主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 组蛋白H3(三甲基K4)-ChIP级兔单克隆抗体[EPR20551-225] 适用于:ChIP-sequencing、Flow Cyt(Intra)、ChIP、WB、ICC/IF、Dot-blot、PepArr、IP、ChIC/CUT和RUN-seq 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR20551-225]至组蛋白H3(三甲基K4)-ChIP级 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
不合格品 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HeLa、NIH/3T3和C6全细胞裂解物。 ICC/IF:HeLa和NIH/3T3细胞。 流式细胞仪(内部):HeLa细胞。 IP:NIH/3T3全细胞裂解物。 ChIP:由HeLa细胞制备的染色质。 ChIP-seq:由HeLa细胞制备的染色质。 斑点杂交:组蛋白H3K4Me3肽。 ChIC/CUT&RUN-Seq:HeLa细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分试样。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:0.05%BSA、40%甘油(甘油、甘油)、PBS -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR20551-225 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
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应用
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靶标
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功能 核小体的核心成分。 核小体将DNA包裹并压缩成染色质,限制了需要DNA作为模板的细胞机制对DNA的访问。 因此,组蛋白在转录调控、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中发挥着核心作用。 DNA可及性是通过组蛋白的一系列复杂的翻译后修饰(也称为组蛋白密码)和核小体重塑来调节的。 -
序列相似性 属于组蛋白H3家族。 -
发展阶段 在S期表达,然后随着分化过程中细胞分裂减慢,表达强烈下降。 -
翻译后修饰 乙酰化通常与基因激活有关。 Lys-10(H3K9ac)上的乙酰化破坏Arg-9(H3R8me2s)的甲基化。 Lys-19(H3K18ac)和Lys-24(H3K24ac)上的乙酰化有利于Arg-18(H3R17me)上的甲基化。 PADI4在Arg-9(H3R8ci)和/或Arg-18(H3R17ci)处的瓜氨酸化会损害甲基化并抑制转录。 CARM1在Arg-18(H3R17me2a)处的不对称二甲基化与基因激活有关。 PRMT5在Arg-9(H3R8me2s)处的对称二甲基化与基因抑制有关。 PRMT6在Arg-3(H3R2me2a)处的不对称二甲基化与基因抑制有关,并且与H3 Lys-5甲基化(H3K4me2和H3K4me3)相互排斥。 H3R2me2a存在于基因的3'处,无论其转录状态如何,并且在非活性启动子上富集,而在活性启动子上不存在。 Lys-5(H3K4me)、Lys-37(H3K36me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化与基因激活有关。 Lys-5(H3K4me)的甲基化促进H3和H4的后续乙酰化。 Lys-80处的甲基化(H3K79me)与DNA双链断裂(DSB)反应有关,并且是TP53BP1的特异性靶标。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化与基因抑制有关。 Lys-10(H3K9me)的甲基化是HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)的一个特定靶点,可防止随后Ser-11(H3S10ph)的磷酸化以及H3和H4的乙酰化。 Lys-5(H3K4me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化需要H2B在“Lys-120”的初步单泛素化。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化富集在非活性X染色体染色质中。 前期GSG2/haspin在Thr-4(H3T3ph)下磷酸化,后期去磷酸化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化对有丝分裂和减数分裂期间的染色体凝聚和细胞周期进展至关重要。 此外,RPS6KA4和RPS6KA5在Ser-11(H3S10ph)处的磷酸化在间期很重要,因为它能够在外界刺激后转录基因,如丝裂原、应激、生长因子或紫外线照射,并导致基因的激活,如c-fos和c-jun, 与基因激活相关,防止Lys-10(H3K9me)甲基化,但促进H3和H4的乙酰化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化介导HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)与异染色质的分离。 