主要功能和细节
一次性90分钟协议 灵敏度:504 pg/ml 范围:615 pg/ml-7000 pg/ml 样品类型:细胞培养基、细胞裂解液、Cit血浆、EDTA血浆、Hep血浆、血清、组织裂解液 检测方法:比色法 分析类型:三明治(定量) 反应对象:人类
概述
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产品名称 -
检测方法 比色法 -
精确度 批次内 样品 n个 平均值 标准偏差 变异系数% 血清 8 2.5% 批次间 样品 n个 平均值 标准偏差 变异系数% 血清 三 8.9% -
样品类型 血清、细胞裂解液、细胞培养基、Hep血浆、EDTA血浆、Cit血浆、组织裂解液 -
检测类型 三明治(定量) -
灵敏度 504微微克/毫升 -
范围 615微微克/毫升- 7000微微克/毫升 -
回收率 特定样本回收率 样品类型 平均% 范围 血清 117 116% - 118% 细胞培养基 103 90% - 114% Hep血浆 106 93% - 115% EDTA血浆 118 105% - 129% Cit血浆 113 113% - 113% -
检测时间 1小时 3000万 -
实验步骤 一步分析法 -
种属反应性 与反应: 人类 -
产品概述 人Alpha-synuclein ELISA试剂盒(ab260052)是一种单洗90分钟夹心ELISA试剂,用于定量测定细胞培养液、细胞裂解液、cit血浆、edta血浆、hep血浆和血清中的Alpha-sunuclein蛋白。 它使用我们专有的SimpleStep ELISA®技术。 以504 pg/ml的灵敏度定量人α-同核蛋白。
SimpleStep ELISA®技术使用与亲和标签结合的捕获抗体,亲和标签被用于覆盖SimpleStepELISA®板的单克隆抗体识别。 这种夹心ELISA方法允许在一个步骤中形成抗体分析夹心复合物,显著缩短了分析时间。 有关更多详细信息,请参阅图像部分中的SimpleStep ELISA®协议摘要。 我们的SimpleStep ELISA®技术具有以下优点:
-单次刷洗方案将分析时间缩短至90分钟或更短 -高级抗体的高灵敏度、特异性和再现性 -在生物样品中充分验证 -96块钢板可分解成12 x 8个井带
384孔SimpleStep ELISA®微孔板( 约203359 )可作为SimpleStep ELISA®试剂盒提供的96-well微孔板的替代品使用。
检测特异性
该试剂盒仅识别血清、血浆和细胞培养上清液、细胞和组织提取物样品中的天然和重组人α-同核蛋白。
尿液、唾液和脑脊液样本未使用该试剂盒进行测试。
交叉反应性
以7000 pg/mL的速度制备重组Tau 441、UCHL-1、β-微管蛋白和γ-同核蛋白,并分析其交叉反应性。 未观察到交叉反应。
干扰
以4 ng/mL制备重组Tau 441、UCHL-1和β-微管蛋白,并测试其干扰。 未观察到干扰。
物种反应性
该试剂盒可识别人类Alpha-synuclein蛋白。
通过测量不同物种50%的血清样品,从人类标准曲线中插值蛋白质浓度,并将插值浓度表示为在相同稀释度下测定的人类血清中蛋白质浓度的百分比,来确定其他物种的反应性。
该试剂盒与恒河猴血清发生反应。
以下物种的反应性<3%:
鼠标 老鼠 奶牛
未确定其他物种的反应性。 -
说明 Alpha-synuclein是一种由SNCA基因编码的140氨基酸蛋白质,主要存在于神经组织中。 它是蛋白质的同核蛋白家族的成员,包括β-同核蛋白和γ-同核素。 Alpha-synuclein集中在神经元的突触前神经末梢,并在神经元的细胞核中发现。 Alpha-synuclein是路易体的主要成分。 这种蛋白质似乎在多巴胺代谢和囊泡运输中发挥作用。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权的必要性,以供其预期用途。 -
经测试应用 -
平台 预涂层微孔板(12 x 8孔板条)
性能
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存放说明 储存于+4°C。 请参阅协议。 -
组件 1 x 96测试 10X人α-突触核蛋白捕获抗体 1 x 600微升 10X人α-同核蛋白检测抗体 1 x 600微升 10X清洗缓冲液PT(ab206977) 1 x 20毫升 5X细胞提取缓冲液PTR(ab193970) 1 x 10毫升 抗体稀释液CPI2 1 x 6毫升 人α-同核蛋白冻干重组蛋白(ab51189) 2瓶 平板密封件 1台 样品稀释剂NS(ab193972) 1 x 50毫升 SimpleStep预涂层96孔微孔板(ab206978) 1台 停止解决方案 1 x 12毫升 TMB开发解决方案 1 x 12毫升 -
研究领域 -
功能 可能参与多巴胺释放和转运的调节。 诱导微管相关蛋白tau的纤维化。 降低神经元对各种凋亡刺激的反应性,导致caspase-3活化降低。 -
组织特异性 主要在大脑中表达,但在除肝脏外的所有检查组织中也以低浓度表达。 集中于突触前神经末梢。 -
疾病相关 SNCA的遗传改变导致异常聚合成纤维,与几种神经退行性疾病(联核蛋白病)有关。 SNCA纤维聚集物是阿尔茨海默病淀粉样斑块的主要非A-β成分,也是路易体内含物的主要成分。 在1型脑铁积聚的神经退行性变中,它们也存在于路易体(LB)样神经内包涵体、神经胶质包涵体和轴突球体中。 帕金森病1 帕金森病4 路易痴呆体 -
