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.1986年9月；2(3):163-7.

doi:10.1002/年320020304。

具有多个独特限制性位点的酵母/大肠杆菌穿梭载体

J E Hill公司¹, A M迈尔斯, T J科尔纳, 扎戈洛夫

附属公司

PMID： 3333305
内政部： 10.1002/年320020304

具有多个独特限制性位点的酵母/大肠杆菌穿梭载体

J E Hill公司等。酵母. 1986年9月.

.1986年9月；2(3):163-7.

doi:10.1002/年320020304。

作者

J E Hill公司¹, A M迈尔斯, T J科尔纳, 扎戈洛夫

附属

¹哥伦比亚大学生物科学系，纽约州纽约市10027。

PMID： 3333305
内政部： 10.1002/年320020304

摘要

已经构建了两个酵母/大肠杆菌穿梭载体。这两种载体YEp351和YEp352具有以下特性：（1）它们可以在酿酒酵母和大肠杆菌中自主复制；（2）它们含有β-内酰胺酶基因，并赋予氨苄西林对大肠杆菌的耐药性；（3）它们包含pUC18的整个序列；（4） pUC18多重克隆区的10个限制性位点，包括EcoRI、SacI、KpnI、SmaI、BamHI、XbaI、SalI、PstI、SphI和HindIII在YEp352中都是唯一的；除EcoRI和KpnI两次出现外，这些位点在YEp351中也是唯一的；（5）在YEp351和YEp352的多克隆区插入DNA的重组质粒可以通过在适当的大肠杆菌宿主中丧失β-半乳糖苷酶功能来识别；（6） YEp351和YEp352分别含有酵母LEU2和URA3基因，允许在酵母和大肠杆菌中选择这些营养缺陷型标记；（7）这两种质粒在非选择性条件下生长的酵母中保留频率较高，表明质粒拷贝数较高。上述特性使穿梭载体适合于构建酵母基因组文库和克隆由大量不同限制性位点定义的DNA片段。通过删除酵母自主复制所必需的序列，这两种载体已被进一步修改。因此，衍生质粒YIp351和YIp352可用于将特定序列整合到酵母染色体DNA中。

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