眼镜王蛇磷脂酶a的结构₂由半面体孪晶确定

蛇毒是酶和非酶蛋白的混合物，用于固定和消化猎物。最常见的蛇毒酶包括乙酰胆碱酯酶、氨基酸氧化酶、丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶和磷脂酶A2。更高的催化效率、热稳定性和对蛋白水解的抗性使这些酶成为生物化学家、酶学家和结构生物学家的诱人模型。在这里，我们回顾了这些酶的结构，并描述了它们基于结构的催化和抑制机制。一些酶以蛋白质复合物的形式存在于毒液中。因此，我们还讨论了非酶亚单位的功能作用以及此类蛋白复合物的药理作用。抑制剂-酶复合物的结构为设计有效抑制剂提供了理想的平台，这些抑制剂有助于开发具有潜在治疗应用的原型和先导化合物。

许多研究已经全面研究了眼镜蛇的毒液。其毒液由不同的化合物组成，具有广泛的药理活性。在本研究中，用高效液相色谱法从越南汉纳蛇毒中分离出4个肽段（PFs），范围从3kDa到10kDa，并研究其对3T3-L1脂肪细胞脂肪生成的抑制活性。然后进一步纯化最有效的PF，生成两个肽，pOh1和pOh2。对3T3-L1脂肪细胞上这两种肽的研究表明，在10μg/mL的浓度下，pOh2能够抑制3T3-LI脂肪细胞中高达56%的脂质积累，而不会影响细胞活力。此外，pOh2下调重要转录因子C/EBP-α和PPAR-γ的基因表达。此外，与未经处理的分化细胞相比，aP2和GPDH脂肪细胞特异性标记物也显著减少。总之，pOh2抑制关键转录因子C/EBP-α和PPAR-γ及其靶基因aP2和GPDH的表达，从而阻止脂肪细胞分化。总之，这种新型肽可能具有体内抗肥胖作用的潜力。

磷脂酶A2（PLA（2））中发现了一个具有功能意义的新配体结合位点。非甾体抗炎药吲哚美辛在该部位的结合阻断了PLA的催化和抗凝血作用（2）。从罗素毒蛇（Daboia russelli pulchella，Russell’s viper）中分离到一组IIA PLA（2），它具有酶活性，并具有强烈的抗凝血作用。结合研究表明，吲哚美辛降低了PLA的抗凝血和促炎作用（2）。IIA族PLA（2）与吲哚美辛共结晶，并以1.4A的分辨率测定了络合物的结构。结构测定表明，PLA（2）结构中的消炎痛分子位于不同于传统底物结合位点的位置。吲哚美辛的一个羧基氧原子通过催化重要的水分子OW 18与Asp 49和His 48相互作用，而第二个羧基原子与Lys 69侧链形成离子相互作用。众所周知，残基、His 48和Asp 49对催化至关重要，而Lys 69是抗凝血环的一部分（残基，54-77）。吲哚美辛的结合方式阻止了两者的进入，它是PLA催化和抗凝作用的双重抑制剂（2）。首次在PLA（2）中观察到这种新的结合位点，吲哚美辛是第一个在这种新的位点结合的化合物，可以防止凝血和炎症。