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非线性光学(NLO)仪器已与同步辐射X射线衍射仪集成,用于联合单平台分析,检查NLO显微镜的可行性,以替代传统的X射线光栅扫描,实现样品定心。第二谐波发生显微镜和双光子激发紫外荧光显微镜用于晶体检测,并通过X射线光栅扫描进行评估。

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使用SONICC和TPE进行补充测量-UVF允许对蛋白质晶体进行敏感和选择性检测。

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用于蛋白质结晶的几种沉淀盐的二次谐波(SHG)和双光子激发紫外荧光(TPE-UVF)活性被评估为大分子晶体筛选中假阳性的潜在来源。结果表明,相对较强的SHG信号和微弱或缺失的TPE-UVF可以区分由SHG活性盐形成的晶体蛋白质。

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本文报道了将具有静止和振荡图像的快速连续网格扫描并入瑞士光源大分子晶体学光束线中,并利用扫描透射X射线显微镜对蛋白质晶体进行可视化。

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基于飞秒激光扫描显微镜的手性晶体二阶非线性光学成像(SONICC)已在通用汽车公司实现/卡@APS波荡光束线23ID-B用于快速蛋白质晶体定位和定心。该技术基于红外激光照射非中心对称蛋白质晶体,选择性产生倍频,蛋白质电子云对激光场的非谐响应产生的可见信号。该方法的一个目的是定位在不透明结晶介质中生长的小晶体,以便在横截面只有几微米或更小的X射线束中定心[1]。在光束线上实现的光学系统包括对二次谐波产生(SHG)信号的“trans”和“epi”检测[2]。此外,扫描样品上的可见激光并检测双光子激发的紫外荧光(TPE-UVF)可基于蛋白质的天然荧光提供互补对比度。将提供向用户提供用户友好系统的最新进展情况。将讨论影响成像信号的不同因素以及通过SONICC成功定位和准确定位晶体的实践。

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利用小角中子散射和脂质立方相(LCP)双层的对比匹配,我们确定细菌视紫红质(bR)和洗涤剂在加入LCP后大部分被解离。这意味着LCP中膜蛋白的结晶对洗涤剂的选择相对不敏感,与溶液情况不同,这已通过几种bR洗涤剂的实验验证。

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脂质立方相在相当大的浓度范围内与合成洋地黄素类似物GDN相容,实际上远远超出了典型膜结晶研究中可能遇到的浓度范围。因此,基于其与立方相的相容性,有充分的理由使用GDN作为制备膜蛋白的洗涤剂,这些膜蛋白随后会受到在中尺度晶体发生。

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