主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EP2109Y]到AKT1(磷酸化S473) 适用于:斑点杂交、细胞内ELISA、IHC-P、WB 与以下物质反应:小鼠、大鼠、人类、重组片段
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EP2109Y]至AKT1(磷酸化S473) -
宿主 兔子 -
特异性 AKT1(磷酸化S473)抗体(ab81283)检测丝氨酸473处磷酸化的AKT1。 围绕S473的AKT1区域与AKT2和AKT3中的相应区域具有高度相似性,因此如果在相应的丝氨酸残基上磷酸化,可能会与这些蛋白质发生交叉反应。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 小鼠、大鼠、人、重组片段 -
免疫原 -
阳性对照 WB:HeLa(在无血清培养基中培养过夜,然后用150nM胰岛素处理5分钟)全细胞裂解液; MCF7(CCCP处理)全细胞裂解液; LNCaP(100nM Cacyclin A处理30min)全细胞裂解液; NIH/3T3(用PDGF处理)全细胞裂解物; PC-12全细胞裂解物。 IHC-P:人宫颈癌组织。 斑点印迹:AKT1(磷酸化S473)磷酸肽。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油(甘油,甘油),0.05%牛血清白蛋白,59%PBS -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EP2109Y系列 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
检测试剂盒 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
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应用
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靶标
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功能 作为AKT-mTOR信号通路的关键调节剂,在成年神经发生过程中控制新生神经元整合过程的速度,包括正确的神经元定位、树突状发育和突触形成(通过相似性)。 能够磷酸化几种已知蛋白质的普通蛋白激酶。 磷酸化物TBC1D4。 磷脂酰肌醇3-激酶(PI(3)K)下游的信号转导各种生长因子的作用,如血小板衍生生长因子(PDGF)、表皮生长因子(EGF)、胰岛素和胰岛素样生长因子I(IGF-I)。 通过介导胰岛素诱导的GLUT4葡萄糖转运蛋白向细胞表面的移位,在葡萄糖转运中发挥作用。 介导IGF-I的抗凋亡作用。通过在“Ser-939”和“Thr-1462”磷酸化TSC2,从而激活mTORC1信号,导致4E-BP1磷酸化和RPS6KB1活化,介导胰岛素刺激的蛋白质合成。 通过介导胰岛素诱导的糖原合成酶激活促进糖原合成。 激活的形式可以抑制FoxO基因转录并促进细胞周期进展。 对SPATA13介导的细胞迁移和粘附组装和拆卸的调节至关重要。 -
组织特异性 在迄今为止分析的所有人类细胞类型中表达。 Tyr-176磷酸化形式在乳腺癌的进展阶段,即正常到增生(ADH)、导管原位癌(DCIS)、浸润性导管癌(IDC)和淋巴结转移(LNMM)阶段的表达显著增加。 -
疾病相关 AKT1缺陷是乳腺癌(BC)易感性的一个原因[MIM:114880]。 源自乳腺上皮组织的常见恶性肿瘤。 乳腺肿瘤可以通过组织学模式来区分。 浸润性导管癌是目前最常见的类型。 乳腺癌在病因和遗传上是异质的。 家族性发病和双侧受累表明了重要的遗传因素。 多个基因座的突变可能涉及不同的家族,甚至同一病例。 AKT1缺陷与结直肠癌(CRC)相关[MIM:114500]。 AKT1缺陷与卵巢癌易感性有关[MIM:604370]; 也称为家族性1型乳腺癌易感性(BROVCA1)。 -
序列相似性 属于蛋白激酶超家族。 AGC Ser/Thr蛋白激酶家族。 RAC子家族。 包含1个AGC-激酶C末端结构域。 包含1个PH域。 包含1个蛋白激酶结构域。 -
结构域 PH结构域与磷脂酰肌醇3-激酶α(PI(3)K)的结合导致其靶向质膜。 PH域介导与TNK2的相互作用,Tyr-176对这种相互作用也至关重要。 AGC-激酶C末端介导与THEM4的相互作用。 -
