Fluorescence probe measurement of the intralysosomal pH in living cells and the perturbation of pH by various agents

doi:10.1073/pnas.75.7.3327

.1978年7月；75(7):3327-31.

doi:10.1073/pnas.75.7.3327。

活细胞溶酶体内pH值的荧光探针测量和各种试剂对pH值的扰动

S Ohkuma公司, B池

PMID： 28524
预防性维修识别码：项目经理392768
内政部： 10.1073/pnas.75.7.3327

活细胞溶酶体内pH值的荧光探针测量和各种试剂对pH值的扰动

S Ohkuma公司等。美国国家科学院程序. 1978年7月.

.1978年7月；75(7):3327-31.

doi:10.1073/pnas.75.7.3327。

作者

S Ohkuma公司, B池

PMID： 28524
预防性维修识别码：项目经理392768
内政部： 10.1073/pnas.75.7.3327

摘要

描述了一种定量测量活细胞溶酶体内pH值的方法。荧光素异硫氰酸标记的右旋糖酐（FD）被内吞并积聚在溶酶体中，在那里它保持不明显降解。该化合物的荧光光谱随pH值在4-7范围内变化，不受FD浓度、离子强度或蛋白质浓度的严重影响。盖玻片上的活细胞安装在荧光分光光度计细胞中，可以用各种培养基灌注。巨噬细胞溶酶体内的正常pH值似乎为4.7-4.8，尽管它可以暂时降至4.5。细胞暴露于各种弱碱和酸性钾离子载体会导致pH值升高。pH值的变化比弱碱在溶酶体内的积累要快得多。糖酵解抑制剂（2-脱氧葡萄糖）和氧化磷酸化抑制剂（氰化物或叠氮化物）一起添加，但不单独添加，会导致溶酶体内pH值升高。这些结果为溶酶体膜中存在活性质子积累机制提供了证据，并支持了溶酶体通过质子捕获积累弱碱的理论。

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