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研究了蛋白质溶液浓度的微小变化对溶菌酶结晶成功率的影响,发现蛋白质浓度的微小差异低至0.13%(0.026 mg ml-1在目前的研究中)可能会对溶菌酶的结晶产生重大影响。

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报道了对蒸汽扩散蛋白质结晶法的改进,称为逐步干燥法。研究发现,这种方法可以显著增强蛋白质的结晶。

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结晶溶液制备过程中的天气参数,包括环境温度、湿度、压力和空气中的颗粒物,都会影响蛋白质结晶。在本研究所研究的参数中,湿度对溶菌酶结晶的影响最大。结果表明,结晶实验准备期间的天气条件应被视为影响蛋白质结晶的潜在因素。

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描述了一种识别和优化蛋白质结晶条件的方法,其中含蛋白质液滴的逐渐干燥确保了相变,并且所得固相的性质用于指导结晶条件的识别。结果表明,蛋白质晶体的数量、质量和大小在很大程度上取决于蛋白质浓度的增长率,这是所述方法中的一个关键变量。

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高浓度波动的增长导致过饱和蛋白质溶液中的相分离和成核。从结晶前诱导时间的核磁共振测量可以得出结论,溶菌酶的结晶是一个瞬态过程,而不是稳态过程。

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描述了一种新的结晶系统,它使基于蒸发的微流体结晶技术用于蛋白质结晶成为可能。使用这种方法,可以改善晶体生长,从而比使用标准方法更成功地获得约1mm大小的溶菌酶晶体。

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膜蛋白需要洗涤剂才能稳定在体外,但洗涤剂可能会干扰下游实验,如结晶学。这项工作提供了一种有效的方法来测量结晶学中最常用的糖苷洗涤剂的浓度。

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