Sepax Proteomix®IEX series Sepax Technologies公司的Proteomix ® IEX系列是专门设计用于分离分析蛋白质、寡核苷酸、肽等的离子交换柱。 树脂,是把硬质聚苯乙烯二乙烯基苯共聚物做为核心,纳米厚的亲水性被膜涂层高密度,离子交换基均匀地结合了的非极性曲线。 每个配体都有强阳离子(SCX)、弱阳离子(WCX)、强阴离子(SAX)、弱阴离子(WAX)的各种类型,可以根据用途进行选择。 因为是非多孔的所以适合高分子的分离,中性的亲水性被膜非特异性的吸附极小,根据出色的表面技术交换容量大批量差也成为极小,生物高分子的分离回收发挥出色的性能。
Sepax technologies公司的Proteomix IEX系列是聚合物制造的! Sepax technologies公司的Proteomix IEX系列的柱树脂是聚合物制的,可以在宽的pH范围内使用(pH2-12)。 并且,由于亲水性的特殊被膜的涂层尽可能排除非特异性的吸附,特别对生物高分子显示有效的性能。
产品,产品 Pore Size 粒子大小(μm) 动态binding capacity* pH range Proteomix SCX-NP
强阳离子(磺酸基)
Non-porous 1.7,3,5,10 〜30,22,13,10mg/mL 2-12 Proteomix WCX-NP
弱阳离子(羧基)
Non-porous 1.7,3,5,10 〜21,18,16,7.4mg/mL 2-12 Proteomix SAX-NP
强阴离子(季胺)
Non-porous 1.7,3,5,10 〜34,31,17,13mg/mL 2-12 Proteomix WAX-NP
弱阴离子(叔胺)
Non-porous 1.7,3,5,10 〜25,23,16,14mg/mL 2-12
*Dynamic binding capacity test conditions:1)For Proteomix SCX and Proteomix WCX,Sample:3.0mg/mL lysozyme in 20mM sodium phosphate buffer,pH6.0;Flow rate:0.5mL/min(0.25mL/min for1.7μm); Detection:UV254nm.2)For Proteomix SAX and Proteomix WAX,Sample:3.0mg/mL BSA in 20mM Tris HCI,pH8.0;Flow rate:0.5mL/min(0.25mL/min for1.7μm); Detection:UV280nm。
Sepax technologies公司的Proteomix IEX系列的特点是无极! 非极性柱是柱树脂为无孔性的柱的总称。 由于传统色谱柱(多孔色谱柱)中没有树脂表面的细孔,因此不会因树脂表层的细孔而产生流动相的滞留,因此可以更有效地分离。
蛋白质的分离-其1-(多孔柱和无孔柱的比较) Sample:Horse Serum 移动相位: A; 25mM Tris-Acetate,pH7.3 B; A+0.8M Sodium Acetate (SAX-NP5) Gradient:0→50→70%B(0→25→28min) 流动速率:0.5 mL/min (Porous SAX) Gradient:0→100%(0.5→35 min) 流动速率:1.0 mL/min 检测:UV 280 nm 血清(马)是含有各种蛋白质的样品。 因为分离条件稍有不同,所以不能进行完全的比较,但在非多孔Proteomix IEX系列(红线)中,得到了多个尖锐的峰,作为一般的多孔离子交换柱的其他公司阴离子交换柱(绿线) 而需要与环境混合的每条反射光线,进行环境采样。
蛋白质的分离-其2-(多孔柱与非多孔柱的比较) Sample:RNaseA(bovine pancreas)8µL(0.5µg/µL) 移动相位: A; 10mM Sodium Phosphate,pH6.0 B; A+1.0M NaCl Gradient:1%→40%→80%B(3→15→20min) 流动速率:1.0 mL/min 检测:UV 280 nm 这个条件(粒径)稍微也不同,不过,是使用了代表性的蛋白质的RNaseA(牛胰脏)的比较。 与多孔柱相比,非极性柱的数据不仅主峰形状尖锐,而且检测到的峰数特别多,在生物高分子的分离上显示出优异的性能。
关于样品结合量 克服弱点的非极谱柱(动态结合量) 传统的无极柱在结合量上有弱点,但凭借独特的优秀表面加工技术,完全控制了树脂表面,实现了高结合容量和极小的批量差。
阳离子交换柱使用溶菌酶,阴离子交换柱使用BSA求出动态结合量。 所有色谱柱均显示出数十mg/mL的结合量,可见其样品结合量接近传统的多孔色谱柱。
天然物的分析-大肠杆菌莱塞特- (注入容量和峰值形状) Proteomix IEX系列与传统的非极性标量相比,每单位体积的样品结合量有很多倾向。 但是,即使样品的负荷量增加,峰值形状也不能说是好的色谱柱。 通过分析大肠杆菌的莱塞特(E.Coli Lysate)的数据,可以看出即使增加样品的注入容量也能维持检测到的峰值形状。
天然物的分析-大肠杆菌莱塞特- (根据粒径的检测峰数的不同) High Peak Capacity Separation for E.Coli Lysate Sample:E.Coli Bacteria Lysate Mobile Phase:A;20mM Tris pH9.0,B;A+0.5M NaCl Linear Gradient:0%to 100%B,in 30min 流动速率:0.5 mL/min Injection:10µL(2.5mg/mL)
在相同尺寸且只有粒径不同的色谱柱中,粒径小的色谱柱得到的峰数较多。 天然物的样品中含有很多物质,在其分析中得到的峰的数量多可以说是进行实验所希望的。 在Proteomix IEX系列中,还列出了3µm和1.7µm等小粒径的色谱柱,强力支持希望更精密分析的用户。
天然物的分析-海洋酵母提取液- (由于样品量的不同,检测峰数的不同) 样品:海洋酵母提取液 移动相位: A; 20mM Tris-Acetic Acid,pH7.5 B; A+0.5M Sodium Acetate Gradient:2%→98%B (0.8→13.8min.) Flow rate:0.2 mL/min。 检测:UV 280 nm
天然物样品中含有多种物质。 通过增加样品量,可以检测到少量样品注入时看不到的峰值。 与以往的非极性柱相比,每单位体积的样品结合量有较多倾向的Proteomix IEX系列,即使是小口径的短柱也能增加样品负荷量,因此可以说是在天然物的分析中发挥效果的柱。
分离性能/批次重现性 理论级数(N)>100000/50mm 没有非特异性吸附,按等电点的顺序得到峰值。