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电压依赖性阴离子选择性通道（VDAC）是线粒体外膜形成孔的蛋白质。在哺乳动物中，VDAC3是特征最不明显的亚型，呈现出一组预计会暴露在膜间隙的半胱氨酸。我们发现VDAC3中的半胱氨酸可以保持不同的氧化状态。在我们的实验条件下，当VDAC3完全缺乏任何还原剂时，呈现出略有不同的电泳迁移率模式，这是初步观察到的。这一观察结果对大鼠肝线粒体VDAC3和重组人VDAC3均适用。质谱显示半胱氨酸2和8可以在天然VDAC3中形成二硫键桥。半胱氨酸2、8和122的单一或联合定点突变表明，SDS-PAGE中的蛋白质迁移率受半胱氨酸的存在和氧化还原状态的影响。此外，如电生理学、补体分析和化学物理表征所示，半胱氨酸2、8和122参与孔的稳定性控制。此外，还发现突变体的孔电导与其补充无孔酵母突变体细胞生长的能力呈正相关。我们的工作为线粒体蛋白的复杂氧化模式提供了证据，该氧化模式与电子传递无关。这种行为最可能的生物学意义是缓冲活性氧负荷并跟踪膜间空间的氧化还原水平，最终通过构象变化发出信号。
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