特异性 普遍表达。 -
序列相似性 属于黄素单胺氧化酶家族。 包含1个SWIRM域。 -
结构域 SWIRM域可以作为组蛋白尾部的锚定位点。 -
细胞定位 核心。 -
UniProt提供的信息 -
别名 胺氧化酶(含黄素)结构域2 胺氧化酶,含黄素,2 AOF2型
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应用
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图片
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车道1: 野生型HeLa细胞裂解物(20µg) 车道2: KDM1A敲除HeLa细胞裂解物(20µg) 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约69535 在110 kDa下观察到。 红色-加载控制 约181602 在37 kDa时观察到。 约69535 western blot显示,抗KDM1/LSD1抗体[1B2F2]与野生型HeLa细胞中的KDM1/LSD 1特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约265790 使用敲除细胞裂解物ab256965。 对野生型和KDM1/LSD1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 约69535 和抗-GAPDH抗体[EPR16891]-负荷控制( 约181602 )在4点孵育过夜 ° C分别为1倍和20000倍。 用山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( 约216772 )和山羊抗狂犬病IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( ab216777号 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型HeLa细胞裂解物(20µg) 车道2: KDM1A敲除HeLa细胞裂解物(20µg) 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 公元129195年 在110 kDa下观察到。 红色-加载控制 约8245 在37 kDa时观察到。 公元129195年 western blot显示,抗KDM1/LSD1抗体[EPR6825]-核标记物与野生型HeLa细胞中的KDM1/LSD 1特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约265790 使用敲除细胞裂解物ab256965。 对野生型和KDM1/LSD1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 公元129195年 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4点孵育过夜 ° C分别为1000稀释度和20000稀释度的1。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
纯合子:外显子1中4 bp缺失
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载