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.2000年6月:113(第11部分):1993-2002。
doi:10.1242/jcs.113.11993。

表达突变动态蛋白的哺乳动物细胞高尔基体结构和功能的破坏

附属公司

表达突变动态蛋白的哺乳动物细胞高尔基体结构和功能的破坏

H曹等。 细胞科学杂志. 2000年6月.

摘要

大GTPase动力蛋白是一种机械酶,参与从质膜上剪断新生小泡。最近,通过形态学和生物化学方法证明了dynamin与哺乳动物细胞中的高尔基体结合。使用表征良好的无细胞测定的其他研究支持了这些发现,证明了在反式高尔基体网络(TGN)形成网格蛋白包被和非网格蛋白包被的囊泡时需要动力蛋白功能。在本研究中,我们通过表达显性负性动态蛋白结构(K44A)来测试动态蛋白是否参与活细胞的高尔基功能。联合转染表达这种突变动态蛋白和GFP标记的高尔基常驻蛋白(TGN38)的细胞显示出高尔基体结构,这些结构要么是致密的,要么是泡状的,要么就是管状的。这些突变体细胞的电子显微镜显示,大量高尔基体堆积物由高度小管化的池和大量被包裹的囊泡芽组成。与对照细胞相比,表达突变体dynamin和GFP标记的VSVG的细胞在高尔基体中表现出新生病毒G蛋白的显著保留(8-11倍)。这些在活细胞中的观察结果与之前的形态学和体外研究一致,这些研究表明动力蛋白在TGN分泌囊泡的形成中发挥作用。

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