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使用紫外线成像作为定位蛋白质晶体的手段是一种相当新的工具,但并不适用于所有蛋白质结晶试验。文中给出了该技术的优点和一些缺陷的实例。

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开发了一种新的结晶板(MPI托盘),用于膜蛋白样品的紫外和可见光成像。表面性能的优化从根本上提高了板的可用性,即使在有洗涤剂的情况下也是如此。

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在重新尝试确定大分子结构的过程中,检测初始晶体撞击是结晶过程中的关键步骤。在初始基质筛选期间,最常见的策略是确定一种容易生长晶体的条件。对于难以结晶的样品来说,这种情况是罕见的,这导致Rigaku Automation专注于识别微晶沉淀的方法,以及在高通量(HTP)环境中进行进一步扩增试验的稍微有趣的条件。通常,在难结晶样品中观察到的初始晶体为微晶,并埋在沉淀样品中。在结晶试验中,紫外成像被证明是分析微晶成核的有力工具。为了进一步分析紫外成像结果,我们开发了FluorScore,这是一种数值方法,它将紫外图像简化为一个单一的数值度量,可用于根据荧光信号的类型和强度对液滴进行分类。这项研究将分析该算法的有用性,以成功检测新样品难结晶的潜在条件,以及一些标准蛋白质进行比较。将通过与FluorScore的算法结果相比较的详尽手动检查来评估分析结晶试验结果的挑战。在HTP结晶试验的情况下,所述算法是一个非常有用的工具,可用于识别含有微晶核的条件,并帮助结晶学家在膨胀试验中做出自信的决定。

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