Ser-11的磷酸化(H3S10ph)也是肿瘤细胞转化的重要调节机制。 在有丝分裂期间或紫外线B照射下,MLTK亚型1、RPS6KA5或AURKB在Ser-29(H3S28ph)下磷酸化。 PRKCBB在Thr-7(H3T6ph)处的磷酸化是表观遗传转录激活的特异标记,可防止LSD1/KDM1A对Lys-5(H3K4me)的去甲基化。 在着丝粒处,DAPK3和PKN1在Thr-12(H3T11ph)从前期到后期的早期特异性磷酸化。 PKN1在Thr-12(H3T11ph)处的磷酸化是促进KDM4C/JMJD2C对Lys-10(H3K9me)去甲基化的表观遗传转录激活的特异标记。 JAK2在Tyr-42(H3Y41ph)处的磷酸化促进CBX5(HP1α)从染色质中排除。 RAG1在淋巴细胞中单泛素化,V(D)J重组需要单泛素(根据相似性)。 CUL4-DDB-RBX1复合物对紫外线照射的反应中泛素化。 这可能会削弱组蛋白和DNA之间的相互作用,并促进DNA可接近性以修复蛋白质。 -
细胞定位 核心。 染色体。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 8350 人类 Entrez基因: 8351 人类 Entrez基因: 8352 人类 Entrez基因: 8353 人类 Entrez基因: 8354 人类 Entrez基因: 8355 人类 Entrez基因: 8356 人类 Entrez基因: 8357 人类
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别名 H3组蛋白家族成员E假基因抗体 H3组蛋白家族成员A抗体 H3/A抗体
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图片
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使用最终浓度为700 ng/mL的pAG-MNA酶、2.5 x 10^5 HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞系)细胞和2µg ab213224[EPR20551-225]进行ChIC/CUT&RUN。 所得DNA在Illumina NovaSeq 6000上测序,测序深度为1000万读。 阴性IgG对照 约172730 图中还显示了。 ChIP数据是在HeLa细胞制备的染色质上进行的。 细胞用1%甲醛固定10分钟。 使用10^7 HeLa细胞和4µg ab213224进行ChIP。 ChIP DNA在Illumina NovaSeq 6000上进行测序,深度为3000万次。 日内瓦大学拥有与ChIC(染色质免疫切割)方法相关的专利。 可以下载映射读取的其他屏幕截图 在这里 . 日内瓦大学拥有与ChIC(染色质免疫切割)方法相关的专利。 -
根据Abcam X-ChIP协议,从Hela(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞制备染色质。 用甲醛固定细胞10分钟。用25μg染色质、2μg ab213224(红色)和20μl抗兔IgG琼脂糖珠进行ChIP。 将2μg兔正常IgG添加到珠子对照品中(灰色)。 用实时PCR(Taqman方法)定量免疫沉淀DNA。 引物和探针位于转录区域的第一个kb处。 -
从HeLa细胞制备染色质。 细胞用1%甲醛固定10分钟。 ChIP采用10 7 细胞和4µg抗-Histone H3(三甲基K4)抗体[EPR20551-225]-ChIP级。 ChIP DNA在Illumina NovaSeq 6000上测序,深度为3000万读。 可以下载映射读取的其他屏幕截图 在这里 . -
从HeLa细胞制备染色质。 细胞用1%甲醛固定10分钟。 使用30µg染色质和4µg抗-Histone H3(三甲基K4)抗体[EPR20551-225]-ChIP等级进行ChIP。 ChIP DNA在Illumina NextSeq 500上测序,深度为3000万读。 ChIP-Seq验证由加利福尼亚州卡尔斯巴德的Active Motif执行。 可以下载映射读取的其他屏幕截图 在这里 . -
使用200000 Oli-neu(少突胶质细胞祖细胞)细胞进行CUT和Tag-seq。 用0.05%的洋地黄素和0.01%的NP-40使细胞渗透3分钟。 使用1:100稀释的抗-Histone H3(三甲基K4)抗体[EPR20551-225]-ChIP等级,以及豚鼠抗兔二级抗体。 使用Illumina NovaSeq S Prime对DNA进行分段,深度为2200万读。 阳性对照Sox10 chr15:79091798-79329947(使用小鼠mm10基因组)。 这张图片由Gonçalo Castelo-Branco Group的Marek Bartosovic博士提供 , 卡罗林斯卡学院 . 日内瓦大学拥有与ChIC(染色质免疫切割)方法相关的专利。 -
