Ganglioside GT1b is a putative host cell receptor for the Merkel cell polyomavirus

doi:10.1128/JVI.00949-09

.2009年10月；83(19):10275-9.

doi:10.1128/JVI.00949-09。 Epub 2009年7月15日。

神经节苷脂GT1b是默克尔细胞多瘤病毒的假定宿主细胞受体

金伯利·D·埃里克森¹, 罗伯特·加尔恰, 蔡比利

附属公司

PMID： 19605473
预防性维修识别码： PMC2748031型
内政部： 10.1128/JVI.00949-09

神经节苷脂GT1b是默克尔细胞多瘤病毒的假定宿主细胞受体

金伯利·D·埃里克森等。 J维罗尔. 2009年10月.

.2009年10月；83(19):10275-9.

doi:10.1128/JVI.00949-09。 Epub 2009年7月15日。

作者

金伯利·D·埃里克森¹, 罗伯特·加尔恰, 蔡比利（Billy Tsai）

附属

¹科罗拉多大学博尔德分校分子、细胞和发育生物学系，地址：347 UCB，Boulder，CO 80309，USA。

PMID： 19605473
预防性维修识别码：下午748031
内政部： 10.1128/JVI.00949-09

摘要

最近在人类默克尔细胞癌（一种侵袭性神经内分泌皮肤癌）中发现了默克尔细胞多瘤病毒（MCPyV）。在这里，我们确定了MCPyV的假定宿主细胞受体。在蔗糖梯度浮选试验中，我们发现重组MCPyV VP1五聚体帽状体既能凝集绵羊红细胞，又能与神经节苷脂GT1b相互作用。分析的神经节苷脂之间的结构差异表明，MCPyV VP1可能与GT1b碳水化合物链的两个分支上的唾液酸相互作用。MCPyV潜在宿主细胞受体的鉴定将有助于阐明其进入机制和病理生理学。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
MCPyV VP1的特性。重组MCPyV VP1形成五聚体和血凝绵羊红细胞。（A）考马斯蓝染色SDS-PAGE和纯化的重组MCPyV VP1蛋白的免疫印迹显示。显示了分子质量标记。（B）纯化MCPyV VP1的电子显微照片。将MCPyV VP1（如面板A所示）稀释至100μg/ml，并吸收到Formvar/碳涂层铜格栅上。样品用磷酸盐缓冲盐水清洗，用1%乙酸铀酰染色，并在80 kV下通过透射电子显微镜观察。Bar=20 nm。（C）绵羊红细胞（0.5%）与纯化的重组SV40 VP1（A行）、mPyV VP1（B行）和MCPyV VPN1（C行）的浓度降低一起孵育。孔1至孔11包含两倍的蛋白质系列稀释液，起始浓度为2μg/ml（孔1）。井12仅包含缓冲液，并作为阴性对照。Well 7（B行和C行）对应于每2μg/ml VP1蛋白128个血凝单位。

**图2。**
MCPyV VP1与质膜上的一个蛋白酶抗性唾液酸受体结合。（A）纯化的重组MCPyV VP1与或不与所示的质膜一起孵育。样品在不连续的蔗糖梯度中漂浮，从梯度顶部收集组分，进行SDS-PAGE，并用抗VP1抗体I58进行免疫印迹。（B）对照组和蛋白酶K处理的质膜进行SDS-PAGE，然后进行考马斯蓝染色。（C）用蛋白酶K（4μg/ml）处理的HeLa细胞与MCPyV在4°C孵育，并检测所得细胞裂解液中是否存在MCPyVVP1。（D）如面板C图例所述，除了使用了293T电池外。（E）纯化的MCPyV VP1与用或不用α2-3,6,8神经氨酸酶预处理的质膜一起孵育，并如图A图例所述进行分析。

**图3。**
MCPyV VP1与神经节苷脂GT1b结合。（A）神经节苷脂GM1、GD1a、GD1b和GT1b的结构。说明了糖苷键的性质。（B）纯化的MCPyV VP1蛋白仅与脂质体或含有所示神经节苷脂的脂质体孵育。按照图2A的图例所述对样品进行分析。如有指示，用α2-3,6,8神经氨酸酶对含GT1b的脂质体进行预处理，然后进行病毒结合分析。（C至E）用脂质体培养所示病毒，并按照B组图例所述进行分析。

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