主要功能和细节
抗ATP5A-线粒体标记的小鼠单克隆抗体[15H4C4] 适用于:WB、IHC-P、ICC/IF、Flow Cyt 反应对象:小鼠、大鼠、奶牛、人类、果蝇 同种型:IgG2b
相关偶联物和制剂
(美国)
-
产品名称 -
描述 小鼠单克隆抗体 [15H4C4]至ATP5A-线粒体标记 -
宿主 鼠标 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 小鼠、大鼠、奶牛、人类、黑腹果蝇 预测: 清管器 -
免疫原 组织、细胞或病毒。 此信息被视为商业敏感信息。 -
阳性对照 WB:从人、牛、大鼠和小鼠心脏分离线粒体。 人肝组织裂解物。 HepG2全细胞裂解物。 ICC/IF:HeLa、MCF7和MDA-MB-231细胞。 IHC-P:人体心脏组织。 流式细胞术:HepG2细胞。
-
常规说明 该抗体克隆由Abcam制造。 如果您需要为您的实验定制缓冲配方或共轭物,请联系 orders@abcam.com . 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
-
形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 储存于+4°C。 -
存储溶液 pH值:7.5 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:HEPES缓冲盐水 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 IgG分数 -
纯化说明 通过SDS-PAGE判断接近同质性。 用无血清培养基中生长的杂交瘤体外产生抗体,然后通过生化分离纯化。 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 15H4C4型 -
同种型 IgG2b -
轻链类型 卡帕 -
研究领域
产品
-
替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
|
||
|
||
|
||
|
|
|
|
靶标
-
功能 线粒体膜ATP合酶(F(1)F(0)ATP合酶或复合物V)在膜上存在质子梯度的情况下从ADP产生ATP,质子梯度由呼吸链的电子传递复合物产生。 F型ATP酶由两个结构域组成,F(1)包含膜外催化核心,F(0)包含膜质子通道,由中心柄和外围柄连接在一起。 在催化过程中,F(1)催化域中的ATP合成通过中心柄亚基的旋转机制耦合到质子移位。 亚单位α和β在F(1)中形成催化核心。 中心柄相对于周围α(3)β(3)亚基的旋转导致β亚基上三个单独催化位点的ATP水解。 亚单位α不具有催化高亲和力ATP结合位点。 -
组织特异性 胎儿肺、心脏、肝脏、肠道和肾脏。 在胎儿大脑、视网膜和脊髓中表达较高水平。 -
序列相似性 属于ATP酶α/β链家族。 -
翻译后修饰 N端被阻塞。 -
细胞定位 线粒体内膜。 外周膜蛋白。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 282578 奶牛 Entrez基因: 37617 黑腹果蝇 Entrez基因: 498 人类 Entrez基因: 11946 鼠标 Entrez基因: 100157880 清管器 Entrez基因: 65262 老鼠 Omim公司: 164360 人类 瑞士保护银行: 第19483页 奶牛
查看所有内容 -
别名 ATP合成酶α链抗体 ATP合成酶α链,线粒体抗体 ATP合酶亚单位α抗体
查看所有内容
图片
-
测试 英国广播公司8 毫秒 突变体在减数分裂后伸长的精子细胞中显示缺陷。 (A-B)来自WT(A)和 英国广播公司8 毫秒 (B) 睾丸都有细长的囊肿,但通过相差显微镜观察,突变体(箭头)中有大的球形囊泡。 比例尺:100μm。 用ATP5α抗体ab14748染色的细长精子细胞(C,D)线粒体 英国广播公司8 毫秒 (D) 突变体。 箭头表示囊肿中大囊泡的ATP5α阳性染色。 比例尺:50μm。 (E,F)JC-1染色阳性的大囊泡(箭头)在WT(E)中不存在,但在 英国广播公司8 毫秒 细长囊肿(F)。 比例尺:25μm。 -
Western blots检测脑干(A)、小脑(B)和“休息”脑(R)HNE损伤的线粒体蛋白。 样本名称表示年龄组(P25-P35为y,P45-P55为o)、基因型(对照组为KO、Ctrl)和用于区分独立样本的数字。 面板D 是A组的线粒体标记物ATP酶(ATP5a)的印迹,使用ab14748进行复制,以证明延长样品储存时间通常不会降解样品蛋白质。 MW车道上的黑线是胶片上的魔术标记,用于指示印迹上预处理分子量标准的位置。 有关完整图像,请参阅纸张。 -
所有车道: 1µg/ml时抗-ATP5A抗体[15H4C4]-线粒体标记物(ab14748) 车道1: 在10µg浓度下从人心脏分离线粒体 车道2: 4µg牛心脏分离线粒体 车道3: 10µg大鼠心脏分离线粒体 车道4: 10µg时从小鼠心脏分离的线粒体 车道5: HepG2(人肝细胞癌细胞系)在20µg时裂解 -
所有车道: 1µg/ml时抗-ATP5A抗体[15H4C4]-线粒体标记物(ab14748) 车道1: 人肝组织裂解物 车道2: HepG2(人肝癌细胞系)全细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊多克隆至小鼠IgG-H&L-Pre-Adsorbed(HRP),稀释度为1/3000 观察到的频带大小: 55千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 其他波段位于: 36kDa。 我们不确定这些额外波段的身份。 -