在肽阵列中测试ab213224对501种不同修饰和未修饰组蛋白肽的作用; 每个肽以六种浓度打印在阵列上(每种浓度一式三份)。 圆圈区域表示抗体和肽之间的亲和力:所有含抗原肽显示为红色圆圈,所有其他肽显示为蓝色圆圈。 当根据相应的肽浓度绘制抗体结合值时,亲和力计算为曲线下面积。 每个圆圈区域归一化为亲和力最强的肽。 可以下载完整的数据集,包括所有肽的完整列表和图中每个肽的位置信息 在这里 . -
免疫荧光分析 4%多聚甲醛 -固定的0.1%Triton X-100透化NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)细胞,以1/500稀释的ab213224标记组蛋白H3(三甲基K4),然后是山羊抗兔IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 NIH/3T3细胞系细胞核染色阳性。 核反染为DAPI(蓝色)。 用抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor)检测管蛋白 ® 594) ( 约195889年 )(红色)稀释1/200。 仅二级抗体对照:使用PBS代替一级抗体,二级抗体为山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )二级抗体的稀释度为1/1000。 -
免疫荧光分析 4%多聚甲醛 -固定的0.1%Triton X-100透性HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞,用ab213224标记组蛋白H3(三甲基K4),稀释1/500,然后用山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )1/1000稀释的第二抗体(绿色)。 HeLa细胞系细胞核染色阳性。 核反染为DAPI(蓝色)。 用抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor)检测管蛋白 ® 594) ( 约195889年 )(红色)稀释1/200。 仅二级抗体对照:使用PBS代替一级抗体,二级抗体为山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )二级抗体的稀释度为1/1000。 -
所有车道: 抗-Histone H3(三甲基K4)抗体[EPR20551-225]-ChIP等级(ab213224),1/5000稀释 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)全细胞裂解物 3号车道: C6(大鼠胶质瘤细胞系)全细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 使用ECL技术开发。 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 15千Da 暴露时间: 1秒 阻塞/稀释缓冲液: 5%BSA/TBST。 -
所有车道: 抗-Histone H3(三甲基K4)抗体[EPR20551-225]-ChIP等级(ab213224),1/5000稀释 车道1: 用5%NFDM/TBST裂解HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞 车道2: 用2%BSA/TBST裂解HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞 每车道15µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 15千Da 暴露时间: 40秒 我们建议使用2%BSA作为阻断和抗体稀释缓冲液。 -
以1/1000稀释度用ab213224标记的组蛋白H3(三甲基K4)的斑点印迹分析。 车道1: 组蛋白H3K4Me3肽。 车道2: 组蛋白H3未修饰肽。 3号车道: 组蛋白H3K(18+K36)Me3肽。 车道4: 组蛋白H3K18Me3肽。 车道5: 组蛋白H3K4Me2肽。 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )以1/100000稀释液作为二级抗体。 暴露时间: 3分钟。 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。
实验方案
数据表及文件
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合格证书
文献 (19)
李伟 等。 Chromobox 4(CBX4)通过激活胃癌中的CDC20促进肿瘤进展和干细胞生成。 胃肠病学杂志 13:1058-1072 (2022). 公共医学:35837165 藤本M 等。 HSF1磷酸化通过TRRAP-TIP60复合物建立活性染色质状态并促进肿瘤发生。 国家公社 13:4355 (2022). 公共医学:35906200 王R 等。 GATA3发挥独特的转录功能调节A549和H1299细胞的抗辐射性。 氧化介质细胞Longev 2022:9174111 (2022). 公共医学:35993027 李浩 等。 受mTORC1信号调节的STAT3/miR-130b-3p/MBNL1反馈回路促进血管生成和肿瘤生长。 实验临床癌症研究杂志 41:297 (2022). 公共医学:36217202 吉尔L 等。 阿尔茨海默病患者牙本质颗粒细胞的病理核标志:神经发生的双相调节。 国际分子科学杂志 23:不适用(2022年)。 公共医学:36361662