C18

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C18 PhyTip®Columns

C18移液管芯片型PhyTip®色谱柱（纯化肽蛋白用）
biotage_phynexus
biotage_phynexus C18

利用质谱进行蛋白质鉴定是一种流行的工具，因此被广泛用于学院、制药企业和起步开发生物医药品等。

如果手工操作这个应用程序，大概需要1天半的时间（胰蛋白酶消化处理→肽的精制和脱盐）。此工作流的自动化目前是有限的，而且随着示例数量的增加，需要花费的时间和精力越多。

 

为了尝试蛋白质的鉴定，目的产物变性也没关系的时候（质谱用的精制步骤等），反相色谱容易有效的分离能期待。

用于反相色谱法的树脂，在柱基材上高密度地共价结合有疏水性官能团。由于肽和蛋白质与该疏水性表面结合，因此疏水性越高，在色谱柱中保持得越好，溶出时间也需要时间。填料的吸附率为C18>C8>C4，因此必须事先研究肽和蛋白质的疏水性，选择色谱柱。分子量会影响肽和蛋白质在色谱柱上的吸附。因此，肽和20kDa以下的蛋白质选择C18，分子量50kDa以上的蛋白质选择C4的话能有效地吸附感兴趣的产物。

 

多孔性的树脂，由于包含官能团的表面积大，结合容量变高。根据树脂的细孔（pore）的尺寸，能精制的分子的大小变化。因此，在尝试纯化大分子时，如果不是具有该分子能够侵入的细孔尺寸的树脂，结合的效率就会降低。尝试纯化小分子时，选择该分子能进入的小细孔尺寸，就可以排除大的。

 

例如，具有90个孔的树脂，可以排除蛋白质和大尺寸的肽，所以最适合从小到中尺寸的肽的纯化。因此，作为肽映射的前处理，在胰蛋白酶消化处理后的精制步骤中发挥效果。

 

C18 PhyTip®以下是使用列的好处…、

 

1、显示对肽或蛋白质的高结合力。

2、防止贵重样品丢失。

3、可在可用于质谱分析的各种溶剂中溶出。

 

我们的Biotage将C18树脂安装在带有独特技术Dual Flow Chromatography的移液管芯片型PhyTip色谱柱上。通过自由控制「吸引·喷出」的循环数和flow rate，探索适合肽和蛋白质的精制的条件变得容易。通过使用C18PhyTip列，可以容易地实现以下3点。

 

①Capture→Wash→Elution的各种步骤的条件研究（最优化的摸索）

②用于评价是否为功能性蛋白质的少量纯化

③通过安装在各公司液体处理器上，使样品调整的high-throughput自动化

 

Trypsin PhyTip®与列组合可优化工作流。成为在small-scale中处理很多样品的研究员们可靠的伙伴吧。

C18 PhyTip®色谱柱有助于减少肽和蛋白质的损失

[示例信息]

利用90℉和300℉的C18PhyTip色谱柱和C18ZipTip（Sigma），进行了少量Cytocrome C的精制。

表格
biotage phynexus C18

[实验结果的考察]

90℉和300℉的C18 PhyTip色谱柱显示了与ZipTip相同的80%以上的Cytocrome C回收率（见表）。

C18 PhyTip®色谱柱可以在质谱中使用的各种溶剂中溶出

要对脱盐后的肽进行质谱分析，必须在最佳溶剂中溶解肽。使用ESI-MS时，为了有效地进行electrospray，比起TFA更适合使用formic acid。

[示例信息]

利用90℉的C18PhyTip色谱柱，通过不同溶剂和酸的组合进行Cytocrome C的纯化。

图表，图表
biotage phynexus C18

[实验结果的考察]

通过利用以70%的ACN为基础的洗脱缓冲液，显示出高回收率。为了得到与此相同程度的结果，需要使用以90%的MtOH为基础的洗脱缓冲液（参照图表）。

订单信息

200 µL format

PTR-92-05-18  Reverse phase PhyTip®200 µl format, 5 µl C18 (90 Å), (96/pk), MEA2

PTR-92-20-18  Reverse phase PhyTip®200 µL format, 20 µL C18 (90 Å), (96/pk), MEA2

 

PTR-92-05-19  Reverse phase PhyTip®200 µl format, 5 µl C18 (300 Å), (96/pk), MEA2

PTR-92-20-19  Reverse phase PhyTip®200 µL format, 20 µL C18 (300 Å), (96/pk), MEA2

 

1,000 µL format

PTR-91-10-18 Reverse phase PhyTip®1 ml format, 10 µl C18 (90 Å), (96/pk), MEA2

PTR-91-20-18 Reverse phase PhyTip®1 mL format, 20 µL C18 (90 Å), (96/pk), MEA2

PTR-91-40-18 Reverse phase PhyTip®1 mL format, 40 µL C18 (90 Å), (96/pk), MEA2

PTR-91-80-18 Reverse phase PhyTip®1 mL format, 80 µL C18 (90 Å), (96/pk), MEA2

PTR-91-16-18 Reverse phase PhyTip®1 mL format, 160 µL C18 (90 Å), (96/pk), MEA2

 

PTR-91-10-19 Reverse phase PhyTip®1 ml format, 10 µl C18 (90 Å), (96/pk), MEA2

PTR-91-20-19 Reverse phase PhyTip®1 mL format, 20 µL C18 (90 Å), (96/pk), MEA2

PTR-91-40-19 Reverse phase PhyTip®1 mL format, 40 µL C18 (90 Å), (96/pk), MEA2

PTR-91-80-19 Reverse phase PhyTip®1 mL format, 80 µL C18 (90 Å), (96/pk), MEA2

PTR-91-16-19 Reverse phase PhyTip®1 mL format, 160 µL C18 (90 Å), (96/pk), MEA2

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