天冬氨酸消旋酶（AspR）在不含PLP的情况下催化L-和D-天冬氨酸酯之间的相互转化。PLP非依赖性氨基酸消旋酶的唯一晶体结构现在可从高温古菌中获得。为了阐明消旋酶基团的结构特征和低温适应性，我们测定了来自萨氏乳杆菌NBRC 15893（LsAspR）的AspR的晶体结构，该酶在中低温范围内工作，并比较了来自立陶宛热球菌DSM 5473（TlAspR0C.LsAspR和TlAspR在20℃结晶0C使用25%（v/v）PEG-MME 550、5%（v/v）2-丙醇和0.1 M乙酸钠的沉淀溶液（pH 4.8）和24%（w/v）聚乙二醇1500、0.2 M L-脯氨酸和0.1 M HEPES pH 7.5的沉淀溶液，通过坐滴蒸汽扩散法进行。通过分子置换法测定LsAspR和TlAspR的结构，并分别在2.6º分辨率（R=23.8%，Rfree=31.6%）和2.0º分辨率下进行精细化（R=18.7%，Rfree=25.0%）。LsAspR和TlAspR分子都是具有分子双轴的同二聚体。每个酶分子的亚单位包括N端和C端结构域。分子主要由二聚体界面中N端α-螺旋和N端β-片之间的亚单位间氢键之间的亚基间相互作用形成。两个域之间存在活性位点分裂。裂中严格保守的半胱氨酸残基的空间排列揭示了参与酶催化的半胱酶残基。LsAspR和TlAspR的结构比较揭示了可能与AspR热稳定性有关的结构因素。分子体积、亚单位间相互作用和离子对数表明LsAspR分子比TlAspR更松散。
