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时间分辨低温电子显微镜是结构生物学中的一种新兴技术,它允许用户捕捉结构状态,否则对于标准方法来说,这些状态将过于短暂。过去五年来,该领域的技术进步有所回升,本次审查总结了技术亮点。

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时间分辨低温电子显微镜可以在毫秒级的非平衡条件下研究蛋白质。在这里,直接比较了流内和网格内混合技术,发现网格内反应可能受到空气-水相互作用的影响,而流内反应由于层流而使反应时间分布更广。

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时间分辨结构研究正在成为理解生物功能的重要工具。在这里,我们描述了一种能够在10毫秒内快速混合和插入冻结网格的低温电磁网格冻结装置。

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本文综述了基于单粒子冷冻电子显微镜研究的染色质生物学的最新进展。

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新方法和菲尼克斯介绍了低温电磁图、原子模型和模型-图拟合的质量评估工具。分析和讨论了这些工具在高分辨率低温电磁图和相应原子模型中的系统应用结果。

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在应用样品之前,用单链DNA覆盖低温电子显微镜格栅,可以减少大分子的聚集并改善其分布。它可以从传统网格上聚集的样品中确定结构。

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Cryo-EM可以制作分辨率足够高的地图,从而可以识别出精细的结构细节。使用计算的静电势图,可以识别镁2+与镁相比,与核苷酸碱基结合的离子不会发生电荷补偿2+-核糖体RNA中结合的磷酸基团。

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