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细胞连接,细胞膜,内体,高尔基体。
人(P12830):1-2:91-97kDa(预测)
(P09803):1:98kDa(预测值)
(Q9R0T4):99kDa(预测)
存在糖基化,磷酸化,泛素化修饰
上皮钙粘附素是一个膜蛋白,在胞外区有许多钙粘蛋白的重复序列,可能遮蔽抗原表位,因此建议超声裂解液以暴露抗原表位,便于抗体结合。
在不同样品中可能检测到分子量约为80kDa、97kDa和120kDa的一条或多条条带。
不同组织或细胞中,上皮钙粘附素表达量可能不同,建议设置阳性对照。
HT-29系列
MDA-MB-231瑞士
关键控制点
在实验中除了需要注意常规问题外,还要特别关注以下关键控制点:
样本制备
添加复合蛋白酶抑制剂以避免靶标蛋白降解。
整个样本制备过程中,保持样本置于冰上。
布拉德福德(Bradford)回报分析、劳里(Lowry)回报分析(BCA)分析测定样本总蛋白浓度。
电泳
20微克总蛋白进行电泳。
抗体孵育
请根据产品说明书选择合适的抗体工作浓度。