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.2002;2(2):83-92.
doi:10.1023/a:1020424023207。

附加亲和标签对MBP融合蛋白溶解度的差异影响

附属公司

附加亲和标签对MBP融合蛋白溶解度的差异影响

Karen M Routzahn先生等。 J结构功能基因组学. 2002.

摘要

很难想象任何不涉及基因工程亲和标签的高通量蛋白质表达和纯化策略。大肠杆菌麦芽糖结合蛋白(MBP)具有提高溶解度和促进融合伙伴正确折叠的能力,是一种特别有用的亲和标记。然而,并非所有MBP融合蛋白都能与直链淀粉树脂有效结合,即使如此,通常也不可能在一个亲和步骤后获得足够纯度的样品。为了解决这个问题,我们试图在MBP融合蛋白的框架内加入附加亲和标记。我们表明,补充标签的性质及其位置都会影响MBP促进其融合伙伴溶解度的能力。高通量蛋白表达和纯化最有希望的结构似乎是MBP N端带有生物素受体肽(BAP)的融合蛋白和/或乘客蛋白C端的六组氨酸标签(His-tag)。

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