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.1998年3月30日;243(1):1-11.
doi:10.1006/viro.1998.9046。

使用编码酶活性萤火虫荧光素酶的新复制子证明脊髓灰质炎病毒包埋的特异性

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使用编码酶活性萤火虫荧光素酶的新复制子证明脊髓灰质炎病毒包埋的特异性

DC波特等。 病毒学. .
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摘要

利用一种新的嵌合基因组研究了脊髓灰质炎病毒包被的特异性,该嵌合基因组中编码萤火虫荧光素酶的基因已取代脊髓灰质病毒衣壳(P1)基因的VP2-VP3-VP1基因。从该基因组体外转录的RNA的转染产生了一种VP4-荧光素酶融合蛋白,该融合蛋白保留荧光素酶活性。由于酶活性的检测依赖于转染RNA基因组的复制,我们将这些基因组称为复制子。将基因组RNA转染到先前感染重组痘苗病毒VV-P1的细胞后,编码荧光素酶的复制子被封装,该病毒编码脊髓灰质炎病毒1型衣壳蛋白(P1)。对每个连续传代的细胞进行感染,然后对荧光素酶活性进行分析,结果表明,VV-P1在第一次传代时可以检测到包埋的复制子。与VV-P1连续传代后,包壳复制子的滴度扩增,感染后萤光素酶活性的高表达水平证明了这一点。荧光素酶复制子与脊髓灰质炎病毒1型、2型或3型的连续传代分别导致反包被进入1、2或3型衣壳。相反,与牛肠道病毒、柯萨奇病毒A21或B3或肠道病毒70的连续传代并没有导致反包被,尽管细胞与复制子和不同的肠道病毒的共同感染导致荧光素酶的高表达。这项研究的结果突出了脊髓灰质炎病毒包埋的特异性,并指出使用编码荧光素酶的包埋复制子作为分离复制和包埋元素的试剂。

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