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比较研究
.2004年3月;50(3):564-73.
doi:10.1373/clinchem.2003.028506。 Epub 2004年1月12日。

血浆中可扩增循环RNA的特征及其作为癌症诊断工具的潜力

附属公司
比较研究

血浆中可扩增循环RNA的特征及其作为癌症诊断工具的潜力

塔拉尔·埃尔·赫纳维等。 临床化学. 2004年3月.

摘要

背景:最近的几份报告描述了检测癌症患者血清或血浆中循环的、与癌症相关的RNA分子,但对这种细胞外RNA的生物学知之甚少。我们旨在确定RNA如何防止血清中的降解,优化从大量血清中分离RNA,并测试我们优化的基于血清的癌症检测方法。

方法:我们使用定量逆转录-PCR(QRT-PCR)分析来研究胞外血浆RNA的分离和生物学。然后我们检查了来自对照组、食管癌和恶性黑色素瘤患者的血浆和血清中是否存在可扩增RNA转录物。

结果:我们发现血浆中的细胞外RNA高度降解,可以通过胍基-苯酚萃取和沉淀最有效地分离。细胞外RNA在血清中稳定3小时,但添加洗涤剂后会立即被破坏。细胞外RNA可以被0.2微米的过滤器捕获,从而可以从几毫升血浆中浓缩RNA。当我们从高达4毫升的血清中浓缩RNA时,在癌症患者和对照组的血清中检测到癌症相关转录物的频率很低且不一致。

结论:细胞外RNA很可能受到蛋白质或脂质小泡(可能是凋亡体)的保护,而洗涤剂可以破坏这些小泡。尽管优化了血浆RNA检测的许多方面,但我们无法重复检测癌症相关转录物。我们的数据表明,测量循环RNA可能不是早期癌症诊断的好方法。

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