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.2011年3月;32(3):271-8.
doi:10.1093/carcin/bgq253。 Epub 2010年11月26日。

TP53内含子3的G-四链体结构:在选择性剪接和p53 mRNA亚型产生中的作用

附属公司

TP53内含子3的G-四链体结构:在选择性剪接和p53 mRNA亚型产生中的作用

维吉尼·马塞尔等。 致癌作用. 2011年3月.

摘要

编码p53的肿瘤抑制基因TP53以几种转录物的形式表达。完全剪接的p53(FSp53)转录物编码典型的p53蛋白。交替剪接的p53I2转录物保留内含子2并编码Δ40p53(或ΔNp53),这是一种缺乏与主转录激活域对应的前39个N末端残基的亚型。我们证明了在内含子3的富含GC的区域中形成G四联体结构(G4),该区域调节内含子2的剪接。首先,我们通过紫外熔融、热差光谱和圆二色光谱显示了包含内含子3序列的合成RNA中G4的形成。在内含子3的合成RNA中检测到G4诱导的逆转录酶延伸终止,证实了这些观察结果。在该区域,p53前信使RNA(mRNA)包含一系列短外显子(外显子2和3)和内含子(内含子2和4),总长度为333 bp。在绿色荧光蛋白报告子剪接试验中,与内含子2的切除相比,推测参与G4形成的G-tracts的定点突变减少了约30%。此外,用360A(一种与单链G4结构结合的合成配体)处理淋巴母细胞,可增加FSp53 mRNA的形成并降低p53I2 mRNA的表达。这些结果表明,内含子3中的G4结构调节内含子2的剪接,导致编码不同p53亚型的转录物的差异表达。

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