翻译后修饰 Thr-308、Ser-473和Tyr-474上的磷酸化是完全活性所必需的。 活化的TNK2使其在Tyr-176上磷酸化,从而与阴离子质膜磷脂PA结合。这种磷酸化形式定位于细胞膜,PDPK1和PDPK2将其靶向于Thr-308和Ser-473上进一步磷酸化,导致其活化。 mTORC2对Ser-473的磷酸化有利于PDPK1对Thr-308的磷酸化。 Ser-473磷酸化通过与AGAP2亚型2(PIKE-A)的相互作用而增强。 带有泰勒型气球细胞的局灶性皮质发育不良患者的Ser-473磷酸化增强。 泛素化; 经历“Lys-48”和“Lys-63”连接的多泛素化。 TRAF6诱导的“Lys-63”连接的AKT1泛素化对磷酸化和活化至关重要。 当泛素化时,它转移到质膜,在那里被磷酸化。 当完全磷酸化并转位到细胞核时,在TTC3的催化下发生“Lys-48”-多泛素化,导致其被蛋白酶体降解。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 细胞膜。 通过整合素连接蛋白激酶1(ILK1)激活后的细胞核。 与TCL1A的相互作用增强了核转位。 TNK2对Tyr-176的磷酸化导致其定位于细胞膜,在那里它被靶向Thr-308和Ser-473的进一步磷酸化,导致其活化,活化形式转移到细胞核。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 207 人类 Entrez基因: 11651 鼠标 Entrez基因: 24185 老鼠 Omim公司: 164730 人类 瑞士保护银行: 第31749页 人类 瑞士保护银行: 第31750页 鼠标 瑞士保护银行: 第47196页 老鼠 尤尼金: 525622 人类
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别名 AKT 1抗体 AKT抗体 AKT1抗体
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图片
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所有车道: 1/25000稀释的抗AKT1(磷酸化S473)抗体[EP2109Y](ab81283) 车道1: 100ng/ml PDGF处理NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)1小时的全细胞裂解物 车道2: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解物 每车道15µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 56千帕 观察到的频带大小: 56千帕 暴露时间: 3分钟 阻隔缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST -
所有车道: 稀释1/1000的抗AKT1(磷酸化S473)抗体[EP2109Y](ab81283) 车道1: LNCaP(人前列腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: 用0.1 uM Calyculin A处理LNCaP(人前列腺癌上皮细胞)30分钟全细胞裂解物 3号车道: A549(人肺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道4: MCF7(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道5: HepG2(人肝癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道6: 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)全细胞裂解物 7号车道: C2C12(小鼠成肌细胞成肌细胞)全细胞裂解物 第8车道: 小鼠脑裂解物 9号车道: 大鼠心脏裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 ) 预测的带宽大小: 56千帕 暴露时间: 50秒 PMID:19372546报道,AKT1(磷酸化S473)的基础表达水平在不同细胞系中存在差异。 但为了检测清楚的信号,强烈建议在使用这种抗体时进行治疗。 封闭和稀释缓冲液: 5%NFDM/TBST -
ab81283,1/100稀释,用福尔马林固定石蜡包埋组织的免疫组织化学方法对未经治疗(左侧)和经磷脂酶治疗(右侧)的人宫颈癌中的AKT1进行染色 在开始IHC染色方案之前,执行热介导抗原检索。 -
所有车道: 0.259µg/ml时的抗AKT1(磷酸化S473)抗体[EP2109Y](ab81283) 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)在无血清培养基中培养过夜,全细胞裂解液 车道2: HeLa在无血清培养基中生长过夜,然后用150nM胰岛素处理5min,全细胞裂解物 3号车道: HeLa在无血清培养基中培养过夜,然后用150nM胰岛素处理5分钟,全细胞裂解液。 然后用碱性磷酸酶培养膜 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 56千帕 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
转染非靶向siRNA的人HPV16永生化角质形成细胞的免疫组织化学分析,用ab81283染色AKT1(磷酸化S473)(绿色)。 在柠檬酸盐缓冲液(pH 6)中通过热调解进行抗原回收。 样品在与一级抗体(1/100)孵育前用10%的山羊血清封闭。 荧光素结合酪胺用于染色检测。 -
