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在应用样品之前,用单链DNA覆盖低温电子显微镜网格,可以减少大分子的聚集并改善其分布。它可以从传统网格上聚集的样品中确定结构。

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本文描述了低温电子显微镜用户可以采取的不同方法,以提高高分辨率单粒子低温电子显微镜的样品分布和冰的质量。

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单粒子低温电子显微镜中的样品制备仍然是一个重要的瓶颈,存在再现性、冰质量和样品损失等问题。最近有报道称,新的方法使用喷涂或针印代替传统的吸墨纸方法。在此,报告了不同喷嘴设计和喷涂制度的使用经验及其对最终喷涂和格栅质量的影响。

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给出了使用低温电子显微镜制备用于高分辨率结构测定的样品的实用建议。

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欧洲同步加速器的Solution-to-Structure(SOS)管道简化了低温电子显微镜研究,为单粒子分析和低温电子层析成像提供了从网格准备到高分辨率数据收集的全过程。这项服务是专门为限制或无法访问低温电子显微镜基础设施的用户量身定制的,使他们能够进行筛选实验并获取适合高分辨率数据采集的样本。

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样品制备是低温电子显微镜(cryo-EM)的一个主要限制因素,尤其是对于100kDa以下的小分子。在此,详细介绍了为低温电子显微镜制备驱动蛋白结合蛋白(KBP;72 kDa)和KBP–驱动蛋白运动域(110 kDa。

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本研究探索了使用配备Gatan K3 DED的200keV Talos Arctica进行高速、高分辨率单粒子数据收集的参数。从每小时720部电影的数据集中获得了近原子分辨率的电子显微镜图。

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