Second-strand synthesis is a rate-limiting step for efficient transduction by recombinant adeno-associated virus vectors

doi:10.1128/JVI.70.5.3227-3234.1996

.1996年5月；70(5):3227-34.

doi:10.1128/JVI.70.5.3227-3234.1996。

二级合成是通过重组腺相关病毒载体进行有效转导的速率控制步骤

F K法拉利¹, T萨穆斯基, T Shenk公司, R J Samulski先生

附属公司

PMID： 8627803
预防性维修识别码：项目经理190186
内政部： 10.1128/JVI.70.5.3227-3234.1996年10月12日

二级合成是通过重组腺相关病毒载体进行有效转导的速率控制步骤

F K法拉利等。 J维罗尔. 1996年5月.

.1996年5月；70(5):3227-34.

doi:10.1128/JVI.70.5.3227-3234.1996。

作者

F K法拉利¹, T萨穆斯基, T Shenk公司, R J Samulski先生

附属

¹美国北卡罗来纳大学基因治疗中心，教堂山27599。

PMID： 8627803
预防性维修识别码：项目经理190186
内政部： 10.1128/JVI.70.5.3227-3234.1996

摘要

发现重组腺相关病毒（AAV）在体外转导带有标记基因的细胞的能力因腺病毒的存在而显著增强。腺病毒基因组DNA的转染实验表明，这种增加并不是由腺病毒介导的病毒摄取促进的，而是依赖于腺病毒基因的表达。使用各种腺病毒突变体，我们能够将该功能映射到早期区域E4开放阅读框6。在用重组AAV感染的细胞中，开放阅读框6蛋白的质粒表达增加了100至1000倍的转导。转导的增加并不依赖于重组AAV基因盒，而是似乎涉及AAV生命周期的早期阶段。已证明诱导野生型AAV无助复制的化学和物理试剂也能刺激重组AAV转导，表明这种现象可能影响AAV DNA复制。进一步的实验表明，病毒脱膜不受影响，速率限制步骤涉及在单链基因组AAV DNA上合成第二条链。这些数据表明，腺病毒E4区以及化学和物理因子在AAV生命周期的早期阶段，特别是在第二链合成中发挥着重要作用，并对AAV载体在基因治疗方案中的使用具有重要意义。

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