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.1988年3月15日;263(8):3542-5.

人载脂蛋白E的定点突变。具有单一氨基酸取代的变体的受体结合活性

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  • PMID: 2831187
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人载脂蛋白E的定点突变。具有单一氨基酸取代的变体的受体结合活性

拉拉扎尔等。 生物化学杂志. .
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摘要

载脂蛋白E是参与血浆胆固醇转运的重要蛋白,与载脂蛋白B、E(低密度脂蛋白)受体具有高度的特异性和亲和力。一些证据表明,载脂蛋白E的140-160残基附近的关键基本残基在介导与受体的结合方面很重要。此外,表现出受体结合缺陷的载脂蛋白E变异体与遗传性脂质障碍III型高脂蛋白血症相关。为了确定载脂蛋白E这一区域的其他碱性氨基酸是否也影响受体结合活性,在细菌表达系统中对载脂蛋白e进行了定点突变。该系统已成功用于制备在结构和功能上与人血浆apoE3相当的apoE3。产生了apoE的变体,其中中性氨基酸取代了136、140、143和150位的碱性残基。变种都显示出有缺陷的结合;它们的活动范围为正常的9%至52%(与人类apoE的自然变异相似)。此外,为了确定该区域的构象对受体结合是否重要,我们设计了脯氨酸替代亮氨酸144或丙氨酸152的变体。两种变体都有缺陷,分别表现出13%和27%的正常结合。相反,精氨酸取代丝氨酸139,丙氨酸取代亮氨酸149的双突变体显示出轻微增强的受体结合活性。这些研究证实了apoE分子的中间在受体结合中是重要的,并表明只有该区域的某些氨基酸取代会干扰受体结合活性。

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