May 11, 2022
Bob Bickler
快速色谱法很复杂。溶剂的选择、色谱柱尺寸、固定相、装载技术、梯度法、流速、检测参数，这些都是左右快速色谱和该纯化技术成功的变量。在这些变量中，检测参数，即检测器的类型，可能对快速色谱结果有很大影响。
合成化合物的大部分（至少是在制药研究所制造的化合物），以1个以上的波长表示紫外线吸收，不过，几乎不表示紫外线吸收的合成化合物和天然化合物增加着。在这种情况下，大多数化学家蒸发光散射检测器（ELSD）等其他检测器，检测溶出化合物并进行划分。
但是，我的经验表明，大多数被认为需要ELSD的化合物，通过将PDA-UV检测器调整到适合对象化合物的波长范围，可以获得良好的灵敏度。属于这一类的化合物有脂质和萜烯类等UV吸收灵敏度低的类似化合物。
由于基于mRNA的COVID-19疫苗是使用几种不同的脂质化合物制作而成的，所以脂质在最近几年成为话题，一般认为其有效纯化需要非UV检测器或ELSD的化合物群。实际上，ELS检测会带来理想的结果，但是在适合这些化合物的波长范围（198-210nm）调整的可变波长PDA UV检测器也同样可以。
在以下例子中，使用反相快速色谱法，可以举出作为完全饱和脂肪酸酯的月桂酸甲酯（C12:0）、作为一价不饱和脂肪酸酯的油酸甲酯（C18:1）、在mRNA疫苗的脂质纳米粒子混合物中使用的脂质--胆固醇。使用窄波长范围进行检测，实际上提高这些化合物的UV灵敏度波长聚焦的检测技术，与ELSD并用比较的结果如图1所示。
