在线购买文章-访问此文章需要在线订阅或购买单篇文章。
H.丁,H.任,Q.陈,G.方,李立群(L.Li),R.李,Z.Wang(王),十、贾,Y.Liang先生,胡先生,Y.Li(李彦宏),J.罗,X.顾,X.-D.苏,M.罗和S.Lu公司 选取54个人类基因作为检测靶点,进行平行克隆、表达、纯化和结晶。来自这些基因的蛋白质被选为分子量在14至50 kDa之间,不含高百分比的疏水残基(即更有可能是可溶的),并且没有已知的晶体结构,也不知道是杂合物的亚单位。选择四种含有跨膜区的蛋白质进行比较试验。迄今为止,已使用Gateway™克隆系统(荷兰Invitrogen)构建了44个表达克隆。其中,35个克隆在大肠杆菌菌株BL21(DE3)-pLysS,其中12株可溶,4株已纯化至均一。在96个平板上,在油中筛选纯化蛋白的结晶条件。在用相同的设备或吊滴法进一步细化后,生长出针状、平板状和棱柱状的晶体。收集了蛋白质NCC27的2.12º数据集。该结果为高通量靶点选择、克隆、表达和人类基因组蛋白结晶提供了见解。
![](https://journals.iucr.org/logos/arrows/smarrr.png)
订阅结晶学报D辑:生物晶体学