利用工程通道对卤代烷脱卤酶DhaA04、DhaA14和DhaA15进行原子分辨研究

A.Stsiapanava公司,J.多纳雷克,J.A.加维拉,M.库蒂,T.库德拉科娃,J.丹博斯基和I.库塔·斯马塔诺娃

为了从结构角度探讨突变对改性蛋白质酶活性的影响，对三个DhaA突变体的原子分辨率结构进行了详细描述和比较。

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新型卤代烷脱卤酶DpcAP.低温卤素菌K5和DmxA来自海杆菌成功结晶了sp.ELB17，衍射数据分别收集到1.05和2.49 Au的分辨率。

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卤代烷脱卤酶DhaA（DhaA31）的一个突变株红色RNCIMB 13064及其与1，2，3-三氯丙烷的配合物结晶，晶体衍射至高分辨率。

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晶体的蒸汽浸泡红色R卤代烷脱卤酶变体DhaA31与1,2,3-三氯丙烷在室温和pH 6.5条件下促进了蛋白质底物复合物的产生。将无底物的DhaA31结构与DhaA31-底物络合物的结构进行比较，揭示了亲核残基Asp106的两种可选构象和卤化物释放的可能途径，而将DhaA31DhaA与野生型DhaA进行比较，则揭示了活性位点的尺寸减小和溶剂可及性。

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嗜冷细菌卤代烷脱卤酶DpcA的结构嗜冷核菌K5是一种生物技术应用中很有吸引力的酶，其原子分辨率为1.05 Au。与其他卤代烷脱卤酶相比，该酶具有最短的主通道和狭缝通道。结构比较显示了帽状结构域α4螺旋区域的主要差异，这是隧道特性的决定因素之一。DpcA的结构信息为理解其催化特性奠定了基础，并可以指导这种冷适应酶的修饰以用于各种生物技术应用。

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晶体结构(S公司)-来自水性致病微生物的对映选择性卤代烷脱卤酶DmmarA海洋分枝杆菌以1.6和1.85º的分辨率测定。这些结构揭示了一种以前未观察到的同源二聚模式，主要通过不寻常的L5-L5环相互作用介导。

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