序列相似性 属于突触核蛋白家族。 -
结构域 “阿尔茨海默病淀粉样斑块的非A-β成分”域(NAC域)参与原纤维的形成。 中间的疏水区域形成了纤丝的核心。 C末端可以调节聚集并决定纤丝的直径。 -
翻译后修饰 磷酸化,主要是丝氨酸残基。 CK1的磷酸化作用似乎发生在不同于其他激酶磷酸化的残基上。 在同核蛋白病变中,Ser-129的磷酸化是选择性的和广泛的。 在体外,Ser-129的磷酸化促进了不溶性纤维的形成。 在渗透胁迫下通过PTK2B依赖性途径在Tyr-125上磷酸化。 神经退行性同核蛋白病的标志性病变包含α-同核蛋白,该蛋白通过酪氨酸残基的硝化进行修饰,并可能通过二酪氨酸交联生成稳定的低聚物。 无所不在。 主要的缀合物是二氢喹啉形式。 Met-1处的乙酰化对正确折叠和天然低聚物结构似乎很重要。 -
细胞定位 细胞质,胞浆。 膜。 核心。 细胞连接,突触。 保密。 多巴胺能神经元的膜结合。 -
UniProt提供的信息 -
别名 α-突触核蛋白 α-同核蛋白 α-同核蛋白,NACP140亚型
查看所有内容 -
数据库链接
相关产品
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应用
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SimpleStep ELISA技术允许在一个步骤中形成抗体-抗原复合物,将检测时间缩短至90分钟。 一次将样品或标准品和抗体混合物加入孔中,孵育、洗涤并加入最终基质。 有关详细的分步指南,请参阅协议。 -
原始人α-同核蛋白单步ELISA试剂盒的标准曲线比较( 约210973 )和当前的人类α-同核蛋白单步ELISA试剂盒(ab260052)。 -
如第10节所述,制备Alpha-synuclein标准曲线。 原始数据值显示在表中。 绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
如前所述,制备Alpha-synuclein标准曲线。 原始数据值显示在表中。 绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
如前所述,制备Alpha-synuclein标准曲线。 原始数据值显示在表中。 绘制背景数据值(平均值+/-SD) -
如前所述,制备Alpha-synuclein标准曲线。 原始数据值显示在表中。 绘制了背景数据值(平均值+/-SD)。 -
根据Alpha-synuclein标准曲线插值并校正样品稀释度,重复测量Alpha-sunuclein浓度。 未稀释样品如下:血清100%,血浆(EDTA)100%,血浆50%(柠檬酸盐)和血浆(肝素)100%。 绘制插值稀释因子校正值(平均值+/-SD,n=2)。 血清中Alpha-synuclein的平均浓度为6.6 ng/mL,血浆(EDTA)中为6.8 ng/mL,血浆(柠檬酸盐)中为13.6 ng/mL和血浆(肝素)中为7.1 ng/mL。 -
重复测量Alpha-synuclein的浓度,并根据Alpha-sunuclein标准曲线进行插值,并针对样品稀释进行校正。 绘制插值稀释系数校正值(平均值+/-SD,n=2)。 -
绘制插值稀释因子校正值(平均值+/-SD,n=2)。 Alpha-synuclein的平均浓度测定为7.8 ng/mL,范围为3.0–8.9 ng/mL。 -
绘制野生型和α-突触核蛋白敲除HAP1细胞提取物在111μg/mL下测试的原始数据。 -
通过计算零个标准品重复的平均值并添加2个标准偏差,然后外推相应的浓度,确定MDD。 -
稀释线性是根据标准曲线的插值确定的。 稀释线性定义了一个样品浓度区间,在该区间内,内插目标浓度与样品稀释度成正比。 在以下生物样品中以1.5倍稀释系列测量天然α-同核蛋白。 在样品稀释剂NS中进行样品稀释。 -
稀释线性是根据标准曲线的插值确定的。 稀释线性定义了一个样品浓度区间,在该区间内,内插目标浓度与样品稀释度成正比。 在以下生物样品中以1.5倍稀释系列测量天然α-同核蛋白。 在样品稀释剂1X细胞提取缓冲液PTR中进行样品稀释。 重组Alpha-synuclein蛋白以1.5倍的稀释倍数加入含有10%FBS的RPMI培养基中。 在样品稀释剂NS中进行系列稀释。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (3)
Leupold左旋 等。 抗α-突触核蛋白抗体特异性的探索——从流式细胞术分析中吸取的教训。 前Neurol 13:869103 (2022). 公共医学:35911883 桑JC 等。 超分辨率成像显示SH-SY5Y细胞中a-synuclein种子聚集。 公共生物 4:613 (2021). 公共医学:34021258 Lv S级 等。 60名阿尔茨海默病患者与28名年龄匹配的正常人相比,血浆a-突触核蛋白(a-syn)蛋白、尿阿尔茨海默病相关神经元线索蛋白(AD7c NTP)和载脂蛋白ε4(ApoE e4)等位基因与认知能力下降的关系。 医学科学Monit 27:e932998(2021)。 公共医学:34312362