L.J.古雷,C.皮亚诺,C.迪恩托尼奥,L.佩莱蒂,A.彼得雷利,R.别墅,E.马特拉佐,拉索(P.Lassaux),C.桑托罗,S.普契奥,D.斯布拉特罗和博洛涅西 势守恒域的1.8º分辨率晶体结构类鼻疽伯克霍尔德菌抗原和三聚体自身转运体BPSL2063被认为是类鼻疽疫苗开发的结构疫苗靶点。由于BPSL2063(1090个氨基酸)只有一个保守结构域,并且全长蛋白的表达/纯化被证明存在问题,因此使用β-内酰胺酶作为报告基因生成了一个结构域过滤文库,以选择更多的BPSL2062结构域。结果,鉴定出两个结构域(D1和D2),并在大肠杆菌此外,作为通用工具,来自假鼻疽杆菌基因组的构建也有助于从整个ORFeome中选择结构域边界。这种方法允许选择三种同样以可溶性形式产生的潜在蛋白质抗原。结果表明ORF过滤方法将进一步发展,作为基于蛋白质研究的工具,以改进可溶性蛋白质或结构域的选择和产生,用于X射线晶体学等下游应用。