TRAF6 ELISA试剂盒

• 预涂层，即用型96-well条形板，平底
• 96口井的封板机
• 参考标准
• 品稀释液
• 检测试剂A
• 检测试剂B
• 分析稀释剂A
• 分析稀释剂B
• 试剂稀释剂（如果检测试剂冻干）
• 底物溶液
• 停止解决方案
• 洗涤缓冲液（30倍浓缩液）
• 使用说明书

标准材料信息：
标准可能是重组蛋白或天然蛋白，这取决于具体的试剂盒。此外，表达系统是大肠杆菌或酵母或哺乳动物细胞。标准中含有0.05%的普鲁克林300作为防腐剂。

试剂信息：
试剂盒中使用的停止溶液为浓度为1mol/L的硫酸，洗涤溶液为TBS。标准稀释剂含有0.02%叠氮化钠，测定稀释剂A和测定稀释剂B含有0.01%叠氮化钠。某些套件中可以包含BSA。

抗体信息：
所提供的抗体及其宿主在不同的试剂盒中有所不同。

1. 准备所有试剂、样品和标准，
2. 向每个孔中添加100μL标准或样品。在37⁄°C下孵育1小时，
3. 吸取并添加100μL制备的检测试剂A。在37⁄°C下培养1小时，
4. 吸气并清洗3次，
5. 添加100μL制备的检测试剂B。在37⁄°C下培养30⁄分钟，
6. 吸气并清洗5次，
7. 添加90μL基质溶液。在37⁄°C下培养10-20⁄分钟，
8. 添加50μL停止溶液。立即在450nm处读取。

1. 使用前将所有套件组件和样品置于室温（18-25⁄°C）。
2. 标准液-用1.0⁄mL标准稀释剂重新配制标准液，在室温下保持10⁄分钟，轻轻摇晃（不要使其起泡）。储备溶液中标准溶液的浓度为20⁄ng/mL。首先将储备溶液稀释至10⁄ng/mL，稀释后的标准溶液作为最高标准（10⁄ng/mL）。然后制备7支含有0.5⁄mL标准稀释剂的试管，并使用稀释后的标准液产生双稀释系列。在下一次转移之前，彻底混合每根管子。设置7个稀释标准点，如10⁄ng/mL、5⁄ng/mL、2.5⁄ng/mL、1.25⁄ng/mL、0.625ng/mL、0.312⁄ng-mL、0.156ng/mL，最后一个使用标准稀释剂的微离心管是空白的0⁄ng/mL。
3. 检测试剂A和检测试剂B-使用前，短暂旋转或离心库存检测A和检测B。分别用测定稀释剂A和B稀释至工作浓度（1:100）。
4. 洗涤液-用580⁄mL去离子水或蒸馏水稀释20⁄mL浓缩洗涤液（30x），以制备600⁄mL洗涤液（1x）。
5. TMB基质-用消毒过的针头吸入所需剂量的溶液，不要将残留溶液再次倒入小瓶。

注：

1. 不允许直接在井内进行连续稀释。
2. 在分析前15⁄分钟内制备标准品。请不要在37⁄°C下直接溶解试剂。
3. 请按照说明小心地重新配制标准品或工作检测试剂A和B，避免起泡并轻轻混合，直到晶体完全溶解。为了最大限度地减少移液管造成的不精确性，请使用小容量并确保移液器经过校准。建议吸一次10μL以上。
4. 重新配制的标准品、检测试剂A和检测试剂B只能使用一次。
5. 如果洗涤液浓缩液（30倍）中形成晶体，将其加热至室温并轻轻混合，直至晶体完全溶解。
6. 受污染的水或试剂制备容器会影响检测结果。

• 建议使用没有长期储存的新鲜样品，否则这些样品可能会发生蛋白质降解和变性，导致错误的结果。因此，样品应在2-8°C下短时间储存，或在-20°C（≤1个月）或-80°C（不超过3个月）下校准。应避免重复冻融循环。在分析之前，应缓慢解冻冷冻样品并离心，以清除沉淀物。
• 如果说明书中未规定样品类型，则需要进行初步测试以确定与试剂盒的兼容性。
• 如果使用裂解缓冲液制备组织匀浆或细胞培养上清液，则有可能由于引入的化学物质而导致偏差。建议的稀释系数仅供参考。
• 在进行测试之前，请估计样品的浓度。如果数值不在标准曲线的范围内，则必须确定特定实验的最佳样品稀释度。然后用PBS（pH=7.0-7.2）稀释样品。

1. 对于未打开的试剂盒：所有试剂应按照小瓶上的标签进行储存。标准品、检测试剂A、检测试剂B和96号条形板在收到后应保存在-20°C下，而其他试剂应保存在4°C下。
2. 对于打开的试剂盒：剩余试剂必须按照上述储存条件进行储存。此外，请将未使用的水井放回装有干燥剂的铝箔袋中，并用拉链密封铝箔袋。