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众所周知,蛋白质的结晶强烈依赖于结晶条件,结晶条件有时对环境干扰非常敏感。众所周知,沉淀剂或蛋白质的浓度、pH值、温度等参数会影响结晶的可能性,结晶新蛋白质的任务通常涉及使用多种结晶条件组合的试验和误差测试。这些结晶参数,例如蛋白质或沉淀剂的浓度,非常重要,因为它们直接影响结晶的驱动力:溶液的过饱和度。虽然浓度会影响结晶过程是常识,但结晶过程对浓度变化的敏感性却很少被提及。由于难以直接制备浓度变化很小的溶液,因此很难研究其对结晶过程的影响。本文提出了一种研究微小浓度变化对蛋白质结晶成功率影响的简单而新颖的方法。通过蒸发结晶液滴,可以产生精细的浓度梯度。通过这种微调的浓度梯度,可以观察到浓度或过饱和度的微小变化对结晶的影响。浓度变化很小(低至初始浓度的0.13%,即0.026毫克毫升-1溶菌酶和0.052 mg ml-1或者过饱和度的微小变化(小到0.018)可能会导致结晶成功率的明显差异,这表明蛋白质的结晶对浓度水平非常敏感。这种敏感行为可能是蛋白质结晶重现性差的原因之一。
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