将价层电子和氢原子的信息纳入晶体结构精细化对理解电子转移反应非常重要。高电位铁硫蛋白（HiPIP）具有一个Fe4S4簇，表现出+2/+3氧化还原态，作为细胞色素bc1络合物到光合紫色细菌反应中心络合物的电子载体。最近，我们在SPring-8的BL41XU光束线中使用高能X射线（31 keV）成功收集到了0.48º分辨率的HiPIP数据。我们使用MoPro程序（2）进行多极细化，以在HiPIP的结构细化中考虑价层电子。多极参数的精细化应用于单构象残基原子、含两个氢原子的水分子和Fe4S4团簇。经过多极细化后，变形图清楚地显示了价层电子的分布，例如羰基氧原子的孤对电子、芳香环中的键电子和Fe4S4团簇中Fe原子的d轨道电子。变形图还显示了Fe4S4-（Cys-Sγ）4的S原子与蛋白质环境之间的静电相互作用。此外，我们在日本质子加速器研究中心（J-PARC）的iBIX光束线上进行了初步中子衍射实验，并使用尺寸为2.3 mm3的HiPIP晶体观察到高达1.17º分辨率的衍射点。在多极精细化中，氢原子的位置被固定在由小分子中子晶体结构导出的标准键距离上，氢原子原子的原子位移参数被限制在其根原子的1.2或1.5倍。因此，HiPIP的高分辨率中子结构将改善多极精细化的结果。
