How to measure and predict the molar absorption coefficient of a protein

doi:10.1002/pro.5560041120

.1995年11月；4(11):2411-23.

doi:10.1002/pro.556041120。

如何测量和预测蛋白质的摩尔吸收系数

C N速度¹, F瓦伊多斯, L费用, G格里姆斯利, T灰色

附属公司

PMID： 8563639
预防性维修识别码： PMC2143013型
内政部： 10.1002/pro.5560041120

如何测量和预测蛋白质的摩尔吸收系数

C N速度等。蛋白质科学. 1995年11月.

.1995年11月；4(11):2411-23.

doi:10.1002/pro.5560041120。

作者

C N速度¹, F瓦伊多斯, L费用, G格里姆斯利, T灰色

附属

¹德克萨斯农工大学医学生物化学与遗传学系，美国大学城77843-1114。

PMID： 8563639
预防性维修识别码： PMC2143013型
内政部： 10.1002/pro.5560041120

摘要

蛋白质的摩尔吸收系数ε通常基于干重、氮或氨基酸分析测量的浓度。这里报道的研究表明，Edelhoch方法是测量蛋白质ε的最佳方法。（该方法由Gill and von Hippel[1989，Anal Biochem 182:319-326]描述，并基于Edelhoch[1967，Biochemistry 6:1948-1954]的数据）。蛋白质在280nm处的吸光度取决于Trp、Tyr和胱氨酸（二硫键）的含量。我们估算了18种特征明确的蛋白质样品中这些发色团的平均ε值，并测量了水、丙醇、6 M盐酸胍（GdnHCl）和8 M尿素中的ε值。对于Trp，蛋白质的平均ε值小于在任何溶剂中测量的ε值。对于Tyr，蛋白质的平均ε值介于6 M GdnHCl和丙醇中测量的ε值之间。根据80种蛋白质的116个测量ε值的样本，可以用以下等式最好地预测折叠蛋白质在280nm处的ε，ε（280）：ε（28）（M-1 cm-1）=（#Trp）（5500）+（#Tyr）（1490）+，而对不可靠的蛋白质则不太可靠。然而，Edelhoch方法方便且准确，最好的方法是测量而不是预测ε。

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