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.2005年7月15日;118(第14部分):3091-102。
doi:10.1242/jcs.02447。 Epub 2005年6月28日。

细胞凋亡/自噬悖论:细胞凋亡死亡前的自噬空泡化

附属公司

凋亡/自噬悖论:凋亡死亡前的自噬空泡化

罗莎·阿娜·冈萨雷斯-波罗等。 细胞科学杂志. .

摘要

自噬细胞死亡的形态学特征是自噬空泡的积聚。在这里,我们表明,通过RNA干扰或同源重组使LAMP2失活会导致营养缺乏细胞中的自噬空泡化。缺乏LAMP2表达的细胞显示携带标记LC3的空泡堆积增强,但LC3和溶酶体的共定位减少,表明自噬空泡和溶酶体间的融合受到抑制。虽然饥饿的LAMP2表达细胞中的一部分线粒体与溶酶体标记共定位在自噬体内,但从实验系统中去除LAMP2后,没有发现这种共定位。值得注意的是,LAMP1缺失没有这种影响,也不会加剧LAMP2特异性小干扰RNA诱导的表型。血清和氨基酸标记的LAMP2阴性细胞表现出自噬空泡的积累,然后以线粒体跨膜电位丧失等凋亡特征导致细胞死亡,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶激活和染色质浓缩。虽然半胱天冬酶抑制可延缓细胞死亡,但对线粒体没有保护作用。然而,通过过度表达Bcl-2或线粒体靶向巨细胞病毒蛋白vMIA来稳定线粒体,可阻断所有凋亡迹象。胱天蛋白酶抑制和线粒体稳定都不能拮抗LAMP2缺陷细胞中的自噬空泡化。总之,这些数据表明,自噬空泡的积累可以先于凋亡细胞死亡。这些发现反对1型(凋亡)和2型(自噬)细胞死亡之间的明确区别。

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