AKT1(磷酸化S473)磷酸肽(Lane 1)和AKT1非磷酸肽(Lane 2)的斑点杂交分析,在1:1000稀释度(0.259μg/ml)下用ab81283标记AKT1磷酸肽。 山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶偶联物( ab97051型 )作为二级抗体,稀释度为1:2000。 封闭缓冲液:5%NFDM/TBST。稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 0.259µg/ml时的抗AKT1(磷酸化S473)抗体[EP2109Y](ab81283) 车道1: LNCaP(人前列腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: 100nM Cacyclin A处理LNCaP 30min全细胞裂解液 3号车道: 用100nM Cacyclin A处理LNCaP 30分钟的全细胞裂解液。 然后用碱性磷酸酶培养膜 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 56千帕 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗AKT1(磷酸化S473)抗体[EP2109Y](ab81283) 所有车道: HEK293细胞裂解物 预测的带宽大小: 56千帕 胰岛素治疗:将细胞饥饿过夜,然后以100 ng/ml的浓度处理20分钟(胰岛素)。 磷酸酶处理:将膜条与200 ul磷酸酶(150 U/ml)在37度下孵育1小时。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗AKT1(磷酸化S473)抗体[EP2109Y](ab81283) 所有车道: NIH/3T3细胞裂解物 预测的带宽大小: 56千帕 PDGF处理:将细胞饥饿过夜,然后用100 ng/ml的PDGF治疗1小时。 磷酸酶处理:将膜条与200 ul磷酸酶(150 U/ml)在37度下孵育1小时。 -
主要:所有通道:1:5000稀释度的抗AKT1(磷酸化S473)抗体(ab81283)。 通道1=AKT1(His标签)全长重组蛋白 约62279 -50克。 通道2=NIH3T3血清饥饿过夜,15ug。 通道3=NIH3T3血清饥饿过夜,用PDGF-AB 50ng/mL治疗1小时,15ug。 次要:通道1-3:山羊多克隆到兔IgG H&L前吸附物(HRP),1:5000,使用ECL技术开发。 在还原条件下进行(50mM DTT,样品在60ºC下加热)。 预测带宽:56kDa。 观察到的频带大小:56kDa。 阻断步骤:5%牛奶加入50mM Tris+0.05%吐温,室温下1小时。一级抗体缓冲液:5%BSA加入50mM Tris+0.05%吐温过夜。 二级抗体缓冲液:5%牛奶加入50mM Tris+0.05%吐温中,室温下2小时。暴露时间:5分钟 -
NIH3T3细胞饥饿过夜,用PDGF 50ng/mL或溶媒对照处理1小时,然后用4%多聚甲醛固定。 使用抗体ab81283在红外细胞内ELISA检测平台上测量总Akt水平。 -
将PC12细胞与载体对照物(0 nM)和1μM甘丙肽(1-15)(猪、大鼠)(ab 141152)在37°C下培养24小时。 如文献所述,PC12细胞中AKT1(磷酸化S473)(ab81283)表达减少与甘丙肽(1-15)(猪、大鼠)浓度增加相关。 用RIPA缓冲液(含蛋白酶抑制剂和原钒酸钠)制备全细胞裂解物,将每个裂解物30μg加载到凝胶上,并在还原条件下运行WB。 转移后,使用3%的牛奶将膜封闭一小时,然后在4°C下与1μg/ml的ab81283和1μg/ml的b8227培养过夜。 使用与HRP结合的抗兔抗体检测抗体结合( ab97051型 )并使用ECL开发解决方案进行可视化。
数据表及文件
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数据表下载
文献 (611)
宁S 等。 MicroRNA-494通过PI3K/AKT/mTOR信号通路调节高葡萄糖诱导的心肌细胞凋亡和自噬。 ESC心脏衰竭 10:1401-1411 (2023). 公共医学:36772911 辛格R 等。 橄榄苦苷通过BDNF/CREB/Akt通路对鱼藤酮诱导的帕金森病模型提供神经保护。 科学代表 13:2452 (2023). 公共医学:36774383 车Z 等。 褪黑素通过EGFR-BRG1-TERT轴调节减轻酒精性肝病。 药物学报B 13:100-112 (2023). 公共医学:36815038 陈PJ 等。 Palbociclib阻断中性粒细胞磷脂酰肌醇3-激酶活性,缓解银屑病样皮炎。 杂志 180:2172-2188 (2023). 公共医学:36967633 徐Y 等。 神经酰胺合成酶1通过与USP14相互作用和下调PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制非小细胞肺癌的脑转移。 癌症(巴塞尔) 15:不适用(2023年)。 公共医学:37046655