固相萃取(SPE)合成加工

固相萃取(SPE)是使用96孔板或色谱柱的流通技术。可以选择性地回收溶液中含有的目标化合物(捕获&释放SPE)和除去杂质(清除SPE)。图1显示了典型的SPE列。

图1典型的SPE列格式
图1典型的SPE列格式

化合物保持机理

化合物以离子性或极性、非极性的结合力保持在填充剂中。与树脂试剂不同,SPE与化合物的相互作用是比较非特异性和可逆的,不会引起填充剂与化合物的特异性反应。SPE色谱柱和SPE96well板可用于捕捉和释放SPE和清理SPE。

捕获和释放SPE

在捕获和释放SPE中,柱填料捕获杂质中所含的所需化合物。清洗色谱柱或孔除去杂质后,在下一次洗脱操作中使用适当的溶剂,使所需化合物洗脱。

图2捕获和释放SPE的步骤
图2捕获和释放SPE的步骤

清理SPE

在喷镀SPE中,色谱柱填充剂捕捉样品溶液中的杂质,使目标化合物通过。杂质通过与填充剂的相互作用停留在色谱柱上,进行目标化合物的分离。

图3划线SPE的步骤
图3划线SPE的步骤

列大小

SPE列具有各种大小和形状。传统的注射器类型的形状的东西容易使用,如果使用VacMaster-20的话一次最多可以同时操作20个样品。使用ISOLUTE Array24采样处理歧管处理没有标签的SPE列(无标签列)非常有用。在处理更多样品时,还有孔固定板(96孔)和模块式阵列孔板。

SPE色谱柱能力

SPE分离的物质量取决于填料的能力。在一个典型的例子中,非极性SPE色谱柱可以保留相对于填料重量约5%重量的物质(例如,1g填料可以保留50mg目标化合物/杂质)。离子交换SPE色谱柱的能力可以用1g填料的milliequivatens(meq)来测定。装有能力为0.6meq/g的500mg强阳离子交换填充剂(磺酸系)的SPE色谱柱时,可保持分子量为250g/mol的最大70mg阴离子化合物。

SPE色谱柱材质

生物尾迹的ISOLUTE SPE色谱柱和96孔板材质为聚丙烯,玻璃料为聚乙烯。都对溶剂有很强的耐性,而且也对应一般的填充剂、酸和碱。

实验操作

SPE色谱柱和板可以通过手动处理进行真空处理,也可以通过自动化系统进行处理。

ISOLUTE SPE列操作指南

这是正确使用ISOLUTE SPE色谱柱的指南。

列操作

  1. 特别是在离子交换操作中,不要太快地向SPE柱中注入溶液。如果以极快的流速注入溶剂,目标化合物就会离开填充剂。请以适当的流速通液。
  2. 通过过滤等方法去除微粒子,防止色谱柱堵塞。处理前,请确认目标化合物没有吸附在微粒子上。

SPE列选择指南

应用程序 使用产品
有机溶剂体系
碱性目标化合物提取 二氧化硅负载磺酸

ISOLUTE SCX-2

碱性目标化合物提取 高负载聚合物负载对甲苯磺酸(tosic acid/甲苯磺酸)
MP-TsOH
酸性目标化合物提取 二氧化硅负载季胺

ISOLUTE PE-AX

除去碱性过剩试剂 二氧化硅负载磺酸

ISOLUTE SCX-2

除去碱性过剩试剂 高负载聚合物负载对甲苯磺酸(tosic acid/甲苯磺酸)
MP-TsOH
除去酸性过剩试剂 二氧化硅负载季胺

ISOLUTE PE-AX

除去酸性和碱性杂质(中性靶化合物) 二氧化硅负载磺酸和二氧化硅负载季胺

ISOLUTE SCX-2

ISOLUTE PE-AX

极性化合物除去 极性填充剂

ISOLUTE Si II(二氧化硅)
ISOLUTE Alumina
(氧化铝)
ISOLUTE FL(Florisil)

水性溶剂体系及有机/水性混合溶剂
LC馏分浓缩 基于树脂的非极性填充剂

ISOLUTE103