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.2000年6月6日;39(22):6726-31.
doi:10.1021/bi000108r。

大肠杆菌亮氨酸-tRNA合成酶的CP1结构域对其编辑功能至关重要

附属公司

大肠杆菌亮氨酸-tRNA合成酶的CP1结构域对其编辑功能至关重要

J F Chen先生等。 生物化学. .

摘要

氨酰-tRNA合成酶通过两个筛选步骤实现对氨基酸的识别;大于同源底物的氨基酸被“粗筛”拒绝,而小于同源底物氨基酸的反应产物将通过“细筛”水解。对于I类氨酰-tRNA合成酶IleRS,提出了这种“双筛”机制。在本研究中,我们从大肠杆菌中创建了LeuRS-B,一种突变的亮氨酸-tRNA合成酶,其肽片段从Met328复制到Pro368(在其CP1结构域内)。该突变体具有野生型酶50%的亮氨酸化活性,并且在反应的第一步具有相同的识别非共轭氨基酸的能力。然而,LeuRS-B可以通过蛋氨酸或异亮氨酸催化tRNA(Leu)的误充电,这表明它编辑不正确产品的能力受损。野生型亮氨酸-tRNA合成酶可以编辑LeuRS-B产生的误充tRNA(Leu),而分离的CP1结构域则不能。这些数据表明,亮氨酸-tRNA合成酶的CP1结构域对第二个编辑筛至关重要,CP1需要亮氨酸-tRNA合成酶中的结构上下文来实现其编辑功能。

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