ab14748染色的HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞的ICC/IF图像。 将细胞固定在100%甲醇中(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后在+4°C下用1µg/ml的ab14748培养细胞过夜(以红色显示) 约6160 (针对Tubulin的大鼠单克隆抗体),浓度为1µg/ml(以绿色显示)。 然后在室温下培养1小时 ab150119号 、山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 647)预吸附,0.5µg/ml(以红色显示)和 ab150165型 ,山羊抗-Rat IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)预吸附,浓度为0.5µg/ml(显示为绿色)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 在4%甲醛固定的HeLa电池中,在相同的测试条件下(10分钟),该产品也会发出阳性信号。 -
ab14748用ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)染色MDA-MB-231细胞中的ATP5A。 细胞用甲醛固定,用1%Triton X-100渗透,用10%BSA在21°C下封闭1小时。 样品与一级抗体(1/100在BSA+0.02%吐温20中)在21°C下孵育1小时。 DyLight公司 ® 采用550结合羊抗鼠IgG多克隆(1/500)作为二级抗体。 -
ab14748染色的MCF7(人乳腺癌细胞系)细胞的ICC/IF图像。 将细胞固定在4%甲醛中(10分钟),然后在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween中孵育1小时,以使细胞渗透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。 然后将细胞与抗体(ab14748,10µg/ml)在+4°C下孵育过夜。 二级抗体(绿色)为Alexa Fluor ® 488羊抗鼠IgG(H+L),以1/1000稀释液使用1小时。 Alexa Fluor公司 ® 594 WGA用于标记1/200稀释1小时的质膜(红色)。 采用DAPI对浓度为1.43µM的细胞核(蓝色)进行染色。 -
使用自动化系统(DAKO Autostainer Plus)对人类心脏(左心室)中的ATP5A进行ab14748(1µg/ml)染色。 使用此方案可对心肌细胞进行线粒体染色。 切片被再水化,并在Dako PT连接中用Dako 3合1 AR缓冲液柠檬酸盐pH 6.1回收抗原。 载玻片在3%H内被过氧化物酶阻断 2 哦 2 在甲醇中放置10分钟。 然后用Dako蛋白块将其封闭10分钟(PBS中含有0.25%酪蛋白),然后与一级抗体孵育20分钟,并用Dako-ension flex扩增试剂盒检测30分钟。 用二氨基联苯胺进行5分钟的比色检测。 用苏木精对载玻片进行复染,并将其盖在DePeX下。 请注意,对于手动染色,建议优化一级抗体浓度和培养时间。 可能需要信号放大。 -
重叠直方图显示用ab14748(红线)染色的HepG2(人肝癌细胞系)细胞。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。 然后将细胞在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育,以阻断抗体(ab14748,1µg/1x10 6 电池)在22ºC下保持30分钟。 使用的二级抗体是DyLight ® 488山羊抗鼠IgG(H+L)( 约96879 )在22ºC下,1/500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为小鼠IgG2b[PLPV219]( 约91366 ,2微克/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 采集了超过5000个事件。 该抗体在用80%甲醇(5分钟)固定/在相同条件下用0.1%PBS-Tween渗透的HepG2细胞中发出阳性信号。
实验方案
数据表及文件
-
SDS下载 -
数据表下载
文献 (482)
普约尔C 等人。 MPC2变异体破坏线粒体丙酮酸代谢并导致早发性线粒体病。 大脑 146:858-864 (2023). 公共医学:36417180 席尔瓦·皮涅罗 等人。 用于精确消融小鼠线粒体基因组中所有蛋白编码基因的基础编辑库。 国家生物工程 7:692-703 (2023). 公共医学:36470976 巴瓦尼M 等人。 Triap1上调可促进逃避有丝分裂滑移诱导的G1期阻滞。 单元格代表 42:112215 (2023). 工作分解结构 . 公共医学:36917609 王毅 等人。 一种新的TP53基因突变通过吞噬作用维持非小细胞肺癌。 细胞 11:不适用(2022年)。 公共医学:36429016 拉斯布利兹C 等人。 Sigma-1受体激动剂PRE-084通过NRF2信号传递对TAR DNA-结合蛋白-43毒性提供保护。 氧化还原生物 58:102542(2022)。 公共医学:36442393