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生物高分子用离子交换柱 Proteomix®IEX系列 Sepax Ion Exchange Phases(Proteomix®IEX series)

用于蛋白质、寡核苷酸、肽等分离分析
特别设计的非极化子离子交换柱

Sepax Proteomix®IEX series

Sepax Technologies公司的Proteomix®IEX系列是专门设计用于分离分析蛋白质、寡核苷酸、肽等的离子交换柱。树脂,是把硬质聚苯乙烯二乙烯基苯共聚物做为核心,纳米厚的亲水性被膜涂层高密度,离子交换基均匀地结合了的非极性曲线。每个配体都有强阳离子(SCX)、弱阳离子(WCX)、强阴离子(SAX)、弱阴离子(WAX)的各种类型,可以根据用途进行选择。
因为是非多孔的所以适合高分子的分离,中性的亲水性被膜非特异性的吸附极小,根据出色的表面技术交换容量大批量差也成为极小,生物高分子的分离回收发挥出色的性能。

Sepax technologies公司的Proteomix IEX系列是聚合物制造的!

Sepax technologies公司的Proteomix IEX系列的柱树脂是聚合物制的,可以在宽的pH范围内使用(pH2-12)。并且,由于亲水性的特殊被膜的涂层尽可能排除非特异性的吸附,特别对生物高分子显示有效的性能。

产品,产品Pore Size粒子大小(μm)动态binding capacity*pH range

Proteomix SCX-NP

强阳离子(磺酸基)

Non-porous1.7,3,5,10〜30,22,13,10mg/mL2-12

Proteomix WCX-NP

弱阳离子(羧基)

Non-porous1.7,3,5,10〜21,18,16,7.4mg/mL2-12

Proteomix SAX-NP

强阴离子(季胺)

Non-porous1.7,3,5,10〜34,31,17,13mg/mL2-12

Proteomix WAX-NP

弱阴离子(叔胺)

Non-porous1.7,3,5,10〜25,23,16,14mg/mL2-12

*Dynamic binding capacity test conditions:1)For Proteomix SCX and Proteomix WCX,Sample:3.0mg/mL lysozyme in 20mM sodium phosphate buffer,pH6.0;Flow rate:0.5mL/min(0.25mL/min for1.7μm);Detection:UV254nm.2)For Proteomix SAX and Proteomix WAX,Sample:3.0mg/mL BSA in 20mM Tris HCI,pH8.0;Flow rate:0.5mL/min(0.25mL/min for1.7μm);Detection:UV280nm。

Sepax technologies公司的Proteomix IEX系列的特点是无极!

非极性柱是柱树脂为无孔性的柱的总称。由于传统色谱柱(多孔色谱柱)中没有树脂表面的细孔,因此不会因树脂表层的细孔而产生流动相的滞留,因此可以更有效地分离。

蛋白质的分离-其1-(多孔柱和无孔柱的比较)

Sample:Horse Serum
移动相位:
A;25mM Tris-Acetate,pH7.3
B;A+0.8M Sodium Acetate
(SAX-NP5)
Gradient:0→50→70%B(0→25→28min)
流动速率:0.5 mL/min
(Porous SAX)
Gradient:0→100%(0.5→35 min)
流动速率:1.0 mL/min
检测:UV 280 nm

血清(马)是含有各种蛋白质的样品。因为分离条件稍有不同,所以不能进行完全的比较,但在非多孔Proteomix IEX系列(红线)中,得到了多个尖锐的峰,作为一般的多孔离子交换柱的其他公司阴离子交换柱(绿线)而需要与环境混合的每条反射光线,进行环境采样。

蛋白质的分离-其2-(多孔柱与非多孔柱的比较)

Sample:RNaseA(bovine pancreas)8µL(0.5µg/µL)
移动相位:
A;10mM Sodium Phosphate,pH6.0
B;A+1.0M NaCl
Gradient:1%→40%→80%B(3→15→20min)
流动速率:1.0 mL/min
检测:UV 280 nm

这个条件(粒径)稍微也不同,不过,是使用了代表性的蛋白质的RNaseA(牛胰脏)的比较。与多孔柱相比,非极性柱的数据不仅主峰形状尖锐,而且检测到的峰数特别多,在生物高分子的分离上显示出优异的性能。

关于样品结合量

克服弱点的非极谱柱(动态结合量)

传统的无极柱在结合量上有弱点,但凭借独特的优秀表面加工技术,完全控制了树脂表面,实现了高结合容量和极小的批量差。

阳离子交换柱使用溶菌酶,阴离子交换柱使用BSA求出动态结合量。所有色谱柱均显示出数十mg/mL的结合量,可见其样品结合量接近传统的多孔色谱柱。

天然物的分析-大肠杆菌莱塞特-
(注入容量和峰值形状)

Proteomix IEX系列与传统的非极性标量相比,每单位体积的样品结合量有很多倾向。但是,即使样品的负荷量增加,峰值形状也不能说是好的色谱柱。通过分析大肠杆菌的莱塞特(E.Coli Lysate)的数据,可以看出即使增加样品的注入容量也能维持检测到的峰值形状。

天然物的分析-大肠杆菌莱塞特-
(根据粒径的检测峰数的不同)

High Peak Capacity Separation for E.Coli Lysate

Sample:E.Coli Bacteria Lysate
Mobile Phase:A;20mM Tris pH9.0,B;A+0.5M NaCl
Linear Gradient:0%to 100%B,in 30min
流动速率:0.5 mL/min
Injection:10µL(2.5mg/mL)

在相同尺寸且只有粒径不同的色谱柱中,粒径小的色谱柱得到的峰数较多。天然物的样品中含有很多物质,在其分析中得到的峰的数量多可以说是进行实验所希望的。在Proteomix IEX系列中,还列出了3µm和1.7µm等小粒径的色谱柱,强力支持希望更精密分析的用户。

天然物的分析-海洋酵母提取液-
(由于样品量的不同,检测峰数的不同)

样品:海洋酵母提取液
移动相位:
A;20mM Tris-Acetic Acid,pH7.5
B;A+0.5M Sodium Acetate
Gradient:2%→98%B
(0.8→13.8min.)
Flow rate:0.2 mL/min。
检测:UV 280 nm

天然物样品中含有多种物质。通过增加样品量,可以检测到少量样品注入时看不到的峰值。与以往的非极性柱相比,每单位体积的样品结合量有较多倾向的Proteomix IEX系列,即使是小口径的短柱也能增加样品负荷量,因此可以说是在天然物的分析中发挥效果的柱。

分离性能/批次重现性

理论级数(N)>100000/50mm

没有非特异性吸附,按等电点的顺序得到峰值。

批量重现性